查看更多>>摘要:目的 通过气管滴注二氧化硅(SiO2)颗粒构建小鼠矽肺模型,探究金蝉花多糖(CCP)对矽肺小鼠肺纤维化的改善作用和机制.方法 于2023年5月,提取分离得到CCP,采用高效液相色谱和傅里叶变换红外光谱分析其单糖组成和官能团构成.C57BL/6J小鼠气管滴注50 μl 50 mg/ml的SiO2混悬液以制备矽肺小鼠模型,然后将造模成功的小鼠随机分为模型组、CCP干预组[低剂量组(LCCP组)、中剂量组(MCCP组)和高剂量组(HCCP组)],对照组滴注50 μl生理盐水,每组8只.CCP干预组每天分别灌胃一次100、200和400mg/kg的CCP溶液,对照组和模型组灌胃生理盐水,连续给药30d.记录小鼠体重并计算肺系数,采用HE和Masson染色检测小鼠肺组织的病理形态学变化;ELISA法测定肺组织中纤维化相关指标[羟脯胺酸(HYP)、结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)]、肺组织和肺泡灌洗液中促炎因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)]的含量;免疫组化法测定小鼠肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)的表达;Western blot法检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、P-Smad2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65亚基(NF-κBp65)和髓性分化原发应答基因88(MyD88)的相对表达量.结果 CCP总糖含量为86.78%,由D-甘露糖、D-鼠李糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其摩尔比为12.71∶1.53∶1.00∶12.64,红外光谱表明具有多糖的特征基团.与对照组比较,模型组小鼠体重降低,肺系数升高,肺组织中HYP、CTGF和MMP-2的含量升高,肺组织和肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量升高(P<0.05);肺组织显示大量炎症细胞浸润和胶原纤维沉积,矽肺纤维化程度严重;肺组织Collagen Ⅰ表达上调,TGF-β1、P-Smad2/Smad2、α-SMA、TLR4、NF-κBp65和MyD88的相对蛋白表达水平升高(P<0.05).与模型组比较,MCCP组和HCCP组小鼠体重升高,肺系数降低,肺组织中HYP、CTGF和MMP-2的含量降低,肺组织和肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低(P<0.05);肺部炎症细胞浸润减轻,纤维化程度具有不同程度的改善;肺组织Collagen Ⅰ 表达下调,TGF-β1、P-Smad2/Smad2、α-SMA、TLR4、NF-κBp65 和 MyD88 的相对蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 CCP可通过抑制TGF-β1/Smad通路和TLR4/核因子κB(NF-κB)通路的激活,降低肺组织中纤维化相关指标和促炎因子的水平,改善SiO2颗粒导致的小鼠肺部炎症和矽肺纤维化.