摘要
目的 探讨下调NDUFA4对人结直肠癌SW480细胞体外生长的影响,并初步探讨其机制.方法 将NDUFA4-RNAi质粒(p-NDUFA4组)和对照质粒(p-Cont组)体外分别瞬时转入人结直肠癌SW480细胞;利用Real-time PCR和Western blot检测细胞中NDUFA4的表达;CCK-8(cell counting kit-8)法和克隆形成实验分别检测SW480细胞增殖活性和克隆形成能力;Real-time PCR测SW480细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)2、CDK3,CDK4、CDK6的mRNA水平;Western blot检测细胞中AKT、ERK1/2以及磷酸化AKT(p-AKT)、ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达水平.结果 与p-Cont组相比,p-NDUFA4组中NDUFA4的表达水平显著降低(P＜0.05);细胞增殖和克隆形成能力明显减弱(P均＜0.05);此外,细胞周期依赖性蛋白激酶CDK3,CDK4的mRNA水平均显著下调(P＜0.05);最后,p-NDUFA4组中细胞磷酸化AkT和磷酸化ERK1/2蛋白的表达水平明显下调(P＜0.01).结论 下调NDUFA4能明显抑制人结直肠癌SW480细胞的体外生长,这可能与AKT、ERK信号通路的变化相关.
基金项目
国家自然科学基金(31370938)
贵州省高层次创新人才项目(黔科合人才[2016]4031)
贵州省科技计划重点项目(QKH-JC-[2018] 1428)
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