查看更多>>摘要:考察马钱子水提物(aqueous extract of Strychni Semen,SA)对Ⅱ型胶原诱导型关节炎(type Ⅱ collagen-induced arthri-tis,CIA)大鼠骨破坏的作用机制.将SD大鼠随机分为正常组,模型组,SA低、中、高剂量组(2.85、5.70、11.40 mg·kg-1),甲氨蝶呤组.除正常组外,其他各组均制备CIA模型.二次免疫后,SA低、中、高剂量组给予不同剂量的SA,每日 1 次,甲氨蝶呤组每 3 d给药1 次,正常组和模型组给予0.3%羟甲基纤维素钠(CMC-Na),连续28 d.每3 d进行关节炎临床评分.采用微计算机断层扫描技术(micro computed tomography,Micro-CT)评价骨破坏.通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色以及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色评价CIA大鼠关节组织病理学变化及破骨细胞数量.免疫组织化学法检测大鼠关节组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达.免疫蛋白印记法检测大鼠关节组织中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(pro-tein kinase B,Akt)信号通路关键蛋白的表达.结果显示,SA各剂量均能不同程度地改善CIA大鼠炎症关节的红、肿和关节畸形,降低临床评分,抑制滑膜炎症、血管翳、软骨侵蚀和骨破坏,并减少骨组织中TRAP阳性细胞数;Micro-CT结果显示SA能够升高骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量,并降低骨表面体积比和骨小梁分离度.SA各剂量均能不同程度下调IL-1β、p-JNK、p-ERK、p-p38、PI3K、p-Akt蛋白表达水平.综上,SA能够改善CIA大鼠的疾病严重程度,减轻关节组织病理学和影像学改变,具有骨保护作用,其作用机制可能与抑制MAPK、PI3K/Akt信号通路过度活化有关.