摘要
目的:探讨熟地黄多糖对多西他赛耐药前列腺癌细胞株自噬的影响及作用机制.方法:构建多西他赛耐药前列腺癌细胞株DU145(DU145-DR),以不同浓度熟地黄多糖作用12 h后,MTT法检测细胞增殖抑制率,选择熟地黄多糖对DU145-DR的半数抑制浓度(IC50)进行后续实验.将细胞随机分为空白对照组、熟地黄多糖组、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组与熟地黄多糖+IGF-1组,MTT法检测细胞相对活力,流式细胞术分析细胞凋亡率和自噬率,qPCR检测自噬相关基因Beclin1、AKT、mTOR mRNA表达,Western Blot检测自噬相关蛋白和mTOR通路相关蛋白表达.结果:熟地黄多糖可呈浓度依赖性抑制DU145-DR细胞增殖.与空白对照组比较,熟地黄多糖组细胞相对活力显著降低,凋亡率、自噬率、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及自噬基因Beclin1 mRNA表达显著升高,P62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著降低(P＜0.05).与熟地黄多糖组比较,熟地黄多糖+IGF-1组细胞相对活力显著升高,凋亡率、自噬率、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin1 mRNA表达显著降低,P62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论:熟地黄多糖对DU145-DR细胞株具有促进自噬、诱导凋亡和抑制增殖的作用,其机制可能与调控mTOR信号通路有关.
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