查看更多>>摘要:目的 探究大花红景天中杞柳苷(salipurposide,Sali)、红景天苷(salidroside,Sal)、异柳糖苷(isotachioside,Isota)对人胚肺成纤维二倍体细胞(2BS)衰老调控作用及可能机制.方法 显微镜下观察并选取年轻28代龄2BS(28PD)细胞和衰老 50 代龄 2BS(50PD)细胞.MTT 试验测定 1.25,2.5,5.0,7.5,10.0 μmol·L-1 Sal,2.5,5.0,7.5,10.0,12.5 μmol·L-1 Sali以及Isota对50PD细胞活性的影响.根据MTT结果,5.0 μmol·L-1 Sal和10.0 μmol·L-1 Sali、Isota用于进行后续实验.28PD和50PD细胞分为28PD组、50PD组、50PD+Sali组、50PD+Sal组、50PD+Isota组,各组相应药物干预24 h.测定细胞衰老相关 β-半乳糖苷酶(senescence associated-beta-galactosidae,SA-β-gal)表达情况,细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活性情况,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别测定细胞磷脂酰肌醇三羟基激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶 B(AKT)、组蛋白去乙酰化酶 2(histone deacetylase 2,HDAC2)的 mRNA表达以及PI3K、磷酸AKT(p-AKT)、HDAC2蛋白表达情况.结果 与28PD组比较,50PD组细胞SA-β-gal表达增加,MDA、ROS含量增加,SOD、GSH-PX活性降低,PI3K、AKT、HDAC2的mRNA以及相应蛋白表达降低(P<0.01).50PD 细胞经 Sali、Sal、Isota 干预后,SA-β-gal 表达显著降低(P<0.01),MDA、ROS 含量显著降低(P<0.01),SOD、GSH-PX活性显著提高(P<0.01),PI3K、AKT、HDAC2的mRNA以及相应蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01).结论 大花红景天中Sali、Sal、Isota能降低50PD细胞SA-β-gal表达,其作用可能与抑制氧化应激、调控PI3K/AKT-HDAC2轴表达有关.