查看更多>>摘要:目的:槲皮素在银屑病治疗中具有良好的潜力,然而有关其具体的作用机制仍不清楚.本研究探讨槲皮素是否可通过核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路调控银屑病角质形成细胞的增殖、炎症和氧化应激.方法:培养人表皮角质形成细胞(human epidermal keratinocytes,HaCaT),通过肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)诱导,建立银屑病细胞损伤模型(TNF-α组);然后再采用低、中、高剂量(浓度从低到高分别为0,3.75、7.50、15.00、30.00、60.00、120.00 μmol/L)槲皮素进行处理,并将其分为TNF-α+槲皮素低、中、高剂量组,将未进行任何处理的HaCaT细胞设为对照组.在TNF-α+槲皮素高剂量组细胞中,分别添加二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(TNF-α+槲皮素高剂量+DMSO组)和NF-κΒ通路激活剂(NF-κΒ activator 1)(TNF-α+槲皮素高剂量+NF-κΒ activator 1组)进行处理.采用细胞计数实验(cell counting kit-8,CCK-8)筛选槲皮素影响TNF-α刺激的细胞增殖的最小浓度;采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、生物化学染色和蛋白质印迹法分别检测HaCaT细胞炎症因子、氧化应激指标以及NF-κB信号通路相关蛋白的表达.结果:与TNF-α+槲皮素0 μmol/L细胞相比,TNF-α+槲皮素3.75、7.50、15.00、30.00 μmol/L细胞的增殖差异均无明显统计学意义(均P>0.05),而TNF-α+槲皮素60.00、120.00 μmol/L细胞的增殖受到显著抑制(均P<0.05).与对照组相比,TNF-α组细胞上清液中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、磷酸化p65(phosphorylation-p65,p-p65)/p65的水平均显著升高(均P<0.001),而谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性显著下降(P<0.001).与TNF-α组相比,TNF-α+槲皮素中剂量组和TNF-α+槲皮素高剂量组细胞上清液中IL-6、IL-1β、ICAM-1和MDA的浓度均显著下降(均P<0.001),而GSH-Px活性均显著增加(均P<0.001),TNF-α+槲皮素高剂量组细胞中p-p65/p65水平显著降低(P<0.001).与TNF-α+槲皮素高剂量+DMSO组相比,TNF-α+槲皮素高剂量+NF-κΒ activator 1组细胞中p-p65/p65水平明显升高,细胞上清液中IL-6、IL-1β、ICAM-1和MDA的浓度均显著升高(P<0.001),而GSH-Px活性显著下降(P<0.001).结论:槲皮素通过抑制NF-κB信号通路调控银屑病角质形成细胞的增殖、炎症和氧化应激.