多重连接探针扩增技术鉴别酸枣仁及混伪品的研究

Identification of Ziziphus jujuba var.spinosa Seeds and its Adulterants by Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification Technique

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中文摘要：目的:针对市场上出现的酸枣仁药材掺假现象,开发一种快速鉴别酸枣仁药材是否含有掺伪品的方法.方法:基于多重连接探针扩增技术(MLPA),针对酸枣仁与理枣仁ITS2序列205位点处A/G变异,以及枳椇子170位点分别设计酸枣仁、理枣仁与枳棋子的MLPA探针,MLPA扩增后依据熔解曲线Tm值差异来进行鉴别,并考察了特异性、敏感度、掺伪比等内容,以验证该方法的可行性.结果:酸枣仁、理枣仁和枳棋子分别与特异性探针在85.56℃、87.26℃和83.93℃处出现单一扩增峰,表明探针特异性好;通过不断稀释DNA模板,仍旧可以检测出0.05 ng酸枣仁DNA量,同样酸枣仁中掺入10％的伪品均可被有效检出,表明该方法具有高灵敏度.结论:该研究建立的酸枣仁药材及其混伪品鉴别方法具有特异性强、灵敏度高的特点,对于解决酸枣仁药材掺伪问题具有良好的推广应用价值.

作者：

王文斌、莫静、程华春、胡志刚、杜巍、汪波

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作者单位：

湖北省药品监督检验研究院,湖北武汉430075

湖北中医药大学,湖北武汉430065

湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062

武汉大学生命科学学院,湖北武汉430072

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关键词：

酸枣仁理枣仁枳椇子多重连接探针扩增技术鉴别

基金：

国家自然科学基金湖北省科技重大专项湖北省自然科学基金重点项目

项目编号：

819734292020ACA0072020CFA024

出版年：

2022

DOI：

10.13863/j.issn1001-4454.2022.04.009

中药材

国家食品药品监督管理局,中药材信息中心站

中药材

CSTPCD北大核心

影响因子：0.913

ISSN：1001-4454

年,卷(期)：2022.45(4)

参考文献量10