摘要
目的 构建纳米自组装短肽RADA16-Ⅰ三维细胞培养模型,探讨卵巢癌细胞A2780三维培养的可能性.方法 采用透射电镜观察细胞支架材料结构特征;MTT比色法观察细胞粘附情况;通过荧光显微镜和DNA含量测定检测细胞生长情况;免疫组化法检测细胞粘附分子(整合素β1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白)表达情况;ELISA检测细胞相关因子(VEG-FA、EGF、FGF2、IGF1)表达水平;活性氧检测法检测支架材料中细胞氧活性情况.结果 与Matrigel和Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)相比,纳米自组装短肽RADA16-Ⅰ具有较长纤维,且形成的纤维网架结构较为密集;A2780对短肽RADA16-Ⅰ的粘附力相似于Matrigel、Collagen Ⅰ(P＞0.05);三维培养第3天A2780开始聚集成团且活性良好,在RADA16-Ⅰ中细胞增殖相对Matrigel与Collagen Ⅰ较慢,但保持一定增殖速率;在RADA16-Ⅰ三维培养体系中,细胞氧活性良好,且细胞粘附分子(整合素β1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白)和细胞相关因子(VEGFA、EGF、FGF2、IGF1)均有表达.结论 纳米自组装短肽RADA16-Ⅰ可成为体外A2780研究的三维实验模型.
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