摘要
目的 检测血管内皮生长因子受体亚型(VEGFR1、VEGFR2和VEGFR3)在卵巢过度刺激(OHSS)大鼠模型腹膜的表达,探讨OHSS腹腔积液形成与腹膜VEGF受体亚型的相关性.方法 20只22日龄雌性Wistar大鼠,随机分成对照组(NC组)和实验组(OHSS组).实验组大鼠从第22～25日龄连续4d皮下注射重组人促卵泡刺激素(r-hFSH) 10 IU,在第26日龄皮下注射人绒毛膜促性腺激素(hCG) 30 IU,对照组从第22～ 26日龄连续5d皮下注射生理盐水0.1 mL建立OHSS大鼠模型.光学显微镜观察卵巢组织形态学特点,记录两组大鼠体重、卵巢体积、腹腔积液回收量和腹腔冲洗液亚甲蓝(MB)含量.应用免疫组织化学、qRT-PCR及Western blot检测腹膜组织(VEGFR1、VEGFR2和VEGFR3)mRNA和蛋白的表达水平.结果 实验组大鼠卵巢体积、窦卵泡数、腹腔液回收量及腹腔液MB含量明显高于对照组(P＜0.05).免疫组织化学结果显示:两组大鼠腹膜均有VEGFR1、VEGFR2及VEGFR3蛋白表达,实验组与对照组相比,实验组VEGFR1和VEG-FR2平均光密度值增强,差异具有统计学意义(P＜0.05);VEGFR3平均光密度值在两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).荧光定量PCR结果显示:实验组大鼠腹膜组织中(VEGFR1和VEGFR2)mRNA表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).VEGFR3 mRNA水平在两组腹膜的表达差异无明显统计学意义(P＞0.05).Westernblot结果显示:实验组大鼠腹膜组织中VEGFR1和VEGFR2蛋白相对表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);VEGFR3蛋白表达水平两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腹膜VEGFR1,VEGFR2与卵巢过度刺激大鼠血管通透性增加所致腹腔积液形成有关,VEGFR2可能起主要作用.
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