查看更多>>摘要：目的 探讨核孔蛋白43(NUP43)在肝细胞癌组织中的表达及其对患者预后和肝癌细胞增殖与迁移的影响.方法 采用回顾性队列研究方法和实验研究方法.收集2008年1月至2012年12月陆军军医大学第一附属医院收治的102例肝细胞癌患者的临床病理资料;男83例,女19例;年龄为56(19～87)岁.采用免疫组织化学染色分析NUP43在肝细胞癌组织中的表达.体外培养肝癌HepG2和SK-HEP-1细胞,采用蛋白质印迹法验证细胞转染Flag-NUP43过表达质粒后的效果.采用CCK-8、细胞体外迁移实验分析过表达NUP43对HepG2和SK-HEP-1细胞功能的影响.正态分布的计量资料以(-x)±s表示,组间比较采用独立样本t检验.偏态分布的计量资料以M(范围)表示.计数资料以绝对数表示,组间比较采用配对x2检验.采用Kaplan-Meier法计算生存时间,Log-rank检验进行生存分析.采用R 4.2.1软件绘制生存曲线.单因素和多因素分析采用COX比例风险回归模型.结果 (1)NUP43在肝细胞癌与癌旁组织中的表达情况及高低表达患者临床病理特征分析.免疫组织化学染色结果显示:NUP43主要表达于细胞质和细胞核膜.102例肝细胞癌组织样本中,NUP43低表达49例,NUP43高表达53例;102例肝细胞癌癌旁组织样本中,NUP43低表达80例,NUP43高表达22例;肝细胞癌与癌旁组织中NUP43表达比较,差异有统计学意义(x2=16.505,P＜0.05).102例肝细胞癌组织样本中,NUP43低表达和高表达患者肿瘤长径、病理学分级、肝内转移比较,差异均有统计学意义(x2=5.104,23.217,4.169,P＜0.05).(2)肝细胞癌患者生存情况及影响预后的因素分析.102例肝细胞癌患者随访时间为17.9(0.1～107.9)个月.NUP43低表达和高表达患者术后1、3、5年总生存率分别为79.59％、53.06％、34.69％和52.83％、18.87％、9.43％,两者生存情况比较,差异有统计学意义(x2=27.071,P＜0.05).多因素分析结果显示:性别、NUP43表达、TNM分期、病理学分级是肝细胞癌患者术后生存的独立影响因素(风险比=1.846,2.206,2.040,2.177,95％可信区间为 1.231～2.768,1.419～3.429,1.322～3.148,1.377～3.254,P＜0.05).(3)过表达NUP43对肝癌HepG2和SK-HEP-1细胞增殖和迁移能力的影响.蛋白质印迹法检测结果显示:转染Flag-NUP43过表达质粒可显著上调HepG2和SK-HEP-1细胞中NUP43的表达.CCK-8实验结果显示:HepG2细胞转染对照质粒和Flag-NUP43过表达质粒后,细胞增殖指数分别为0.79±0.07和1.47±0.05,两者比较,差异有统计学意义(t=19.402,P＜0.05);SK-HEP-1细胞转染对照质粒和Flag-NUP43过表达质粒后,细胞增殖指数分别为0.59±0.05和0.95±0.05,两者比较,差异有统计学意义(t=15.753,P＜0.05).细胞体外迁移实验结果显示:HepG2细胞转染对照质粒和Flag-NUP43过表达质粒后,细胞迁移数分别为(188±8)个和(595±13)个,两者比较,差异有统计学意义(t=46.192,P＜0.05);SK-HEP-1细胞转染对照质粒和Flag-NUP43过表达质粒后,细胞迁移数分别为(136±10)个和(447±20)个,两者比较,差异有统计学意义(t=24.721,P＜0.05).结论 NUP43在肝细胞癌组织中的表达显著高于癌旁组织.性别、NUP43表达、TNM分期、病理学分级是肝细胞癌患者术后生存的独立影响因素.过表达NUP43可显著促进肝癌HepG2和SK-HEP-1细胞的增殖和迁移能力.
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