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畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会
畜牧兽医学报

中国畜牧兽医学会

文杰

月刊

0366-6964

xmsyxb@263.net

010-62815987 62816996 62893836

100193

北京海淀区圆明园西路2号

畜牧兽医学报/Journal Acta Veterinaria Et Zootechnica SinicaCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本学报是中国畜牧兽医学会主办，《畜牧兽医学报》编委会、中国农业科学院畜牧研究所编辑出版的全国性的畜牧兽医学术刊物。创刊于1956年7月，刊登较高水平的学术论文和企业研究报告以及对生产实践具指导性、启发性的文章。为全国中文核心期刊、中国自然科学核心期刊，并被国内外重要引文数据库及文摘性期刊收录。主要栏目包括畜牧和兽医两大学科。
正式出版
收录年代

    8株分离自四川、贵州地区猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株的全基因组特征分析

    周泷康润敏张毅谢波...
    1382-1390页
    查看更多>>摘要：本研究旨在了解近年来我国四川、贵州地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的分子流行病学及遗传变异情况,对该地区2016-2018年间采集的8份PRRSV阳性样品进行病毒分离鉴定和全基因组测序,进一步使用RDP4和Simplot生物软件对全基因序列进行重组分析.结果 显示,8个PRRSV毒株全基组全长为15 010～15 321 nt,毒株间相似性为80.9％0～91.7％.NSP2氨基酸分析结果显示,4个毒株表现出与HP-PRRSV毒株一致的30 aa缺失,另外4株表现出与NADC30毒株一致的131 aa缺失.其中,GZgy17表现为“1+19+29 aa”新型缺失模式.ORF5氨基酸分析显示,3个毒株在33位点出现新型的1 aa缺失.遗传重组分析显示,8个毒株表现出PRRSV-2毒株6种不同谱系(Lineage)间的重组方式,分别如下:1)SCnj16:L8+L1;2)SCxyz17:L1+L5;3) SCya18:L1+L3;4)GZgy17:L8+L3;5)SCcd17和SCN17:L1+L8+L5;6)SCcd16和SCya17:L1 +L8+L3.本研究结果表明,我国四川、贵州地区不仅有多种谱系PRRSV毒株并存,其基因组还出现了复杂的遗传重组现象,具有上述复杂基因组的PRRSV毒株在我国的流行状况值得高度关注.

    猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒分离鉴定全基因组缺失重组

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    基因Ⅰ型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的制备及其对小鼠的免疫原性分析

    施磊周亚红田占成高闪电...
    1391-1398页
    查看更多>>摘要：降低猪场的流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)感染率对于阻断人的JE暴发至关重要,鉴于我国JE防控形势的紧迫性和现有基因Ⅲ型商品化乙型脑炎病毒疫苗对部分基因Ⅰ型乙型脑炎病毒(genotype Ⅰ Japanese encephalitis virus,G Ⅰ JEV)流行毒株免疫保护的不确定性,急需研制安全高效、成本低廉的新型猪用GⅠJEV疫苗.本研究在杆状病毒载体pFastBacTM多克隆酶切位点插人G Ⅰ JEV的prME基因表达盒,测序验证后的阳性重组质粒转染DH10BacTM感受态细胞后获得Bacmid-prME重组杆粒,进一步将其转染至Sf9昆虫细胞后,获得Bac-prME重组杆状病毒.Western blot、间接免疫荧光及电镜观察GⅠ JEV病毒样颗粒组成蛋白表达及病毒样颗粒形成情况,通过小鼠免疫试验初步评价GⅠ JEV病毒样颗粒的免疫原性.Sf9昆虫细胞中prME基因表达盒编码的蛋白得到高效表达,且组装形成病毒样颗粒.病毒样颗粒免疫原性评估结果表明:G Ⅰ JEV病毒样颗粒可诱导免疫小鼠产生高滴度的乙型脑炎病毒中和抗体.本研究利用杆状病毒昆虫细胞表达系统获得了GⅠ JEV病毒样颗粒,为研制安全高效的乙型脑炎病毒病毒样颗粒亚单位疫苗提供物质基础.

    乙型脑炎病毒杆状病毒病毒样颗粒免疫原性

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    貉源阿留申病毒VP2和NS1蛋白的抗原性预测

    吴艳虹赵永强韦韬章秀婷...
    1399-1407页
    查看更多>>摘要：旨在预测和分析貉源阿留申病毒(RFAV)VP2和NS1蛋白的抗原表位特征,筛选阿留申病毒属较保守的B、T细胞抗原表位.本研究对RFAV的近全长基因组进行克隆及测序,对其VP2和NS1基因编码蛋白的理化性质、二级结构、翻译后修饰位点和抗原表位进行预测,并将预测的修饰位点、抗原表位与其他阿留申病毒种的序列进行比较分析,筛选相对保守的修饰位点和抗原表位.结果 显示,获得的RFAV基因组长4 327 bp,编码VP2蛋白的636个氨基酸,编码NS1蛋白的641个氨基酸.VP2和NS1蛋白均为亲水性蛋白,二级结构以无规则卷曲为主.在阿留申病毒属内,VP2蛋白有3个保守的B细胞抗原表位,3个保守的T细胞表位,8个保守的翻译后修饰位点;NS1蛋白有1个保守的B细胞抗原表位,2个保守的T细胞抗原表位和7个保守的翻译后修饰位点.本研究成功克隆了RFAV近全长基因组序列,全面对RFAV的VP2、NS1蛋白抗原表位、翻译后修饰位点进行预测,并分析其在阿留申病毒属内的保守和变异特征,为阿留申病毒免疫研究提供参考.

    阿留申病毒VP2蛋白NS1蛋白抗原表位翻译后修饰位点

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    副猪嗜血杆菌小鼠毒力和仔猪毒力的相关性分析

    李飞跃陈坤鹏丁文文薛云...
    1408-1418页
    查看更多>>摘要：旨在对我国最为流行的血清4、5、12和13型副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)(共36株)进行BALB/c小鼠和仔猪毒力试验的比较研究.小鼠毒力试验结果表明,4种血清型菌株的LD50分别介于9.80×107～4.60×109、2.10×108～8.85×109、4.81×107～7.01×109和1.75×108～8.45×108 CFU;整体毒力表现强弱依次是13、4、12、5型,但仅在5型与13型菌株之间毒力具有显著差异(P＜0.05).仔猪毒力试验结果表明,同一血清型中不同菌株的毒力具有明显差异,均存在强毒和弱毒菌株;整体毒力表现强弱依次是5、13、4、12型;但5型与4型(P=0.039)和12型(P=0.033)之间具有显著差异(P＜0.05),与13型差异不显著(P=0.241).综合对比分析HPS的小鼠和仔猪毒力试验结果,可以得出3个结论:1)4种国内流行性血清型菌株的整体毒力由强到弱依次是5、13、4和12型;2)但同一血清型中均存在强毒和弱毒菌株,HPS的血清型与其毒力之间不具有相关性;3)HPS虽能致死BALB/c小鼠,但其毒力结果与仔猪毒力试验结果并不一致,表明其作为替代模型具有一定的缺陷.

    副猪嗜血杆菌血清型毒力小鼠仔猪相关性

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    猪支原体肺炎LAMP-LFD快速检测方法的建立及初步应用

    孙盼盼时建立彭喆王硕...
    1419-1428页
    查看更多>>摘要：旨在采用环介导等温扩增(LAMP)和横向流动试纸条(LFD)相结合的方法,建立一种快速、特异,过程可视化的猪肺炎支原体(M yco plasmah yo pneumoniae,Mhp)检测方法.针对猪肺炎支原体(Mhp) P36基因设计5套特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(FITC)标记的探针,进行LAMP扩增反应.将生物素标记的LAMP产物与FITC标记的探针进行特异性杂交,并使用横向流动试纸条完成扩增产物的检测.经优化,LAMP最佳反应条件为65℃,反应15 min,从基因组DNA提取到LFD结果判断只需40 min左右,比常规PCR技术缩短近2h.LAMP-LFD可特异性地检出猪肺炎支原体(Mhp),对猪鼻支原体(Mhr)及猪圆环病毒(PCV)等常见猪病病原的检测结果为阴性.灵敏性试验表明,LAMP-LFD对Mhp的检测灵敏度为1×100个拷贝DNA,是普通PCR的1 000倍.利用本方法可从采集的88份临床疑似病料样品中检测到64份阳性,国标PCR方法可检测到56份阳性,符合率可达90.90％.综上,本研究建立的LAMP-LFD方法可特异、准确地应用于Mhp的检测,而且灵敏度高、操作简单、仪器设备依赖性低、检测成本低、耗时短,适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值,有望发展成为Mhp快速检测的有效手段.

    猪肺炎支原体环介导等温扩增技术横向流动试纸条诊断

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    H5、H7和H9亚型禽流感病毒四重荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

    王素春仲焕香姜楠姜利建...
    1429-1437页
    查看更多>>摘要：旨在提高对禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)检测效率,及时发现疫病.本研究通过分析M基因以及H5、H7和H9亚型的HA基因序列保守区域,设计并合成了相关探针和引物,建立了禽流感病毒(AIV)四重荧光RT-PCR检测方法,该方法可在检测禽流感病毒(AIV)的同时,确定病原是否为H5、H7和H9亚型.结果 显示,该检测方法耗时短、特异性好、检测下限达到10-5 ng·tμL-1.采用该方法检测临床采集的13个活禽交易市场的384份禽咽喉和泄殖腔双拭子样品,经检测,其中有60份样品为流感病毒阳性,且全部是H9亚型,该结果与行业标准方法(NY/T 772-2013)检测结果一致,κ值为1(P＜0.001).本方法能实现对禽流感病毒及H5、H7和H9亚型的高通量快速检测,将在AIV快速检测中发挥重要作用.

    禽流感H5亚型H7亚型H9亚型四重荧光RT-PCR检测方法

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    四川省松潘县牦牛体表蜱、高原鼠兔携带巴尔通体和无形体的PCR检测与进化分析

    赫秀甜向阳袁东波阳爱国...
    1438-1446页
    查看更多>>摘要：旨在了解四川省松潘县牦牛体表蜱、高原鼠兔巴尔通体和无形体感染情况.采集牦牛体表的蜱和捕获高原鼠兔,对蝉进行形态学初步鉴定后,提取蜱和高原鼠兔脾总DNA,PCR扩增蜱16S rRNA、巴尔通体rpoB和无形体16S rRNA基因,对PCR产物阳性产物测序、比对及构建系统进化树,从而确定蜱种类及蜱和高原鼠兔感染巴尔通体和无形体的种类及感染率.结果 显示:在松潘县进安乡、山巴乡、下八寨乡各采集到蜱102、97和131只,共计330只,经鉴定均为青海血蜱.蜱巴尔通体仅检出1种巴尔通体,与B.melophagi亲缘关系最近,进安乡、山巴乡和下八寨乡检出率分别为16.7％、8.2％和18.3％,其中下八寨乡检出率显著高于进安乡(P＜0.05);蜱源无形体进安乡、山巴乡和下八寨乡检出率分别为9.8％、12.4％和26.7％,下八寨乡检出率显著高于进安乡(P＜0.01),检出的无形体均为1种,与牛无形体(A.bovis)亲缘关系最近;下八寨乡检出的鼠兔源巴尔通体与B.queenslandens亲缘关系最近,感染率为6.7％;进安乡、山巴乡和下八寨乡检出的鼠兔源巴尔通体与B.grahamii亲缘关系最近,感染率分别为8.7％、17.9％和13.3％,3个点检出率无显著差异;未定种Bartonella sp.(MN296294)和Bartonella sp.(MN296293)仅分别在进安乡和下巴乡检出;与蜱均检出无形体不同,高原鼠兔均未检出无形体.此外,蜱和高原鼠兔均未发现2种及2种以上病原混合感染.松潘县青海血蜱携带巴尔通体和无形体,高原鼠兔感染巴尔通体,且首次在高原鼠兔体内检测到疑似B.queenslandens的病原体,提示当地居民有感染这两类病原风险.

    巴尔通体无形体蜱高原鼠兔分子流行病学松潘县

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    禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4+/CD8+细胞及相关细胞因子表达的影响

    刘丹华郑世民刘晓静吕晓萍...
    1447-1454页
    查看更多>>摘要：旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响.将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色(acid α-naphthyl acetate esterase,ANAE)、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测.试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4+T淋巴细胞数量在第7～35天显著降低、CD8+T淋巴细胞数量在第7～28天显著升高,CD4+/CD8+比值在第7～28天显著降低(均P＜0.05或P＜0.01);局部淋巴组织哈德尔腺(Hader's gland,HG)、派伊尔结(Peyer's patch,PP)和盲肠扁桃体(caecal tonsil,CT)中ANAE+T淋巴细胞数量均显著降低(均P＜0.05或P＜0.01);GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α转录量都有不同程度升高.本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4+T淋巴细胞数量降低、CD4+/CD8+T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关.

    禽网状内皮组织增生病病毒局部淋巴组织细胞免疫

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    性激素受体在子午岭黑山羊隐睾及正常睾丸中的分布比较

    王乾梅袁莉刚李承晔杨洪早...
    1455-1465页
    查看更多>>摘要：旨在研究性激素受体[雄激素受体(androgen receptor,AR)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)]在子午岭黑山羊正常睾丸与隐睾组织中的分布与隐睾症的关系,应用免疫组织化学及免疫荧光技术方法结合形态计量学统计软件,比较了正常睾丸与隐睾的组织化学特点.特殊染色结果显示:与正常组相比,隐睾组间质组织疏松,管腔面积明显减小,糖原含量明显减少,胶原纤维及网状纤维含量增多.免疫组化及免疫荧光结果显示:1)AR在正常睾丸组Leydig细胞呈高密度强阳性表达,在各级生精细胞呈中等强度阳性表达,隐睾组中Leydig细胞及各级生精细胞表达明显减弱,且在精原细胞偶见表达;2)ER在正常睾丸Leydig细胞呈高密度强阳性表达,管周肌样细胞呈中等强度阳性表达,Sertoli细胞偶见表达,各级生精细胞无表达;3)ER在隐睾Leydig细胞、初级精母细胞、精原细胞和Sertoli细胞中均呈中等强度阳性表达;4)统计结果显示,隐睾组AR的平均光密度较正常组显著降低(P＜0.05),而ER的平均光密度则显著高于正常组(P＜0.01),且隐睾组AR与ER表达量比值基本接近1∶1.子午岭黑山羊隐睾组织胶原纤维和网状纤维分布较正常睾丸多,生精小管基膜主要成分以中性糖蛋白为主,酸性糖蛋白含量明显降低影响精子的正常形成;隐睾组织精原细胞及Sertoli细胞ER与AR表达失常尤为明显,可为哺乳动物隐睾的相关研究提供一定参考.

    子午岭黑山羊雄激素受体雌激素受体睾丸隐睾

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    连翘水提液体外对禽流感病毒增殖及炎症因子表达的抑制效应

    赵冰倩罗畅刘健新李慧子...
    1466-1474页
    查看更多>>摘要：旨在评估连翘体外抗H5N1和H9N2禽流感病毒(avian influenza viruses,AIVs)增殖及其介导炎症的效果,本试验制备了连翘水提液,首先采用CCK-8法测定了连翘水提液对DF-1细胞的安全浓度,并通过3种处理方法(药液预处理病毒后感染细胞、先感染病毒后给药、先给药后感染病毒)来筛选连翘水提液的最佳给药方式;在最佳给药方式下,使用TCID50法检测禽流感病毒H5N1和H9N2的增殖情况,并采用qRT-PCR检测了炎症相关趋化因子和细胞因子的表达变化.结果 显示,连翘水提液对DF-1细胞的最高安全浓度为4 mg·mL-1;先感染病毒后给药是最佳的给药方式;在最佳给药方式下,连翘水提液能显著降低H5N1和H9N2 AIVs在各个时间点的病毒滴度,并呈剂量依赖性关系;与对照组相比,H5N1AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、SCYA4、IL1β、IL-6和TNF-α的表达显著降低,H9N2 AIV给药组中CX3CL1、IL8L1、CCL5、IFN-β、IL-6和TNF-α的表达也有类似的下降趋势.这表明连翘能够抑制H5N1和H9N2 AIVs在DF-1细胞中的增殖,降低炎症相关细胞因子的表达,有良好的抗炎和抗病毒活性.

    禽流感病毒病毒增殖炎症连翘

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