查看更多>>摘要:目的:探讨当归补血汤(Danggui Buxue Decoction,DBD)对慢性间歇性低氧(Chronic Intermittent Hypoxia,CIH)小鼠肺脏炎性损伤的改善作用及潜在机制.方法:将 28 只雄性C57BL/6 小鼠随机分为 4 组,分别是正常对照组(Control组)、慢性间歇性低氧组(CIH组)、慢性间歇性低氧+当归补血汤治疗组(CIH+DBD组)、当归补血汤组(DBD组).CIH组与CIH+DBD组小鼠置于低氧舱内,先充入氮气,使氧气浓度在 90s内从 21%下降到 9%,再充入氧气,使氧气浓度在 90s内逐渐上升到 21%.Control组和DBD组小鼠置于舱内,充入正常空气.每天处理 8h,持续 35 d.CIH+DBD组、DBD组于每日入舱前灌胃给予DBD,Control组和CIH组同时灌胃等体积的生理盐水.动物造模结束后检测各组小鼠肺脏病理情况;qPCR检测肺组织肿瘤坏子因子α(TNF-α)、白介素 6(IL-6)和白介素 1β(IL-1β)mRNA水平表达变化.DHE探针检测肺组织活性氧(ROS)含量;Western Blot检测硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、核苷酸寡聚结构域样受体蛋白 3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶 1(Caspase-1)、IL-1β以及超氧化物歧化酶 2(SOD2)、NADPH氧化酶 2(NOX2)等表达水平;免疫组织化学染色观察TXNIP以及NLRP3的表达水平.结果:与Control组相比,CIH组小鼠肺泡间隔面明显增厚,有大量炎性细胞浸润,并且伴随肺泡的减少和肺泡腔增大,肺组织ROS含量增多(P<0.05),且TXNIP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的蛋白表达升高(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA水平上升(P<0.05),SOD2 蛋白表达下降(P<0.05),NOX2 蛋白表达上升(P<0.05).经DBD干预治疗后,与CIH组相比,CIH+DBD组肺泡间隔增厚改善,炎性细胞浸润减少,肺组织的ROS含量(P<0.05)以及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA水平均下降(P<0.05),TXNIP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、NOX2 蛋白表达下降(P<0.05),SOD2 表达升高(P<0.05).免疫组织化学染色结果显示,与Control组相比,CIH组中TXNIP和NLRP3 蛋白表达较多,且多见于肺泡间隙和肺泡上皮细胞胞浆,给予DBD后减轻.结论:当归补血汤对CIH小鼠肺脏损伤有明显的改善作用,其机制可能是通过抑制ROS/TXNIP/NLRP3 信号通路来实现的.