首页|LncRNA HOTAIR调节细胞自噬对脊髓损伤模型神经元凋亡的保护作用

LncRNA HOTAIR调节细胞自噬对脊髓损伤模型神经元凋亡的保护作用

扫码查看
原文链接
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
目的:探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)HOX转录反义 RNA(HOTAIR)在脊髓损伤凋亡和自噬中的作用及相关机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(SCI组)。构建缺氧缺糖诱导的SY-SH5Y细胞模型(OGD模型)，将SY-SH5Y细胞分为 Control组、OGD 组、OGD+Vector 组、OGD+pcDNA-HOTAIR 组、OGD+pcDNA-HOTAIR+NC mimic 组、OGD+pcDNA-HOTAIR+miR-17 mimic组。通过脊髓损伤运动功能(BBB)评分评估大鼠运动功能的恢复能力;通过双荧光素酶报告基因实验分别检测 HOTAIR 和 miR-17、miR-17 和 Beclin-1 之间的靶向关系;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测大鼠脊髓组织和细胞中HOTAIR、miR-17、Beclin-1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠脊髓组织和细胞中Beclin-1、微管相关蛋白轻链 3Ⅱ(LC3Ⅱ)、P62蛋白的表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与 Sham组比较，SCI 组大鼠 BBB评分下降，脊髓组织中HOTAIR水平降低，miR-17 水平升高，差异均有统计学意义(P<0。05)。与 Control 组比较，OGD 组处理的 SY-SH5Y 细胞中HOTAIR水平降低，miR-17水平升高，神经元凋亡率升高，LC3Ⅱ蛋白表达降低，P62蛋白表达升高，差异均有统计学意义(P<0。05);与OGD+Vector组比较，OGD+pcDNA-HOTAIR组细胞中 HOTAIR水平升高(P<0。05)，神经元凋亡率降低(P<0。05)，LC3Ⅱ蛋白表达升高(P<0。05)，P62蛋白表达降低(P<0。05)，而自噬抑制剂 3-甲基腺嘌呤(3-MA)逆转了这一结果(P<0。05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，Beclin-1是 miR-17的靶基因，miR-17 是 HOTAIR的靶基因。与 OGD+pcDNA-HOTAIR+NC mimic组比较，OGD+pcDNA-HOTAIR+miR-17 mimic组细胞中 miR-17表达明显升高，神经元凋亡率明显升高，Beclin-1 和 LC3Ⅱ蛋白表达降低，P62蛋白表达升高，差异均有统计学意义(P<0。05)。结论:LncRNA HOTAIR通过靶向 miR-17/Beclin-1 通路增强自噬，从而减轻神经元凋亡和改善脊髓损伤。

赵俊、陈勇、吴春芳

展开 >

河南大学附属淮河医院(河南开封 475000)

脊髓损伤 长链非编码核糖核酸 HOX转录反义 RNA 细胞自噬 神经元凋亡

河南省医学科学研究重点课题计划基金项目

202102310398

2024

10.12102/j.issn.1672-1349.2024.01.014

中西医结合心脑血管病杂志
中国中西医结合学会　山西医科大学第一医院

中西医结合心脑血管病杂志

CSTPCD
影响因子：1.463
ISSN：1672-1349
年,卷(期)：2024.22(1)
  • 24