查看更多>>摘要:目的 评估亚精胺(spermidine,SPD)对miR-451-5p的调控作用及通过调控miR-451-5p对衰老的心肌细胞增殖活性和自噬的影响.方法 阿霉素处理大鼠心肌H9C2细胞,构建心肌衰老细胞模型.将细胞分为对照(Control)组,模型(Model)组,阴性对照(NC)+SPD组和miR-451-5p抑制剂(Inhibitor)+SPD组.除Control组外,其余组均采用阿霉素构建心肌衰老细胞模型,NC+SPD组和Inhibitor+SPD组细胞造模后分别转染miR-NC和miR-451-5p inhibitor,并用10 μmol/L的SPD处理24 h.CCK-8检测细胞增殖活性,β-半乳糖苷酶染色(SA-β-gal)检测心肌细胞衰老情况,Western blot检测细胞中心肌衰老标志物P21蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中miR-451-5p、自噬标志物(LC3Ⅱ和Be-clin1)的mRNA表达.结果 与正常H9C2细胞相比,心肌衰老细胞模型中miR-451-5p低表达(P<0.05).与Control组相比,Model组细胞增殖活性下降(P<0.05),SA-β-gal阳性的染色面积增加,P21蛋白表达上调(均P<0.05),miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1 mRNA表达下调(均P<0.05).与Model组相比,NC+SPD组细胞增殖活性增加,SA-β-gal阳性的染色面积减少(均P<0.05),P21蛋白表达下调(P<0.05),miR-451-5p、LC3 Ⅱ和Beclin1 mRNA表达上调(均P<0.05).与NC+SPD组相比,Inhibitor+SPD组细胞增殖活性下降(P<0.05),SA-β-gal阳性的染色面积增加,P21蛋白表达上调(均P<0.05),miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1 mRNA表达下调(均P<0.05).结论 亚精胺可通过上调miR-451-5p的表达促进心肌衰老模型细胞的增殖和自噬,进而缓解心肌细胞的衰老.