查看更多>>摘要:目的:通过沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/人叉头蛋白O3A(fork-head box protein O3A,FOXO3A)信号通路探究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脑血管内皮细胞自噬和凋亡的作用.方法:体内实验采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将SD大鼠随机分为Sham组、MCAO组、MCAO+HSYA组;体外实验采用糖氧剥夺(oxygen-glucose depri-vation,OGD)模型,将细胞随机分为Normal组、OGD组、OGD+HSYA组、OGD+EX-527组、OGD+EX-527+HSYA组.采用Z-Longa法、TTC染色、TUNEL染色、流式细胞术、免疫荧光、Wester blot及RT-qPCR等方法检测相关指标.结果:体内实验结果显示,与Sham组相比,MCAO组大鼠神经功能评分、脑梗死面积增加,泛素结合蛋白P62,SIRT1,FOXO3A蛋白表达降低,细胞凋亡数、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associat-ed protein1 light chain3,LC3)蛋白和荧光斑点数增加(P<0.05);与MCAO组相比,MCAO+HSYA组大鼠神经功能评分、梗死面积显著降低,P62蛋白表达及细胞凋亡数降低,LC3,SIRT1,FOXO3A蛋白及LC3荧光斑点数表达增加(P<0.05).体外实验结果显示,与Normal组相比,OGD组P62,SIRT1,FOXO3A mRNA和蛋白表达降低,细胞凋亡率、LC3 mRNA、蛋白和荧光斑点数增加(P<0.05);与OGD组相比,OGD+HSYA组细胞凋亡率、P62 mRNA和蛋白表达均降低,LC3,SIRT1,FOXO3A mRNA和蛋白及LC3荧光斑点数表达增加(P<0.05);与OGD+EX-527组相比,OGD+EX-527+HSYA组P62 mRNA、蛋白表达水平和细胞凋亡率降低,LC3,SIRT1,FOXO3A mRNA和蛋白及LC3荧光斑点数表达增加(P<0.05).结论:HSYA通过激活SIRT1/FOXO3 A信号通路激活脑血管内皮细胞自噬,减轻脑血管内皮细胞凋亡.