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畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会
畜牧兽医学报

中国畜牧兽医学会

文杰

月刊

0366-6964

xmsyxb@263.net

010-62815987 62816996 62893836

100193

北京海淀区圆明园西路2号

畜牧兽医学报/Journal Acta Veterinaria Et Zootechnica SinicaCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本学报是中国畜牧兽医学会主办，《畜牧兽医学报》编委会、中国农业科学院畜牧研究所编辑出版的全国性的畜牧兽医学术刊物。创刊于1956年7月，刊登较高水平的学术论文和企业研究报告以及对生产实践具指导性、启发性的文章。为全国中文核心期刊、中国自然科学核心期刊，并被国内外重要引文数据库及文摘性期刊收录。主要栏目包括畜牧和兽医两大学科。
正式出版
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    牛羊水间充质干细胞对小鼠酒精性肝病的影响

    纪洪兵宋哈楠赵诗宇张涛...
    2905-2914页
    查看更多>>摘要：试验旨在分离培养牛羊水间充质干细胞(AF-MSCs),并研究其对酒精性肝病(ALD)小鼠治疗效果以及对肝组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响.从4～5月龄雌性胎牛羊水中获取AF-MSCs,进行RT-PCR、免疫荧光及诱导成脂鉴定.将48只ICR小鼠(雄性)随机分为4组:空白对照组(BC组)、模型对照组(MC组)、AF-MSCs组(MC+AF-MSCs组)和水飞蓟宾胶囊(SC)组(MC+SC组),每组12只.除BC组灌胃0.2 mL生理盐水,其余各组均灌胃56度红星二锅头(5 g·kg-1,2次·d-1),连续4周;第29天MC+AF-MSCs组进行肝外注射Dil标记的AF-MSCs(5×106个·mL-1),MC+SC组分2次灌胃SC 2.4 mg(溶于56度红星二锅头);试验结束后,测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和甘油三酯(TG)活性.HE染色、免疫组化法观察造模情况,Dil示踪AF-MSCs在肝内定植分布;qRT-PCR法检测HIF-1α、VEGF及TLR4基因表达情况.RT-PCR、免疫荧光结果表明,分离得到牛AF-MSCs,且有诱导成脂分化能力.血清学结果显示,MC组ALT、AST和TG活性极显著高于BC组(P＜0.01).组织病理切片显示,MC组肝组织中出现脂肪性变、炎性细胞浸润及肝血窦充血等病理性变化,说明56度红星二锅头成功复制ALD小鼠模型;与MC+SC组相比,MC+AF-MSCs组ALT、AST活性显著降低(P＜0.01),肝组织中脂肪性变减轻,肝血窦未见充血,说明AF-MSCs对肝功能的改善比SC效果显著;qRT-PCR结果显示,MC+AF-MSCs组下调HIF-1α、VEGF、TLR4基因的表达量较MC+SC组显著(P＜0.01),说明AF-MSCs参与HIF-1α/VEGF信号通路的调控,抑制TLR4表达的效果优于SC;细胞示踪术证明,AF-MSCs定植在病变部位并趋化更多AF-MSCs向炎症部位迁移参与肝组织的修复.综上,本研究成功分离得到牛AF-MSCs,其能够参与调节氧化应激、血管生成及抑制炎性因子的释放,且改善ALD的效果优于SC.

    羊水间充质干细胞酒精性肝病缺氧诱导因子-1α异种移植

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    桧烯抗弓形虫活性的体外评价

    邱燕华翟斌涛尚小飞周绪正...
    2915-2923页
    查看更多>>摘要：本研究旨在筛选具有抗弓形虫活性的萜类化合物,并进行体外活性评价.对26个萜类化合物进行体外抗弓形虫增殖作用的筛选,采用CCK-8法确定活性化合物对Vero细胞的毒性和安全浓度,Giemsa染色进一步确定对弓形虫的活性,通过细胞免疫荧光、Giemsa染色和生物化学发光法评价活性化合物对弓形虫的体外活性.结果表明,26个萜类化合物中,桧烯对弓形虫有显著的活性,桧烯对RH-2F的IC50为90.76μg·mL-1,Giemsa染色和细胞免疫荧光的结果表明,桧烯对细胞内的两种弓形虫虫株都有显著的抗增殖作用,并且对弓形虫的入侵有极显著的抑制作用(P＜0.001).综上表明,桧烯对弓形虫的入侵和细胞内增殖具有显著的抑制作用,可作为潜在的抗弓形虫先导化合物.

    弓形虫萜类化合物莪术烯环黄芪醇桧烯

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    水溶性烯丙孕素-磺丁基-β-环糊精包合物的制备及表征

    杨玉帅李泽金天明杨升...
    2924-2933页
    查看更多>>摘要：旨在提高烯丙孕素原药在水中的溶解度,提高烯丙孕素原药的生物利用度,使用磺丁基-β-环糊精对烯丙孕素原药进行包合.本试验使用冷冻干燥法来制备烯丙孕素-磺丁基 环糊精包合物,以此来解决烯丙孕素在临床使用中因其水不溶性而受到限制及其使用后生物利用度低的问题,进而拓宽烯丙孕素的药用途径.通过傅里叶变换红外光谱法、热重分析法和显微镜成像法对所制得的烯丙孕素包合物进行表征,并用溶解度法对包合物进行溶解度测定.以包合物的收率和包合率为评价指标,筛选最优的包合物制备条件.结果显示:经筛选,包合物的最佳制备条件:在55℃,ALT与SBE-β-CD的投料摩尔比为1∶6,包合时间为5 h,溶液pH为8,溶剂量为15 mL(当以ALT投药量为0.1 g时计);以最优制备条件制备所得的包合物中ALT的平均包合率为(90.90±1.80)％(n=3),平均载药量为(4.30±2.30)％(n=3),包合物的收率为(93.19±1.67)％.经傅里叶变换红外光谱法、热重分析法和显微镜成像法对所制得的包合物进行表征,可证实成功制得包合物.溶解度法试验结果表明,形成包合物后,其溶解度较烯丙孕素原药提高了 988.86倍,且该包合物稳定性好,可满足不同剂型的要求.磺丁基-β-环糊精对烯丙孕素原药具有较好的增溶作用,达到了增加药物溶解度的目的,且该制备方法简单,条件温和,易于产业化生产,有利于烯丙孕素的进一步开发利用.

    烯丙孕素磺丁基-β-环糊精冷冻干燥法包合物表征

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    反溶剂共沉淀技术制备氟苯尼考固体分散体

    刘连超王灵灵张雨晴李金辉...
    2934-2943页
    查看更多>>摘要：本文旨在通过制备氟苯尼考无定形固体分散体(amorphous solid dispersion,ASD)提高其溶解度和生物利用度.选用醋酸羟丙基甲基纤维素琥拍酸酯(hydroxypropyl methyl cellulose acetate succinate,HPMCAS-MF)为载体,利用反溶剂共沉淀法制备氟苯尼考无定形固体分散体,利用X-射线衍射、热分析及扫描电镜对ASD进行表征,并通过测定溶出度和药物代谢动力学对其体内外释药进行研究.结果显示,当氟苯尼考与载体的比例为5∶5时形成固体分散体,该固体分散体无氟苯尼考的晶体衍射峰,无氟苯尼考的特定熔点峰,扫描电镜结果未见氟苯尼考ASD表面光滑的晶体形态,而是显示疏松多孔结构,表面积增大,且使氟苯尼考的饱和溶解度提高了 4.8倍,相对生物利用度提高了约37.2％,该固体分散体在3个月内稳定性良好.综上表明,利用共沉淀法制备的新型氟苯尼考固体分散体稳定性良好,可有效提高氟苯尼考溶解度和生物利用度.

    氟苯尼考无定形固体分散体溶解度共沉淀法

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    基于RAGE-TLR4串扰的高糖影响牛肺泡巨噬细胞促炎细胞因子释放的分子机制

    谭天宇才冬杰苟丽萍任志华...
    2944-2952页
    查看更多>>摘要：本试验旨在研究高浓度葡萄糖对牛肺泡巨噬细胞(BAMs)促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α释放的影响及其机制是否与RAGE-TLR4相关信号通路串扰有关.将BAMs随机分为正常糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+RAGE抑制剂组(H+F)、高糖+TLR4抑制剂组(H+T)及DMSO组,处理12 h后收集上清及下层细胞.采用qRT-PCR 和 Western blot 检测细胞 RAGE、TLR4、MyD88、NF-κB p65的 mRNA 及蛋白表达情况,ELISA 检测上清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度.结果表明,高糖极显著上调RAGE、TLR4、MyD88和NF-κB p65基因、蛋白表达水平以及上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α浓度(P＜0.01);RAGE抑制剂与TLR4抑制剂均极显著抑制高糖引起的RAGE、TLR4、MyD88和 NF-κB p65基因、蛋白表达水平上调以及 IL-1β、IL-6、TNF-α 释放(P＜0.01),即 RAGE与TLR4均在激活RAGE/TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路中发挥调控作用.综上所述,高糖能够通过RAGE-TLR4串扰引起牛肺泡巨噬细胞释放促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α,进一步阐明了高糖促进牛肺泡巨噬细胞炎症反应的分子机制.

    炎症信号通路RAGE-TLR4串扰牛肺泡巨噬细胞高糖

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    褪黑素对镉致鸭大脑皮质毒性损伤的保护作用

    张文华闻双全王莉徐明畅...
    2953-2959页
    查看更多>>摘要：为探究褪黑素对镉致鸭大脑皮质毒性损伤的保护作用,本试验将16只20日龄高邮鸭随机分为4组,分别为对照组、褪黑素组、镉组、镉与褪黑素共处理组.对照组鸭自由采食饮水;褪黑素组鸭自由饮用含有0.2 mg·L-1褪黑素的水;镉组鸭自由采食拌有2 mg·kg-1氯化镉的饲料;镉与褪黑素共处理组鸭自由饮用含有0.2 mg·L-1褪黑素水的同时自由采食拌有2 mg·kg-1氯化镉的饲料.60 d后,剖检并采集鸭大脑皮质.比色法检测大脑皮质中丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)的水平,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的含量,免疫组化染色观察Nrf2核转位,免疫印迹法检测Nrf2、HO-1的蛋白表达.结果显示,与对照组相比,镉组鸭大脑皮质发生明显Nrf2核转位,T-AOC水平极显著降低(P＜0.01),MDA、TNF-α、IL-iβ含量和 Nrf2、HO-1蛋白表达量极显著升高(P＜0.01);与镉组相比,镉与褪黑素共处理组鸭大脑皮质Nrf2核转位减少,T-AOC水平显著升高(P＜0.05),MDA、TNF-α、IL-1β含量和Nrf2、HO-1蛋白表达量显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01)o综上,褪黑素对镉所致的鸭大脑皮质毒性损伤具有一定的保护作用.

    褪黑素镉鸭大脑皮质毒性损伤

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    链脲佐菌素和四氧嘧啶联合注射建立犬Ⅰ型糖尿病模型

    李佳锴戴鹏秀陈奕静张露文...
    2960-2968页
    查看更多>>摘要：旨在探索链脲佐菌素和四氧嘧啶联合注射建立犬Ⅰ型糖尿病模型的最佳剂量.本试验选取18只9～12月龄、平均体重为(5.09±0.30)kg的健康中华田园犬,随机分为6组(每组3个重复,每个重复1只).按链脲佐菌素和四氧嘧唆不同剂量混合分组,其中Ⅰ组(20 mg·kg-1/40 mg·kg-1)、Ⅱ组(30 mg·kg-1/50 mg·kg-1)和Ⅲ组(40 mg·kg-1/60 mg·kg-1)进行单次静脉注射;Ⅳ组(10 mg·kg-1/20 mg·kg-1)、V 组(15 mg·kg-1/25 mg·kg-1)和Ⅵ组(20 mg·kg-1/30 mg·kg-1)进行两次静脉注射,两次注射间隔为24 h.通过注射后血糖、葡萄糖耐量、血液生理生化和胰腺组织形态学变化来评价各组建模效果.结果显示:1)Ⅰ组和Ⅳ组的空腹血糖始终处于正常水平,Ⅱ组和Ⅲ组连续7 d超过15 mmol·L-1,V组和Ⅵ组虽有上升,但试验期间均未超过10 mmol·L-1;2)葡萄糖耐量试验显示,各组血糖均在15 min升高至峰值,之后Ⅰ组和Ⅳ组逐渐下降到注射前水平,V组血糖虽下降但未达到注射前水平,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅵ组持续保持高血糖水平;3)各组血常规指标均在正常生理范围内,Ⅲ组的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素(UREA)和肌酐(CREA)均超过正常生理范围;4)胰腺组织形态学显示,Ⅱ组和Ⅲ组的胰岛结构被明显破坏.综上所述,对犬使用30 mg·kg-1+50 mg·kg-1的链脲佐菌素和四氧嘧啶联合单次静脉注射,血糖值连续7 d大于15 mmol·L-1且未造成严重的肝肾毒性,可有效建立Ⅰ型糖尿病模型.

    链脲佐菌素四氧嘧啶犬动物模型糖尿病

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    GnIH过表达载体构建及其对小鼠睾丸间质细胞的作用研究

    汤亚茹阳美霞贾金美张虹亮...
    2969-2977页
    查看更多>>摘要：本试验通过构建GnIH过表达载体,探究其对小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞系)的凋亡效应及睾酮合成的调节作用.从6～8周雄性小鼠睾丸组织中提取RNA,反转录获得cDNA样本,利用PCR扩增并纯化GnIH基因,应用T4连接酶将其连入PLVX-IRES-ZsGreen1载体,进一步转化到感受态菌中,通过PCR、双酶切及测序鉴定后提取质粒.随后将构建好的重组质粒转染TM3细胞系72 h,分为空质粒组和GnIH过表达组,通过显微镜观察细胞荧光、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法、ELISA法和流式细胞术检测GnIH表达水平、细胞凋亡率及相关凋亡基因表达变化、睾酮分泌水平和睾酮合成酶基因表达水平.结果显示,GnIH扩增片段序列与参考序列一致,将GnIH过表达质粒转染至TM3细胞系72 h后,可见高强度绿色荧光,过表达组中GnIH基因水平极显著升高(P＜0.01),表明GnIH过表达载体构建成功且在TM3细胞系中高表达.转染72 h后,与空质粒组相比,过表达组中细胞凋亡率极显著升高(P＜0.01),凋亡基因P53和Bax/Bcl-2表达量比值也极显著升高(P＜0.01).与空质粒组相比,过表达组中睾酮浓度极显著降低(P＜0.01).与此同时,睾酮合成相关酶基因P450 sccmRNA表达量极显著降低(P＜0.01),StAR、3β-HSD和P450c17 mRNA表达量显著降低(P＜0.05),17 β-HSD mRNA表达量在两组间无显著性差异(P＞0.05).综上所述,在体外培养的TM3细胞中过表达GniIH能诱导TM3细胞凋亡、抑制睾酮分泌且降低睾酮合成相关酶的基因表达水平,推断GnIH在小鼠睾丸间质细胞生长和睾酮合成过程中发挥负调控作用.本研究可为揭示GnIH在雄性哺乳动物生殖调控过程中的作用提供科学理论依据.

    GnIH载体构建间质细胞细胞凋亡睾酮睾酮合成酶

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    表达绿色荧光蛋白重组猪塞内卡病毒的构建及初步应用

    张晓战杨磊邓同炜赵攀登...
    2978-2985页
    查看更多>>摘要：塞内卡病毒A(SVA)是新近发现的一种能够引起猪特发性水疱病及新生仔猪死亡为主要临床特征的病原微生物.该病呈世界性分布,给多个国家的养猪业造成了一定的经济损失.鉴于目前国内外尚无可用SVA商品化疫苗和抗病毒药物上市,本研究拟在实验室前期对SVA研究的基础上建立稳定表达绿色荧光蛋白报告基因的重组病毒,为体外高通量筛选具有抗SVA活性药物提供一种简单快速有效的工具.本研究在pEGFP-C1载体EGFP基因末端引入猪捷申病毒1型的2A基因,构建EGFP-P2A融合基因过度质粒,随后分别设计带有同源臂的克隆引物,通过同源重组技术将EGFP-P2A基因插入SVA毒株CH/HeN-2018基因组2A和2B基因间,并经测序鉴定,成功构建重组载体pSVA-EGFP.将pSVA-EGFP转染PK-15细胞,盲传至P2代,获得致使感染细胞病变明显、病变时间稳定的重组SVA荧光毒rCH/HeN-2018-EGFP.通过绿色荧光观察、RT-PCR和生长曲线测定,评估了重组毒株rCH/HeN-2018-EGFP和亲本毒株生长特性.并进一步通过药物细胞毒性试验和病毒感染试验对rCH/HeN-2018-EGFP作为潜在抗SVA药物筛选工具进行评价.结果表明,rCH/HeN-2018-EGFP与亲本毒株wtCH/HeN-2018和rCH/HeN-2018在PK-15细胞中具有相似的生长特性,且遗传稳定,在P10代能够稳定表达绿色荧光,插入的EGFP-P2A基因没有出现突变现象.抗SVA病毒感染试验结果表明,用终浓度20 μmol·L-1的姜黄素和110μmol·L-1黄芩苷预处理PK-15细胞2 h,通过观察荧光细胞的数量直观判断两种药物均能够抑制rCH/HeN-2018-EGFP在细胞中的复制,其中黄芩苷抑制效果极显著.随后在亲本毒株wtCH/HeN-2018感染试验进一步证实了黄芩苷对SVA病毒复制抑制的效果.本研究所构建的携带EGFP基因的重组SVA毒株能够高效稳定地表达绿色荧光蛋白,可以作为一种工具报告病毒应用于抗SVA药物和蛋白的筛选过程.

    塞内卡病毒反向遗传操作系统报告病毒绿色荧光蛋白抗病毒药物筛选

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    披针叶黄华内生真菌的分离与鉴定

    赵文星吴可欣郭梓豫张云昊...
    2986-2994页
    查看更多>>摘要：旨在探讨有毒植物披针叶黄华内生真菌种类与种群分布情况,本试验以采自青海的披针叶黄华为试验材料,用表面消毒法对样品消毒后进行内生真菌分离,结合形态学鉴定和5.8S rDNA-ITS序列分析对分离菌株进行种属鉴定,并应用MEGA7.0软件进行系统发育分析.结果显示,从披针叶黄华中共分离获得29种内生真菌,分属于7纲、9目、11科、12属.披针叶黄华内生真菌总相对分离频率为79.31％,其中,叶的内生真菌种类最多(41.38％),茎次之(37.93％),种子(13.79％)和根(6.90％)相对较少;根据系统发育分析,所有内生真菌分属于两大种群,种群间亲缘关系较近.综上表明,披针叶黄华内生真菌种类丰富,青霉属是优势菌属.

    披针叶黄华内生真菌分离鉴定系统发育分析青霉属

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