查看更多>>摘要:目的 分析2013-2020年山东省潍坊市A(H1N1)pdm09流感病毒血凝素(HA)基因遗传进化特征,了解潍坊市A(H1N1)pdm09亚型变异情况,为及早发现新变异株以及精准防控提供科学依据.方法 收集2013-2020监测年度山东省潍坊市A(H1N1)pdm09流感病毒阳性样本,进行病毒分离,于阳性毒株中按年度共挑选18株流感毒株,采用二代测序方法获得HA基因序列信息后,使用RAxML软件,采用最大似然法(ML)构建系统进化树,使用BioEdit软件分析氨基酸位点变异情况,使用NetNGlyc 1.0 Server在线软件进行HA糖基化位点分析,使用datamonkey在线软件进行选择性压力分析,选用模型为单似然祖先计数(SLAC)模型、固定效应似然(FEL)模型.结果 潍坊市18株A(H1N1)pdm09亚型分离株HA基因分属于6B、6B.1、6B.2等分支,大部分毒株(17/18)与对应年份疫苗株分属相同分支,且与对应年份疫苗株相比,HA基因序列的核苷酸同源性均>97.3%.氨基酸序列分析显示,HA蛋白有12~22个氨基酸突变不等,且均发生了位于抗原决定簇的突变,包括Sa区L161I、S162N、K163Q、S164T位,Sb区S185T、T185I位,Ca区H138Y、S203T位及Cb区S74R位,83.3%病毒发生了两个及以上抗原决定性突变;发现位于受体结合部位220环的Q223R突变及受体结合部位附近的S183P和I216T突变;自2016年开始潍坊分离株的糖基化位点改变较为频繁,包括11NSTD缺失、162NQSY增加,变异糖基化位点162NQTY增加及162NQTY缺失.选择性压力分析显示,dN/dS值分别为0.65与0.279,均未发现正向选择性压力位点.结论 2013-2020年山东省潍坊市A(H1N1)pdm09流感病毒HA基因总体与当年疫苗株比较接近,但HA基因及其编码氨基酸仍存在持续变异,需加强监测.