摘要
克隆苦荞苯丙烷类物质代谢途径中的关键酶肉桂酸-4-羟基化酶基因(FtC4H),为进一步研究其功能奠定基础.以云荞1号和小米荞为材料,提取不同发育期果壳RNA,利用RT-PCR法克隆苦荞FtC4H基因,运用生物信息学分析FtC4H蛋白的特征,构建FtC4H蛋白系统进化树,分析其基因表达.结果 表明,克隆的FtC4H基因序列包含1299bp完整的cDNA开放阅读框,编码432个氨基酸,为亲水性不稳定碱性蛋白,具有P450超家族保守域,不具有跨膜结构域,有丰富的二级结构,三级结构预测显示FtC4H与6vby.1.A的序列相似度高.系统进化分析结果表明,本研究克隆的FtC4H与已报道的苦荞其他C4H基因不同.qRT-PCR结果表明,FtC4H在小米荞的花和叶中相对表达量显著高于云荞1号.
基金项目
国家自然科学基金地区科学基金(31460379)
财政部和农业部:国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-07-C-2)
山西省重点研发计划(201803D221012-6)
2019年中医药公共卫生服务补助专项全国中药资源普查项目(财社[2019]68号)