查看更多>>摘要:目的 探讨脑络欣通方通过p38 MAPK-mTOR信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元自噬及血脑屏障通透性的影响.方法 将60只大鼠分为假手术组、模型组、脑络欣通方低、中及高剂量组及尼莫地平组,每组各10只;除假手术组外均建立大脑中动脉闭塞动物模型,假手术组仅将栓塞线插入不结扎;建模成功后脑络欣通方低、中及高剂量组分别灌胃40、80及120 mg/mL的脑络欣通方溶液(1 mL·100 g-1·d-1),尼莫地平组灌胃40 mg/kg尼莫地平溶液;假手术组及模型组灌胃等体积的生理盐水;神经功能缺损量表(Modi-fied neurological severity score,mNSS)评估神经功能评分;伊文思蓝(Ethedium bromide,EB)检测血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)功能;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucle-otidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测神经元凋亡率;免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3B(Microtubule-associatedprotein1 lightchain3,LC3B)表达水平;免疫印迹检测裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶 p38 抗体(Phosphorylation P38 mitogen activa-ted protein kinase,P-p38 MAPK)、雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)及 p-mTOR 蛋白水平.结果 干预第7及14 d与模型组比较,脑络欣通方低、中及高剂量组mNSS评分均降低(P<0.05);脑络欣通方高剂量组mNSS评分低于脑络欣通方中剂量组(P<0.05),但脑络欣通方低剂量与中剂量组mNSS评分,脑络欣通方高剂量组与尼莫地平组比较均无明显差异(P>0.05);与假手术组比较,模型组EB水平升高(P<0.05);与脑络欣通方低剂量组比较,脑络欣通方中及高剂量组脑组织EB水平均降低,且脑络欣通方各剂量组之间存在差异(P<0.05),但脑络欣通方低剂量与中剂量组mNSS评分,脑络欣通方高剂量组与尼莫地平组比较均无明显差异(P>0.05);与假手术组比较,模型组神经元凋亡率、LC3B表达、p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白水平均升高,mTOR及p-mTOR蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,脑络欣通方低、中及高剂量组神经元凋亡率、LC3B表达、p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白水平均降低,mTOR及p-mTOR蛋白水平升高,且脑络欣通方各剂量组之间存在差异(P<0.05),但脑络欣通方高剂量组与尼莫地平组比较无明显差异(P>0.05).结论 脑络欣通方可减少缺血性脑卒中模型大鼠神经元凋亡及自噬,改善血脑屏障通透性,其机制可能与抑制p38 MAPK,激活mTOR有关,且高剂量效果最佳.