查看更多>>摘要:为探索控制弯曲菌污染的新途径,以弯曲菌NCTC12662 为宿主菌,从养殖场鸡粪便中分离纯化得到弯曲菌噬菌体,并对其进行电镜形态特征观察、生物学特性测定与基因组学分析,同时采用棋盘法,测试噬菌体与抗生素的联合应用效果.结果显示,从山东省胶东地区养鸡场粪便中分离到 1 株噬菌体P-61.透射电镜下显示该噬菌体颗粒具有 1 个直径约为 102.6 nm的二十面体头部和 1 个长度约为 112.9 nm的长尾部,属于有尾噬菌体目,长尾噬菌体科;裂解谱为 48.48%,裂解效价为 5.5×1011 pfu/mL,感染复数为 0.01;一步生长曲线显示潜伏期为 20 min,裂解期约为 130 min,裂解量为 240 pfu/cell;最适宜生长温度为 42℃,pH耐受性较强,在pH 5~9 范围内效价较稳定.噬菌体基因组全长为130 425 bp,G+C含量为26.13%,共有176个开放阅读框、3 个tRNA,软件预测基因组中不含毒力基因和抗生素耐药基因.利用棋盘法测得,当噬菌体为 106 pfu/mL时,环丙沙星最低浓度降至1/8 MIC,联合用药组具有明显的联合杀菌效果.综上可知,得到的噬菌体P-61 具有效价高、裂解谱宽及对环境适应能力强等生物学特性,且基因组信息清晰,能与抗生素联合应用发挥协同作用,具有消毒、净化等临床应用可能性.本研究为噬菌体制剂的开发利用提供了生物资源.