查看更多>>摘要:目的:探讨水苏碱(STA)在脓毒血症诱导的急性肾损伤(AKI)中的作用及潜在机制,为临床疾病治疗提供新思路.方法:细胞水平上,在人肾上皮细胞系HEK293中给予脂多糖(LPS)、STA处理,采用蛋白质免疫印迹法、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫荧光、活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞ROS水平、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)及自噬标志物LC3B Ⅱ、LC3B Ⅰ、p62的表达水平,同时检测腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPKα/AMPKα)和沉寂信息调节因子(SIRT1)的蛋白水平.动物水平上,采用C57BL/6雄性小鼠经腹腔注射LPS构建脓毒血症诱导的AKI模型,治疗组小鼠于LPS注射前7 d开始,每日给予30 mg/kg STA灌胃,通过苏木精-伊红(HE)染色、蛋白质免疫印迹、RT-qPCR检测肾脏组织炎症因子水平、自噬标志物水平及AMPK/SIRT1信号通路激活情况.结果:细胞水平上,LPS处理后HEK293细胞中的ROS显著增多,炎症因子TNFα、IL-1β和IL-6的水平显著提高,LC3BⅡ/LC3B Ⅰ比值下降,p62蛋白水平上调,p-AMPKα和SIRT1蛋白水平降低(P<0.05),给予STA处理后,降低了 LPS诱导的细胞中ROS及炎症因子水平,LC3BⅡ/LC3B Ⅰ比值上升、p62水平下降,p-AMPKα和SIRT1表达水平显著升高(P<0.05).动物水平上,蛋白质免疫印迹及RT-qPCR结果显示,LPS诱导的小鼠肾脏组织中炎症因子TNFα、IL-1β和IL-6水平升高,LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ、p-AMPKα/AMPKα、SIRT1蛋白水平降低,p62水平升高;STA+LPS组小鼠肾脏组织炎症因子水平表达降低,LC3BⅡ/LC3B Ⅰ、p-AMPKα/AMPKα、SIRT1表达升高,p62表达下降(P<0.05).结论:STA通过激活AMPK/SIRT1信号通路促进细胞自噬,缓解脓毒血症诱导的急性肾损伤.