摘要
目的:探讨葛花总黄酮对高糖诱导内皮细胞损伤的影响及其可能的作用机制.方法:采用高糖诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)建立细胞损伤模型,葛花总黄酮处理高糖诱导的HUVECs;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测 miR-155-5p 的 mRNA表达量;anti-miR-NC、anti-miR-155-5p 分别转染至 HUVECs 后加入含有 30 mmol/L 葡萄糖处理 24 h,miR-NC、miR-155-5p mimics分别转染至HUVECs后加入含有100 mg/L葛花总黄酮与30 mmol/L葡萄糖处理24 h,采用上述方法分别检测细胞凋亡率、MDA的水平和SOD、GSH-Px的活性;Cleaved-Caspase 3、Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)法进行检测.结果:葛花总黄酮处理后,高糖诱导的HUVECs中MDA水平、凋亡蛋白Cleaved-Caspase 3、Cleaved-Caspase 9表达和凋亡率下降(P＜0.05),miR-155-5p表达量降低(P＜0.05),SOD、GSH-Px活性升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性;转染 anti-miR-155-5p 后,MDA 水平、凋亡蛋白 Cleaved-Caspase 3、Cleaved-Caspase 9 表达、凋亡率、SOD、GSH-Px 的活性呈现出葛花总黄酮处理组相同的趋势(P＜0.05);转染miR-155-5p mimics可减弱葛花总黄酮对高糖诱导的HUVECs氧化应激及凋亡的作用.结论:葛花总黄酮可以抑制miR-155-5p表达,减轻细胞氧化损伤和凋亡,减轻高糖引起的内皮细胞损伤.
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