摘要
目的:探讨长链非编码 RNA(lncRNA)DANCR对缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞 PC12氧化损伤的影响及其可能作用机制.方法:选取榆林市星元医院于 2019年 10月—2021年 10月就诊的缺血性脑卒中病人 40例为疾病组,以同期 30 名健康体检者为正常组,检测 lncRNA DANCR、miR-193a-3p表达量,Pearson法分析血清 lncRNA DANCR与 miR-193a-3p的相关性;建立缺氧诱导的PC12细胞损伤模型,si-NC、si-DANCR、miR-NC、miR-193a-3p mimics分别转染至PC12细胞后缺氧处理 24 h,si-DANCR+anti-miR-NC、si-DANCR+anti-miR-193a-3p分别共转染至 PC12 细胞后缺氧处理 24 h;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测 lncRNA DANCR、miR-193a-3p表达量;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用凋亡试剂盒检测凋亡率;双荧光素酶报告实验检测 lncRNA DANCR、miR-193a-3p靶向关系;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测 cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9蛋白表达量.结果:血清中lncRNA DANCR与miR-193a-3p表达呈负相关.缺氧处理后,PC12细胞中 lncRNA DANCR表达量升高(P<0.05),miR-193a-3p表达量降低(P<0.05);分别与转染 si-NC或 miR-NC比较,转染 si-DANCR或 miR-193a-3p mimics后,缺氧诱导的 PC12细胞 LDH漏出率、MDA含量、凋亡率、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9 蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05);与共转染 si-DANCR+anti-miR-NC比较,共转染 si-DANCR+anti-miR-193a-3p后,缺氧诱导的 PC12细胞 LDH漏出率、MDA含量、凋亡率、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9 蛋白水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05).结论:干扰 lncRNA DANCR可通过促进 miR-193a-3p表达而抑制氧化应激、细胞凋亡,从而减轻缺氧诱导的 PC12细胞损伤,血清中 lncRNA DANCR、miR-193a-3p水平对缺血性脑卒中病人具有预测价值,且联合诊断价值更高.
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