摘要
目的 在原核表达质粒pET21a-ha2成功构建的基础上,诱导目的基因在大肠杆菌中表达,进行表达产物的纯化及鉴定.方法 原核表达质粒pET21a-ha2经PCR鉴定后,转入大肠杆菌Rosetta感受态细胞诱导筛选,经SDS-PAGE电泳检测,IPTG诱导表达.通过包涵体的变复性、Millipore超滤系统的滤浓缩、Ni-TA层析分离纯化HA2蛋白.结果 原核表达质粒pET21a-ha2转化大肠杆菌经IPTG诱导后,成功表达HA2蛋白,大小约15 kD,与预计目的蛋白大小相同.HA2纯化蛋白浓度为0.449 mg/mL,经测序与NCBI蛋白数据库比对无突变.结论 pET21a-ha2可在大肠杆菌中成功表达,并成功得到纯化的HA2蛋白.
基金项目
国家自然科学基金(81560186)
贵州省科技厅项目(黔科合基础SY字[2019]1333)
遵义市科技计划(遵义市科合HZ字[2019]21)
贵州省科技计划(黔科合J字LKZ[2012]15)
NETL
NSTL
维普
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