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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年，由中华人民共和国教育部主管，中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办，是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士，著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果；刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    益母草碱对绵羊精液冷冻保存的影响

    李智星卿育洪李志远曹少奇...
    2115-2122页
    查看更多>>摘要：精液冷冻保存是有效提升绵羊(Ovis aries)人工授精效率的有效手段之一,在精液保存稀释液中添加抗氧化剂是精液保存过程的关键,益母草碱作为一种抗氧化剂在精液保存的研究中鲜有报告.本研究在多浪羊精液冷冻保存稀释液中分别添加20、40、60、80和100 μmol/mL的益母草碱,通过检测精液品质、抗氧化能力、相关凋亡基因mRNA相对表达量及受胎率等指标,综合评价益母草碱对绵羊精液冷冻保存效果的影响.研究结果表明,与对照组(0 μmol/mL)相比,在冷冻保存稀释液中添加益母草碱后,能显著提高多浪羊冷冻保存精液的活率、顶体完整率和质膜完整率(P＜0.05);并显著提升精液超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性,提高总抗氧化能力(total antioxidant eapacity,T-AOC)水平并降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量(P＜0.05);其中,冷冻保存液中益母草碱添加浓度为60 μmol/mL时保存效果最佳(P＜0.05);此外,与对照组相比,在冷冻保存过程中,添加最佳浓度益母草碱组的精子相关凋亡基因肿瘤坏死因子受体超族成员6(TNF receptor superfamily,member 6,Fas)、半胱天冬酶家族-3(caspase family omega-3,Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2关联X蛋白(Bcl2-associated X,Bax)的mRNA相对表达量显著降低(P＜0.05),抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相对表达量显著升高(P＜0.05);同时冷冻保存液中添加浓度为60 μmol/mL组精子的受胎率为60%,高于0 μmol/mL组,达到鲜精阴道输精的最低水平.本研究结果表明,在精液稀释液中添加浓度为60 μmol/mL的益母草碱后可显著改善多浪羊冷冻保存精液品质,提升其抗氧化能力,同时起到抗凋亡作用,使受胎率达到一个良好的水平.本研究为探索益母草碱对提高绵羊精液保存效果提供了有益借鉴.

    精液保存益母草碱精液品质抗氧化能力抗凋亡能力受胎率

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    双峰驼TLR10基因的原核表达、抗体制备及组织分布

    曾巍巍张睿谢东旭索南吉...
    2123-2131页
    查看更多>>摘要：Toll样受体10(toll-like receptors 10,TLR10)在病原微生物进入机体后能与配体迅速结合并促进各种免疫细胞活化,在免疫系统中扮演着重要角色,但在机体不同组织器官的表达特点需进一步探究.本研究以NCBI中收录的双峰驼(Camelus bactrianus)TLR10基因(GenBank No.XM_010962682.2)构建pET-28a-TLR10原核表达质粒,在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达TLR10重组蛋白,并用纯化后的蛋白制备双峰驼TLR10多克隆抗体,通过ELISA和Western blot测定抗体的效价和特异性,采用免疫组织化学法观察TLR10在双峰驼心、肝、脾、肺和肾中的表达特征.结果显示,双峰驼TLR10重组蛋白大小为50 kD,主要以包涵体形式表达,免疫日本大耳兔(Oryctolagus cuniculus)后获得的抗体效价为1∶32000,原核表达的TLR10蛋白能与该抗体特异性结合;免疫组化结果显示,TLR10主要在双峰驼心肌细胞、肝细胞及枯否细胞、脾脏的单核/巨噬细胞、肺脏的支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡细胞和尘细胞以及肾脏的肾小管上皮细胞表达.本研究为进一步揭示TLR10蛋白的功能及其在双峰驼天然免疫和获得性免疫中发挥的生物学作用提供材料.

    双峰驼Toll样受体10(TLR10)原核表达抗体制备免疫组织化学

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    江西地方鸡品种线粒体DNAND6基因的遗传多样性

    贾晓旭陈皖强唐修君樊艳凤...
    2132-2139页
    查看更多>>摘要：江西省拥有众多的地方鸡(Gallus gallus domesticus)品种.为研究江西地方鸡品种的遗传多样性和系统发育关系,本研究采集了江西不同地区的6个地方鸡品种(安义瓦灰鸡,白耳黄鸡,崇仁麻鸡,丝羽乌骨鸡,东乡绿壳蛋鸡和余干乌骨鸡)的198份血液样本,采用PCR扩增与核酸测序技术相结合的方法对这6个江西地方鸡品种线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)脱氢酶亚基6(NADH dehydrogenase subunit 6,ND6)基因全序列进行了检测.结果表明,6个江西地方鸡品种的ND6基因序列全长为522 bp,共计检测到7个核苷酸多态位点,根据序列变异共确定了7种单倍型,其中Hap1为主流单倍型.核苷酸多样性、单倍型多样性和平均核苷酸差异分别为0.00275±0.00086、0.694±0.024和1.437.中介网络图分析显示,6个江西地方鸡品种单倍型呈星状发散分布.系统发育分析发现,丝羽乌骨鸡、东乡绿壳蛋鸡和余干乌骨鸡聚为一支,安义瓦灰鸡、白耳黄鸡和崇仁麻鸡聚为一支.以上结果表明,江西地方鸡线粒体ND6基因多态信息含量丰富,乌骨鸡可能有不同的母系来源.该研究结果为江西地方鸡遗传资源的种质保护、品种选育和鉴定工作提供了参考.

    线粒体DNA(mtDNA)遗传多样性鸡江西系统发育

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    鸭circ_MBNL1在脂肪细胞分化过程中的功能预测

    张傲王来娣杨婷江勇...
    2140-2149页
    查看更多>>摘要：环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一种新型内源性非编码RNA,在各种组织中均有表达.本研究以樱桃谷鸭(Anas platyrhynchos domesticus)胚原代细胞分化过程中circRNA测序结果为基础,针对由肌肉盲样剪接调节因子1(musblind-like 1,MBNL1)基因编码的circ_MBNL1进行鉴定与功能分析.通过PCR扩增和焦磷酸测序技术获得接合序列,采用核质分离消化实验验证了鸭circ_MBNL1主要定位在细胞核中.组织表达谱结果提示,circ_MBNL1主要在鸭脾脏、脂肪和肺组织中表达.生物信息学分析结果表明,circ_MBNL1与预测的靶基因主要富集在脂肪细胞因子信号通路、FoxO信号等通路,推测circ_MBNL1可能参与调控鸭脂肪细胞的分化过程.本研究为深入探究circ_MBNL1在鸭脂肪细胞分化过程中的调控作用提供了理论基础.

    鸭肌肉盲样剪接调节因子1(MBNL1)脂肪细胞功能预测

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    基于TMT蛋白质组学对Vero细胞粘附相关蛋白的研究

    张潇文杨晓莉毕冬琳杨东亮...
    2150-2162页
    查看更多>>摘要：细胞-细胞及细胞-细胞外基质的粘附取决于细胞特有的粘附蛋白及其相关调节信号.非洲绿猴肾脏上皮细胞(African green monkey kidney epithelial cells,Vero)是流感病毒(Influenza virus)、新型冠状病毒(Novel coronavirus)等多种病毒繁殖、纯化和疫苗生产的优良细胞株,为进一步探寻与Vero细胞粘附相关的蛋白,继而有效提升大规模高密度悬浮培养,本研究利用基因修饰及无血清培养基细胞技术成功构建悬浮型Vero细胞,并通过串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)定量蛋白质组学技术对贴壁培养Vero细胞(adherent culture Vero,Adh_Vero)和悬浮培养Vero细胞(suspension culture Vero,Sus_Vero)中与细胞粘附性能相关的差异表达蛋白进行分析,以期为与悬浮培养Vero细胞粘附相关的候选靶基因筛选提供依据.结果表明,与Adh_Vero细胞相比,Sus_Vero细胞中表达差异显著的蛋白质有190个,其中上调表达蛋白116个,下调表达蛋白74个.通过GO功能注释和KEGG通路富集筛选获得与粘附相关的差异表达蛋白6个,其中5个上调表达蛋白分别是多配体蛋白聚糖-4(syndecan 4,SDC4)、肌动蛋白调节器(enabled homolog,ENAH)、肌球蛋白轻链12β(myosin light chain 12β,MYL12β)、肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinas,MYLK)和封闭蛋白(occludin,OCLN),1种下调表达蛋白为整合素β2蛋白(integrin β2,ITGβ 2).qPCR检测表明,Sus_Vero中SDC4、OCLN、MYL12β、MYLK以及ENAH的mRNA水平极显著下调(P＜0.01),ITGβ2的mRNA水平极显著上调(P＜0.01).Western blot检测表明,Sus_Vero中SDC4蛋白表达量也比贴壁培养细胞中显著减少,与定量蛋白质组学蛋白质表达趋势一致.本研究结果初步揭示了Vero细胞的粘附机制,为进一步运用基因工程技术构建Sus_Vero提供了有效候选靶蛋白.

    非洲绿猴肾脏上皮细胞(Vero)细胞悬浮培养蛋白质组学细胞粘附多配体蛋白聚糖-4(SDC4)

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    贝莱斯芽胞杆菌ZF438菌株的鉴定及其发酵上清液对辣椒炭疽病的抑菌作用

    赵子璇曾先锋覃诗扬谢学文...
    2163-2175页
    查看更多>>摘要：辣椒炭疽病(pepper anthracnose)是辣椒(Capsicum annuum)生产中的三大病害之一,可引起辣椒落叶烂果,严重影响辣椒的产量和品质.目前,利用微生物生物防治辣椒炭疽病具有绿色环保且不产生耐药性的优势,是农业健康发展的必然趋势.本研究从辣椒根际土壤中分离到一株生防菌株ZF438(CGMCC No.22291),能够高效抑制辣椒炭疽病菌,通过形态学观察、生理生化特性测定及多基因系统发育树构建鉴定其为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis).通过平板对峙试验检测ZF438菌株对8种病原真菌和9种病原细菌的抑制效果,发现其具有广谱抑菌活性.进一步测定ZF438菌株的抑菌活性物质在不同温度、pH、紫外照射、超声处理和生物酶中的抑菌稳定性,结果显示,其发酵上清液在4～40℃、pH 2.0～10.0、紫外线处理和超声波处理条件下呈现较高的抑菌稳定性.此外,对于辣椒离体果实和活体盆栽条件下,ZF438菌株接种使辣椒炭疽病的发病率和病情指数均显著降低(P＜0.05),离体果实防效可达68.26%,活体盆栽防效可达47.93%.本研究验证了贝莱斯芽胞杆菌ZF438的生物学特征,证明其具有良好的生防潜力和应用前景,为辣椒炭疽病的生物防治提供了新的资源.

    贝莱斯芽胞杆菌辣椒炭疽病抑菌活性发酵上清液稳定性

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    湛江雷州沿海红树林放线菌的多样性、新颖性及其抗肿瘤活性

    李俊杰林曼佳陈海明刘玥利...
    2176-2189页
    查看更多>>摘要：红树林多生长在环境特殊多变的潮间带,该环境有利于稀有放线菌的生长及其活性化合物的产生.为探索湛江雷州沿海地区红树林放线菌菌种资源的多样性、新颖性及药用开发潜力,本研究采用10种不同的培养基,使用稀释涂布平板法对红树林根际土壤样品中的放线菌进行了分离.经纯化培养后,进行PCR扩增并对放线菌株的16S rRNA序列进行测序及系统发育分析;同时根据菌株的16S rRNA比对结果及菌落形态特征,选取菌株进行小型发酵并对发酵液进行乙酸乙酯萃取、旋蒸以制备发酵粗提物甲醇溶液.使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法进行发酵粗提物对人肺癌细胞株A549及人肝癌细胞株HepG2的抗肿瘤活性研究.结果显示,从广东湛江红树林国家级自然保护区位于雷州沿海地区的3处不同采样点收集的8份根际土壤样品中共分离出154株放线菌,隶属于11个目,15个科,19个属,其中优势菌属为小单孢菌属(Micromonspora)(22.7%,35株);其次是微杆菌属(Microbacterium)(20.8%,32株)及链霉菌属(Streptomyces)(10.4%,16株);有分布于4个属的7株16S rRNA序列相似性低于98.65%,为潜在新种.在发酵粗提物抗肿瘤活性筛选研究中,共53株菌株至少对1株肿瘤细胞株具有抗肿瘤活性,占选取的发酵菌株(67株)的79.1%.研究结果表明,广东湛江雷州沿海地区红树林区域的放线菌多样性高,潜在可开发药用资源丰富.本研究为后续对雷州沿海放线菌分布认知的进一步完善以及抗菌等其他生物活性及相关机制研究的开展提供了充足的菌种基础.

    湛江红树林雷州沿海根际土壤放线菌抗肿瘤活性

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    DNA甲基化在家畜繁殖中的研究进展

    雒瑞瑞王彩莲郎侠
    2190-2199页
    查看更多>>摘要：DNA甲基化是在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团的过程.作为重要的表观遗传修饰机制之一,DNA甲基化是目前生命科学领域研究的热点.随着测序技术的高速发展,DNA甲基化检测技术也取得了显著的进展.在动物繁殖方面,DNA甲基化程度改变,可能会影响繁殖性状相关基因的表达情况,从而使动物的繁殖性能发生改变.本文从DNA甲基化概述、DNA甲基化的检测方法以及在动物繁殖上的研究等方面做了简要的综述,并探明DNA甲基化的表观遗传机制,为充分发挥家畜繁殖力,选育优质的新品种或品系提供分子育种的理论依据.

    DNA甲基化检测方法家畜繁殖

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    lncRNA生物学作用及其调控牛剩余采食量的研究进展

    明文轩赵志艳康晓龙
    2200-2208页
    查看更多>>摘要：长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类影响基因表达及细胞功能的重要表观调控因子,其表达模式具有组织特异性.lncRNA的生物学作用已在众多疾病及生物表型研究中得到广泛报道.采食量是影响畜禽养殖经济效益的主要因素之一,大量研究主要聚焦于营养及免疫等因素对家畜采食量的影响,但从分子遗传角度对其进行解析与功能研究仍较缓慢.为探究lncRNA在牛(Bos taurus)采食行为及剩余采食量(residual feed intake,RFI)调控中的生物学作用,本文概述了lncRNA的分子特点及主要调控功能,并从影响牛采食量表型变化相关的重要组织(下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴、肝脏、骨骼肌、脑-肠轴)梳理归纳了lncRNA与牛RFI表型之间的关系.本文为后续从细胞功能角度揭示lncRNA对RFI的表型调控研究提供依据,为牛高效生产及品种改良提供参考.

    长链非编码RNA(lncRNA)牛剩余采食量采食量脑肠轴

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    杨梅品种特异性荧光SSR分子标记数据库构建

    巨鹏举朱奕凡赵岚汪国云...
    2209-2220页
    查看更多>>摘要：我国杨梅(Morella rubra)种质资源丰富,地方品系较多.尽管基于杨梅基因组已开发了大量SSR分子标记,但目前尚未形成一套统一用于杨梅品种资源区分鉴定的分子标记,种质资源遗传特异性数据管理较为混乱.本研究基于已开发的杨梅SSR分子标记及连锁图谱定位,从每个连锁群中选择2个扩增片段长度稳定、重复性好的SSR分子标记,采用荧光标记引物,于DNA测序仪上进行片段分析,构建分子标记数据库,形成区分杨梅资源的统一标准;在此基础上分析杨梅各株系的遗传距离,绘制基于遗传距离的聚类树.结果显示,所选取的16个SSR分子标记在杨梅品系材料中的扩增片段大小存在差异,可用于109个杨梅品种与品系的区分,且不同品种与品系的地理来源与遗传距离的远近存在一定程度上的相关性;以地方主栽品种'荸荠种'、'东魁'、'丁岙'和'安海片早生'为扩增片段大小的标准参照,利用16个SSR分子标记的扩增片段构建109份杨梅资源的指纹图谱;进一步选择多态性信息含量(PIC)较高的5个SSR分子标记,可成功区分85%(94/109)的杨梅材料,显示较高的鉴定效率.本研究为杨梅种质资源管理提供更加高效、可靠的方法和标准.

    杨梅指纹图谱SSR品种鉴定聚类分析

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