首页期刊导航|中国应用生理学杂志
期刊信息/Journal information
中国应用生理学杂志
中国应用生理学杂志

汪海

双月刊

1000-6834

tjzgyish@163.com

022-84655184

300050

天津市和平区大理道1号

中国应用生理学杂志/Journal Chinese Journal of Applied PhysiologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊系“中国核心期刊要目总览”核心期刊，以促进科研、面向应用、加强经济建设、、国防建设为宗旨。刊登环境生理、航空航天生理、劳动生理、运动生理等多方面学科内容。国家自然科学基金等资助的课题占来稿的一半以上。
正式出版
收录年代

    过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制

    苗莹莹袁欢欢黄敏杰付升旗...
    335-340页
    查看更多>>摘要：目的:探讨miRNA-130a-3p对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞自噬与凋亡的影响及分子机制.方法:H9C2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组,LPS模型组,miRNA阴性对照组(miRNA-negative control组),miRNA-130a-3p mimics 组(过表达 miRNA-130a-3p),miRNA-130a-3p mimics+LY294002 组(过表达 miRNA-130a-3p+PI3K抑制).LPS模型组即终浓度为10 μg/ml的LPS诱导24 h,miRNA阴性对照组与miRNA-130a-3p mimics组是利用lipo3000将阴性对照miRNA及miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,培养24 h后,再将LPS加入培养基中培养 24 h.miRNA-130a-3p mimics+LY294002 组是利用 lipo3000 将 miRNA-130a-3p mimics 转染至 H9C2 细胞,同时在培养基中加入10 μmol/L(终浓度)的LY294002,培养24 h后,再将浓度为10 μg/ml的LPS加入培养基中培养24 h.所有实验均重复5次以上.利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-130a-3p mRNA的表达水平,利用CCK-8实验检测细胞活性,利用ELISA实验检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,利用比色法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;利用Western blot检测细胞中p-PI3K蛋白,p-AKT蛋白,Bax蛋白,Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,LC3蛋白,p62蛋白的表达水平.结果:结果显示,与正常组相比较,LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平,p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白的水平显著低于正常对照组(P＜0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中p-PI3K,p-AKT蛋白的表达显著升高(P＜0.01,P＜0.05);与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量显著升高(P＜0.01),SOD的含量显著降低(P＜0.01),细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达显著升高(P＜0.01),Bcl-2蛋白的表达和LC3II/I的比率显著降低(P＜0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics可提高细胞活性,降低细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量(P＜0.01,P＜0.05),提高SOD的含量(P＜0.05),降低细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达(P＜0.01),促进Bcl-2蛋白的表达(P＜0.01),提高 LC3II/I 的比率(P＜0.05);与 miRNA-130a-3p mimics 组相比较,miRNA-130a-3p mimics+LY294002组,可部分逆转miRNA-130a-3p mimics对细胞的作用.结论:过表达miRNA-130a-3p可部分通过激活PI3 K/AKT信号通路促进细胞的自噬与抑制细胞凋亡,减轻LPS诱导的心肌细胞损伤.

    微小RNA-130a-3pPI3K/AKT信号通路自噬细胞凋亡细胞损伤

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    不同游泳运动对小鼠酒精性脂肪肝形成的改善作用

    陈锐陈伟陈伊琳陈嘉勤...
    341-347,384页
    查看更多>>摘要：目的:探讨7周不同负荷游泳运动对酒精性脂肪肝小鼠肝脏脂质代谢的改善作用及微RNA-34a(miR-34a)与过氧化物酶体增殖物激活的受体α(PPARα)的调控关系.方法:50只雄性KM小鼠,随机分成空白组(K,n=10)和酒精性脂肪肝组(AFLD,n=40),AFLD组通过50％乙醇的谷酒王0.2 ml/10 g WT灌服7周,每周休息1 d.成功构模后,分成模型组(M)、30 min游泳运动组(LE)、60 min游泳运动组(ME)、90 min负重游泳运动组(HE,尾部铅皮负重体重的5％),每组10只,每周干预6 d,共7周.结束后,提取血清和肝脏组织,测定小鼠肝脏指数、内脏脂肪比,肝细胞损伤指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰基转肽酶(γ-GT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高/低密度脂蛋白胆固醇(H/LDL-C)含量;HE染色观察肝脏结构变化,Western blot检测肝组织PPARα、FAS、TNF-α 蛋白水平,mRNA 表达谱测序分析后 RT-PCR 验证miR-34a、PPARα、FAS、TNF-α、CPT-1 mRNA表达.结果:相比K组,AFLD组肝索紊乱,出现灶性脂质真空化,脂滴空泡样变明显,胞核畸形异位;肝功能水平显著降低(P＜0.01).相比M组,ME、HE组肝功能改善显著,血清TG、TC、LDL-C水平下降,HDL-C水平上升(P＜0.01或P＜0.05),肝脏指数、内脏脂肪比降低(P＜0.01),肝细胞灶性脂滴样变下降,肝索结构较清晰;且ME组干预效果更为显著,肝组织PPARα蛋白表达水平上升、FAS、TNF-α蛋白表达水平下降(P＜0.01或P＜0.05);基于Il-lumina 高通量测序及mRNA差异分析,PPARα通路中有38个差异表达基因,含9个上调基因,29个下调基因,涉及肝脏脂肪酸氧化、脂质代谢、凋亡抑制等.相比M组,LE、ME、HE组miR-34a、FAS、TNF-α基因水平降低,PPARα、CPT-1基因水平升高(P＜0.01或P＜0.05).结论:不同负荷游泳运动对AFLD小鼠肝功能具有改善作用,促进脂滴降解,调节肝脏脂质代谢,可能与miR-34a/PPARα的激活有关,且中等负荷游泳运动干预效果更佳.

    酒精性脂肪肝游泳运动微RNA-34a(miR-34a)/过氧化物酶体增殖物激活的受体α(PPARα)通路高通量测序小鼠

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    Cav1.2在顺铂诱导C57BL/6J小鼠耳蜗螺旋神经元凋亡中的作用

    马靖雯王艳萍王敏黄天兰...
    348-355页
    查看更多>>摘要：目的:探究顺铂(CDDP)诱导C57BL/6J小鼠耳蜗螺旋神经元(SGNs)凋亡过程中Cav1.2的作用及其可能的机制.方法:动物实验:选取8周龄雄性C57BL/6J小鼠分为以下两组(10只/组):生理盐水组(Control组)和顺铂给药组(Cisplatin组).Control组每天腹腔注射生理盐水,Cisplatin组每周期前4 d以3 mg/kg的剂量进行顺铂腹腔注射,后10 d每日注射生理盐水,重复三个周期.给药结束后,听性脑干反应(ABR)检测小鼠听力阈值变化;小鼠内眦采血,并断颈取耳蜗,超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)试剂盒检测血清及耳蜗组织的SOD活性和MDA含量;免疫印迹法(Western blot)检测耳蜗组织相关凋亡蛋白表达;苏木精-伊红HE染色观察小鼠耳蜗螺旋神经节形态学变化;TUNEL染色观察小鼠耳蜗SGNs凋亡情况;免疫荧光观察耳蜗SGNs上Cav1.2的分布和表达.细胞实验:原代培养SGNs,根据CCK8选择顺铂5 μmol/L干预12 h并随机分为:对照组(Control)、溶剂组(DM-SO)、Cav1.2阻断剂组(N)、顺铂组(Cisplatin)、顺铂与Cav1.2阻断剂共同孵育组(Cisplatin+N).Western blot检测Cav1.2蛋白表达;Hoechst33342染色观察各组SGNs凋亡情况,流式细胞术检测各组SGNs凋亡率,Western blot检测相关凋亡蛋白的表达,CA2+探针检测细胞内钙离子浓度变化,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测膜电位变化,线粒体超氧化物指示剂(MitoSOXTM-red)检测线粒体释放ROS情况.结果:动物实验:与Control组相比,Cisplatin组小鼠听力阈值升高(P＜0.01),血清及耳蜗组织MDA含量、耳蜗组织凋亡蛋白Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平和TUNEL阳性率、Cav1.2蛋白表达水平等均明显升高(P＜0.05,P＜0.01);血清及耳蜗组织SOD活性、耳蜗组织抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白水平和SGCs密度均明显降低(P＜0.05,P＜0.01).细胞实验:与Control组相比,Cisplatin组的Cav1.2表达、细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平、细胞内钙离子浓度以及ROS释放均明显增加(P＜0.05,P＜0.01);而细胞的Bcl-2蛋白水平和线粒体膜电位则明显降低(P＜O.01);Cav1.2阻断剂可部分逆转上述改变(P＜0.05).结论:顺铂可能通过上调Cav1.2促进钙内流,进而使线粒体ROS增多,引起SGNs氧化应激损伤从而诱导线粒体途径的细胞凋亡.

    顺铂Cav1.2小鼠细胞培养耳蜗螺旋神经节神经元凋亡

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    不同方式运动对去负荷大鼠比目鱼肌收缩性能的影响

    胡世亮杨文超左鲁玉蒋强...
    356-361页
    查看更多>>摘要：目的:探究有氧与抗阻运动对去负荷性肌萎缩大鼠比目鱼肌收缩特性及蛋白MuRF1,PGC-1α和FNDC5表达的影响以及可能的分子生物学机制.方法:将雄性Wistar大鼠随机分为恢复组(CT)、有氧运动组(A)、抗阻运动组(R)和对照组(C),每组6只.对照组不作任何实验处理,其余3组先进行2周尾部悬吊,而后恢复组安静恢复,有氧组与抗阻组进行2周运动干预.运动方案:有氧组大鼠采用65％最大摄氧量(VO2max)对应的跑台速度,60 min/d,5日/周;抗阻组大鼠负重65％最大有意负重(MVCC)爬梯,3次为一组,共5组,每次休息1 min,每组间歇2 min,5日/周.最后一次运动后禁食24 h,取比目鱼肌观察组织学变化、测试收缩性能并检测MuRF1,PGC-1α和FNDC5表达情况.结果:与对照组相比,恢复组大鼠体重、比目鱼肌湿重、肌纤维平均横截面积与肌收缩性能都明显降低(P＜0.01),PGC-1α/FNDC5表达明显降低(P＜0.01)和MuRF1表达明显升高(P＜0.01);与恢复组相比,有氧组和抗阻组大鼠体重、比目鱼肌湿重、肌纤维平均横截面积与肌收缩性能都明显升高(P＜0.01),PGC-1α/FNDC5表达明显升高(P＜0.01)和MuRF1表达明显降低(P＜0.01).与有氧组相比,抗阻组大鼠比目鱼肌PGC-1α表达显著升高(P＜0.05)且MuRF1表达显著降低(P＜0.05).结论:有氧和抗阻运动可明显提高肌收缩性能,上调PGC-1α/FNDC5的表达,抑制MuRF1蛋白表达,表明有氧与抗阻运动改善去负荷性肌萎缩的分子机制可能与PGC-1α 和MuRF1蛋白相关.

    有氧运动抗阻运动去负荷大鼠比目鱼肌收缩性能

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    学龄前儿童不同距离往返跑后HR和HRV改变的比较

    任海龙张璐璐梁建王超...
    361-365页
    查看更多>>摘要：目的:筛选一种适用于评估学前儿童速度和心功能的测试方法.方法:选取某幼儿园30名健康儿童作为实验对象,分别建立"10 m、20 m和30 m往返跑"的运动模型,通过佩戴人体能耗检测仪的方式,监测其运动前后心率和心率变异性(HRV)指标的变化特征,进而通过计算其运动负荷和生理负荷指数,通过HRV时域、频域和庞莱恩散点图参数的变化,判断学前儿童在不同距离往返跑后心脏交感神经和迷走神经的活性与支配功能状态.结果:儿童10 m、20 m和30 m往返跑依次为中、大和超大强度的范围;HRV指标测试结果显示:与运动前基线值相比较,三种往返跑后的R-R间期标准差(SDNN)均呈现显著性的降低;儿童30 m往返跑后,除了低频与高频的比值(LF/HF)显著升高(P＜0.01),其余频域指标以及庞莱恩散点图参数较基线值均有不同程度的降低(P＜0.05,0.01);此外,与10 m往返跑后相比较,儿童20 m往返跑后LF呈现显著性的增加(P＜0.01),其余HRV指标均无显著性变化,但30 m往返跑后的H1RV频域指标和庞莱恩散点图参数均不同程度呈现显著降低(P＜0.05,0.01),且LF/HF值超出正常参考值范围.结论:20 m往返跑后儿童的心交感神经活性和迷走神经活性变化不显著、综合调节能力未下降,心功能安全性较好.

    儿童体质健康往返跑心率变异性自主神经功能

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    miR-135b-5p抑制脓毒症引起的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制

    臧宾宾李华杨颖谢航...
    366-372页
    查看更多>>摘要：目的:探究miR-135b-5p在小鼠脓毒症(sepsis)引起的急性肺损伤(ALI)模型中的表达水平及其对小鼠肺部炎症反应和细胞焦亡的影响.方法:将C57BL/6小鼠随机分为6组,每组8只,通过盲肠结扎穿刺法(CLP)手术构建CLP诱导的脓毒症小鼠模型:腹腔注射0.1 mg/kg的巴比妥麻醉,腹部纵向切开暴露盲肠,结扎盲肠并用注射器针头进行穿孔,挤出部分肠道内容物后缝合伤口.假手术组(Sham组)开腹后不做任何处理缝合伤口,无CLP 手术处理.治疗组分为 CLP+NC mimic 组,CLP+miR-135b-5p mimic 组,CLP+NC mimic+empty vector 组,CLP+消皮素D(GSDMD)组,CLP+miR-135b-5p mimic+GSDMD组.治疗组小鼠在CLP手术前一周皮下注射200μ1溶解于生理盐水的 NC mimic(200 nmol/L),miR-135b-5p mimic(200 nmol/L),empty vector(100 nmol/L),GSDMD vector(100 nmol/L),每天注射1次,连续一周.术后24 h采用二氧化碳窒息法实施安乐死.采用qRT-PCR检测小鼠肺组织样本中miR-135b-5p和GSDMD mRNA的表达水平;苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肺组织形态和损伤状态;采用5 ml生理盐水冲洗小鼠右肺3次,每次持续约3～5 min,收集肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中GSDMD、白介素1 β(1L-1β)和白介素18(IL-18)的表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠肺组织内含NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase 1)以及切割后的N-端GSDMD端蛋白结构域(cleaved-GSDMD-N)的表达水平.双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-135b-5p与GSDMD的靶向结合关系.结果:与对照组相比,CLP组小鼠肺组织中有大量的炎症细胞浸润,肺泡损伤,细胞间质水肿及肺泡塌陷等病理特征,小鼠肺组织内细胞焦亡相关蛋白(NLRP3,caspase-1和GSDMD)的表达水平明显增加(P＜0.01),但miR-135b-5p的表达水平明显下调(P＜0.01);与 CLP组相比,超表达miR-135b-5p能够明显抑制CLP诱导的小鼠肺组织内细胞焦亡(P＜0.01),靶向抑制GSDMD的表达水平(P＜0.01);超表达GSD-MD 能够逆转超表达miR-135b-5p对肺组织细胞焦亡的抑制作用(P＜0.01),超表达miR-135b-5p能够通过靶向GS-DMD抑制小鼠BALF中IL-1β 及IL-18的表达水平(P＜0.01).结论:miR-135b-5p靶向下调GSDMD抑制细胞焦亡,改善脓毒症引起的ALI,为脓毒症诱导的ALI治疗提供了潜在的治疗靶点和理论依据.

    脓毒症小鼠急性肺损伤miR-135b-5p膜穿孔蛋白D焦亡

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    迷走神经刺激对难治性癫痫大鼠海马神经炎性反应及α7nAChR表达的影响

    李永格周舒姚银乐未小明...
    373-378,384页
    查看更多>>摘要：目的:探讨迷走神经刺激(VNS)对难治性癫痫(IE)模型大鼠海马神经炎性反应及α7nAChR表达的影响.方法:80只成年雄性SD大鼠,SPF级,随机分为对照组、模型组、VNS组、甲基牛扁亭(MLA)+VNS组,其中对照组与MLA+VNS组分别20只,模型组与VNS组因模型制作失败与动物死亡,分别剩下15只和14只.除对照组之外,其余各组皆通过腹腔注射皮罗卡品建立氯化锂-皮罗卡品IE大鼠模型.对照组仅分离迷走神经,不采取电刺激;模型组不采取任何干预措施;VNS组在模型制作成功后7 d采取VNS,连续4周;MLA+VNS组先侧脑室给药MLA(3.4μg/μ1,5 μl),然后给予VNS,连续4周.观察并记录各组大鼠癫痫发作的次数与持续时间的变化;然后断头处死大鼠,快速分离海马并制备10％组织匀浆,离心并提取上清液,通过分光光度法测定上清液中AChE、ChAT活性;ELISA法检测TNF-α、IL-6和IL-1β表达;Western blot检测海马组织α7nAChR蛋白表达;免疫荧光染色法检测海马组织α7nAChR与小胶质细胞共表达.结果:①通过VNS治疗4周后,大鼠癫痫发作的频率以及持续的时间都明显低于模型组(P＜0.01);MLA阻断后在给予VNS,大鼠癫痫发作的频率以及持续的时间也明显低于模型组,但高于VNS组(P＜0.01).②与对照组比较,模型组大鼠海马组织ChAT表达明显下降,AChE表达明显升高(P＜0.01);与模型组比较,VNS组与MLA+VNS组大鼠海马组织ChAT表达明显升高,AChE表达明显降低(P＜0.01);与VNS组比较,MLA+VNS组大鼠海马组织ChAT、AChE表达无明显变化(P＞0.05).③与对照组比较,模型组大鼠海马组织TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显升高(P＜0.01);与模型组比较,VNS组大鼠海马组织TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显降低(P＜0.01);与VNS组比较,MLA+VNS组大鼠海马组织TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显升高(P＜0.01).④与对照组比较,模型组大鼠海马组织以及小胶质细胞上o7nAChR表达明显降低(P＜0.01);与模型组比较,VNS组大鼠海马组织以及小胶质细胞上α7nAChR表达明显上调(P＜0.01);与VNS组比较,MLA+VNS组海马小胶质细胞上共表达α7nAChR数量明显减少(P＜0.01).结论:VNS对IE大鼠有明显的治疗作用,其机制可能是通过直接激活海马小胶质细胞CAP,抑制海马神经炎性反应来实现的.

    难治性癫痫迷走神经刺激α7nAChR胆碱能抗炎海马

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普

    老年大鼠神经组织星形胶质细胞的分选培养与炎性特征分析

    岳夏雅赵欣张雨彤郝娜...
    379-384页
    查看更多>>摘要：目的:建立优化的年轻与老年大鼠神经组织星形胶质细胞的分离纯化方法,比较年轻大鼠与老年大鼠星形胶质细胞的形态、功能差异,探讨老化后星形胶质细胞的功能改变及其在衰老过程中发挥的可能机制.方法:采用50％-35％的percoll密度梯度离心法分选年轻(2月龄)和老年(20月龄)SD大鼠的大脑与脊髓星形胶质细胞;每组细胞设置3个复孔,培养72 h后,采用免疫荧光检测星形胶质细胞特异性标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP),观察不同年龄阶段星形胶质细胞的形态特征;qPCR检测衰老标志(p16、p21)的表达,β-半乳糖苷酶染色检测星形胶质细胞的衰老情况;qPCR检测促炎因子(IL-1β、TNF-α)与抗炎因子(IL-10)的表达水平.结果:采用50％-35％的percoll梯度分选得到的星形胶质细胞的数量多、活性好、纯度高达95％以上,可用于后续实验.与年轻大鼠神经组织的星形胶质细胞相比,分选自老年大鼠神经组织的星形胶质细胞在细胞形态上偏向激活态,突起较少;星形胶质细胞β-半乳糖苷酶染色阳性率升高,p16、p21表达也明显增多(P＜0.01);老年大鼠神经组织的星形胶质细胞的促炎因子(IL-1β、TNF-α)表达升高(P＜0.05),抗炎因子(IL-10)表达有所降低(P＜0.05).结论:50％-35％的per-coll梯度可以作为大鼠神经组织星形胶质细胞的分选纯化、原代培养的方法;随着年龄的增加,星形胶质细胞发生细胞老化,表现出促炎症表型,促进神经系统的炎性衰老,可能是神经系统老化及神经退行性疾病的机制之一.

    星形胶质细胞神经组织老化炎性因子细胞培养大鼠

      原文链接:
    • 万方数据
    • 维普