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期刊信息/Journal information
中国动物传染病学报
中国农业科学院上海兽医研究所
中国动物传染病学报

中国农业科学院上海兽医研究所

黄光志

双月刊

1674-6422

bianjibu@shvri.ac.cn

021-34293142

200241

上海市闵行区紫月路518号

中国动物传染病学报/Journal Chinese Journal of Veterinary Parasitology北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由农业部中国农科院上海家畜寄生虫病研究所主办，农业部农业预防办公室协办的全国唯一的兽医寄生虫学专业杂志。
正式出版
收录年代

    六种布鲁菌病疫苗对绵羊与山羊免疫效果的比较

    李鑫徐文涛吉雅图段丽萍...
    88-95页
    查看更多>>摘要：为了比较不同布鲁菌病疫苗对乌拉特草原以放牧为主的山羊与绵羊的免疫效果，我们在乌拉特草原6个苏木/镇，随机选取80～100日龄并经过布鲁菌病检测阴性的乌拉特土种绵羊羔385只、二狼山绒山羊羔275只，用6种布鲁菌病疫苗进行免疫效果比对试验。采用琥红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)分别对试验组羊接种疫苗后7、14、21、35、60、120、150、180、210、240、270 d进行转阳率和抗体效价检测;免疫后270 d进行攻毒试验。RBPT和SAT结果显示，M5-90Δ26和S2接种绵羊与山羊后抗体产生快，持续时间长;免疫后攻毒试验结果显示，A19点眼绵羊和A19-ΔVirB12株皮下注射绵羊保护比例均为4/6;M5-90Δ26绵羊皮下注射和ReV1山羊点眼的保护比例均为4/5;本试验为乌拉特草原建立牛羊免疫无布鲁菌病区筛选理想疫苗，以及为创建全国首个牛羊免疫无布鲁菌病区制定合理的免疫程序提供了科学依据，同时对布鲁菌病疫苗的研制及国内其他地区布鲁菌病防治具有参考价值和指导作用。

    布菌病疫苗免疫效果比较

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    免疫鸡血清新城疫病毒抗体水平与攻毒保护效果的相关性研究

    沈欣悦刘梅李建梅俞燕...
    96-103页
    查看更多>>摘要：为了明确不同血清新城疫病毒(NDV)抗体水平对鸡的保护效果，本研究采用重组NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)对鸡进行免疫，通过交叉血凝抑制(HI)试验比较A-Ⅶ株与La Sota株间的血清学差异，并采用NDV标准强毒株F48E8和基因Ⅶ型强毒株JSC0804对不同抗体水平免疫鸡进行了攻毒保护试验。结果显示:抗A-Ⅶ株血清用A-Ⅶ株抗原测得的平均HI抗体效价显著高于La Sota株抗原(P＜0。01)，约高1。51og2，而抗La Sota株血清用La Sota株抗原测得的平均HI抗体效价稍高于A-Ⅶ株抗原，但无显著差异(P＞0。05)，表明2种疫苗株存在一定的血清学差异。在试验条件下，所有免疫鸡经点眼滴鼻攻毒后均未表现明显临床症状，但存在不同程度的排毒现象，排毒率总体上随抗体效价升高呈逐渐下降趋势。A-Ⅶ株疫苗免疫鸡血清HI抗体效价分别达＞131og2和＞141og2时可完全阻止F48E8株和JSC0804株排毒。免疫鸡排毒一般仅限于攻毒后5 d内。本研究阐明了免疫鸡的抗体水平和免疫保护效果的相关性，为新城疫免疫控制提供了依据。

    新城疫重组新城疫病毒灭活疫苗(A-Ⅶ株)抗体效价保护效果排毒相关性

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    实时荧光定量PCR检测鸭源鹅细小病毒方法的建立与应用

    杨挺懿杨婧黄欣梅韩凯凯...
    104-109页
    查看更多>>摘要：为建立一种快速且准确检测鸭源鹅细小病毒(D-GPV)的实时荧光定量PCR方法，本研究通过分析D-GPV基因序列的保守区设计并合成一对特异性引物，构建携带NS1基因的重组质粒作为标准品，绘制实时荧光定量PCR标准曲线，并进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品的检测。结果显示，该方法标准曲线的的线性关系良好，相关系数为0。999;灵敏度高，检测底限为10拷贝;特异性与重复性好，与其他病毒无交叉反应，批间和批内变异系数均低于1％。该方法对人工感染D-GPV鸭泄殖腔拭子和咽拭子样品的检测结果显示，鸭在攻毒后第1d即可以通过口腔和泄殖腔向外排毒，排毒量在第3d达到高峰，排毒持续期可达到42d。本研究所建立的实时荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性和稳定性好，可用于临床样品中的D-GPV检测。

    鸭源鹅细小病毒实时荧光定量PCR排毒

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    羊泰勒虫与嗜吞噬细胞无浆体双重PCR检测方法的建立

    宁宇春王圆赫郭祥杰朱宏阳...
    110-114页
    查看更多>>摘要：为建立一种能快速对羊泰勒虫(ovine and caprine theileria)和嗜吞噬细胞无浆体(A。phagocytoph-ilum)同时进行检测的双重PCR方法。根据GenBank已报道的羊泰勒虫MPSP基因和羊嗜吞噬细胞无浆体16S rRNA基因设计合成了2对特异性引物，通过条件优化，建立了双重PCR检测方法。双重PCR可特异扩增出羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体目的条带，片段大小分别为875 bp和394 bp。该方法具有较好的特异性，对羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体的最低检出浓度为16 fg/μL和1 fg/μL。对采集的60份血液样本进行双重PCR检测，羊泰勒虫阳性率为46。67％(28/60)，嗜吞噬细胞无浆体阳性率为13。33％(8/60)，混合感染率为10％(6/60)。结果表明，双重PCR方法可用于羊泰勒虫和嗜吞噬细胞无浆体的快速诊断和流行病学调查。

    双重PCR羊泰勒虫嗜吞噬细胞无浆体主要表面蛋白16SrRNA

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    抗PCV4 Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

    徐鹏吉卫龙伊立超张爽...
    115-121页
    查看更多>>摘要：为建立可应用于猪圆环病毒4型(PCV4)候选疫苗特异性抗体检测与评价方法，本研究应用PCV4 Cap蛋白作为抗原，以PCV4多克隆兔源抗体作为一抗，优化各反应的最佳条件并建立了针对PCV4 Cap蛋白抗体的间接ELISA方法。最佳条件为2 μg/mL PCV4 Cap纯化蛋白，4℃包被过夜，5％脱脂乳封闭60 min，待检血清稀释比例为1:800，反应条件为37℃、45 min，酶标抗体稀释比例为1:5000，反应条件为37℃、60min，底物显色时间为10min，Cutoff值为0。157，灵敏度可达102 400倍。成功建立的抗PCV4 Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性、重复性和特异性。可为检测PCV4候选疫苗的特异性抗体水平提供一种精准、高效的方法。

    猪圆环病毒4型免疫效果检测间接ELISA方法

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    尼帕病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法建立

    孙彤孙竹筠刘静宜王培培...
    122-128页
    查看更多>>摘要：尼帕病毒病是一种人畜共患烈性传染病，为能够快速特异检测该病毒，本研究根据尼帕病毒(NiV)N基因序列保守区设计特异性引物和探针，建立一种针对NiV的TaqMan探针荧光定量PCR(qPCR)检测方法，该方法特异性好、敏感性高、稳定性强，可鉴别NiV与其他猪病病毒，扩增效率为102％，最低检测限14。8 copies/μL，敏感性高于常规PCR 10倍，该检测方法的建立可为NiV的快速检测提供技术手段，对促进猪类养殖业的健康发展具有重要意义。

    尼帕病毒N基因TaqMan探针实时荧光定量PCR

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    犬弓形虫巢式PCR检测方法的建立及初步应用

    柳方远李双星印春生吉婧...
    129-134页
    查看更多>>摘要：弓形虫病是一种重要的人兽共患病，犬是弓形虫重要的中间宿主，有必要建立一种快速、灵敏的犬弓形虫病检测方法。根据GenBank中弓形虫529 bp基因重复序列设计巢式PCR引物，通过优化反应条件建立巢式PCR检测方法。特异性试验结果显示，该方法对牛巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬新孢子虫的基因扩增无条带;灵敏度试验结果显示，该方法最低可以检出0。134 pg的弓形虫基因，比目前国标PCR方法高100倍。对感染弓形虫犬的组织样品检测发现，巢式PCR能在感染犬的不同组织中检测出弓形虫基因。建立的犬弓形虫巢式PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，为该病的检测奠定了基础。

    弓形虫巢式PCR犬

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    H1-SIV、H3-SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV多重PCR检测方法的建立及应用

    徐毅余良政林霜任同伟...
    135-141页
    查看更多>>摘要：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染肺泡巨噬细胞，严重损害免疫系统，导致与其他病毒共感染现象，其中猪流感病毒(SIV)也是病原之一。为了快速检测和区分PRRSV基因型与SIV亚型，本研究针对H1、H3亚型SIV的HA基因和美洲型、欧洲型PRRSV的N、M基因的保守序列，分别设计了4对特异性扩增引物，在引物浓度、退火温度等反应条件的系统优化下，分别对其特异性和敏感性进行验证，建立了能够快速检测以上4种病原的多重PCR方法，并对155份临床样品进行了检测。结果显示，该检测方法特异性好、灵敏度高，对H1-SIV、H3-SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV的最低检出量均低至9。86 × 100 copies/μL。以单一PCR方法对所有临床样品进行检测后发现，检测结果与多重PCR检测结果一致，证明这种多重PCR方法可以用于这4种病毒的快速检测与分型鉴定。

    猪流感病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒多重PCR

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    34株鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及部分耐药基因调查分析

    张燕董洪燕于圣青杨静静...
    142-149页
    查看更多>>摘要：为更好的指导养殖场鸭疫里默氏杆菌病临床用药以及探究该菌多重耐药机制，本研究对安徽地区患病鸭采样、细菌分离鉴定后，进行生化鉴定、药敏试验，再根据药敏结果进行氨基糖苷类耐药基因以及Ⅰ类整合子鉴定。药敏试验结果表明该地区34株鸭疫里默氏杆菌分离株对头孢拉定、头孢曲松、氟苯尼考、大观霉素、磺胺异恶唑等抗生素较敏感，对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那、链霉素、阿奇霉素等抗生素均有较强的耐药性;其中有97％的菌株存在多重耐药现象，最高可耐19种抗生素。15种氨基糖苷类耐药基因鉴定结果表明aac(6')Ⅰb基因、aac(6')Ⅱ基因、rmtC基因、aph(3')Ⅱa基因检出率分别为94。1％(32/34)、82。4％(28/34)、73。5％(25/34)、70。6％(24/34)，其余基因均未检测到;同时34株分离株均携带Ⅰ类整合子，大小为1 kb，其基因盒种类为aadA1(链霉素耐药基因);其氨基糖苷类耐药表型和耐药基因符合率大于69％。因此，安徽地区鸭疫里默氏杆菌分离株多重耐药性严重，需加强对抗生素的用药规范性，特别要注意氨基糖苷类药物使用。

    鸭疫里默氏杆菌病药敏试验耐药基因Ⅰ型整合子

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    PRRSV GP4蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

    郭昊乌东高娃赵洪哲刘春羽...
    150-156页
    查看更多>>摘要：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来巨大经济损失，尽快建立该病毒的快速诊断方法 尤为重要。PRRSV ORF4基因编码的结构蛋白GP4为病毒感染所必须。本研究为制备GP4单克隆抗体，选取ORF4优势序列优化合成，连入pET-32a原核表达载体，构建重组质粒pET-32a-ORF4;经双酶切验证后，转化至BL21(DE3)感受态细胞，IPTG诱导表达并纯化;经SDS-PAGE及Western blot鉴定成功后免疫小鼠，制备筛选单克隆抗体，对制备的单克隆抗体进行验证。结果 表明，GP4蛋白以可溶形式表达，大小为30 kDa;纯化蛋白免疫小鼠后，共筛选4株IgG亚型阳性杂交瘤细胞株;所制备单克隆抗体可与抗原特异性结合。本研究为PRRSV诊断方法 的建立及后续研究奠定了基础。

    猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白原核表达单克隆抗体

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