查看更多>>摘要:旨在探明胰岛素样生长因子 1(insulin-like growth factors 1,IGF1)、辅酶 Q10(coenzyme Q10,CoQ10)及褪黑素(melatonin,MT)联合添加对牛卵母细胞和胚胎发育以及热应激囊胚的影响.本研究于屠宰场采集牛离体卵巢,于实验室抽取卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs),在牛卵母细胞体外成熟(in vitro matu-ration,IVM)液及牛胚胎体外培养(in vitro culture,IVC)液中添加IGF1、CoQ10及MT,检测各添加方式对牛卵母细胞发育能力、牛卵母细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,△Ψm)的影响;在囊胚期施加41 ℃热应激,检测热应激及联合添加对牛IVF囊胚发育能力及凋亡水平的影响,并利用qRT-PCR检测囊胚中胚胎质量相关基因mRNA表达水平.各组试验均重复3次.结果表明,与未添加组(CT-0组)相比,联合添加IGF1、CoQ10及MT组(ICM组)卵母细胞成熟率((90.40±2.06)%vs.(65.41±0.63)%)、卵裂率((93.33±1.96)%vs.(59.77±2.93)%)及囊胚率((51.43±5.34)%vs.(26.92±3.24)%)均显著提高(P<0.05);ICM组牛卵母细胞ROS水平显著降低;△Ψm显著提高(P<0.05).与热应激组(HS组)相比,联合添加IGF1、CoQ10及MT(ICM+HS组)显著提高了囊胚扩张率((62.00±2.97)%vs.(30.77±8.66)%,P<0.05),抑制了热应激囊胚细胞凋亡,并提高了 IGFBP3、ATP1A1、DSC2及IFNT2的mRNA表达水平(P<0.05).综上表明,联合添加IGF1、CoQ10及MT有效提高牛卵母细胞发育能力,降低ROS水平,提高△Ψm.热应激降低牛囊胚扩张率,促进牛囊胚细胞凋亡,影响囊胚质量,而联合添加IGF1、CoQ10及MT缓解了热应激损伤.