查看更多>>摘要：柯萨奇病毒B3(CoxsackievirusB3,CVB3)是病毒性心肌炎最常见的致病毒株,CVB3感染诱导心肌细胞损伤的作用与激活内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)有关.薯蓣皂素(Diosgenin,DG)通过抑制ERS减轻心肌细胞缺氧损伤,但DG对CVB3感染诱导心肌细胞损伤的保护作用及机制尚不清楚.因此,本研究将分析DG通过抑制ERS对CVB3诱导心肌细胞损伤的影响及机制.培养心肌H9c2细胞并分组,对照组用不含药物和病毒的培养基处理,模型组用含有CVB3的培养基处理,不同浓度DG用含有10、20、40 mg/L DG及CVB3的培养基处理,溶剂对照组用含有对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)的培养基处理,溶剂+模型组用含有DMSO和CVB3的培养基处理,溶剂+DG组用含有DMSO、CVB3及40 mg/L DG的培养基处理,激动剂组用含有ERS激动剂、CVB3及40 mg/L DG的培养基处理.检测培养基中乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(Creatinc kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(Creatine Kinase isoenzymeMB,CKMB)的含量,细胞活力A490,细胞凋亡率,细胞中ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白 78(Glucoseregulated protein 78,GRP7)、C/EBP 同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、磷酸化 cJun 氨基末端激酶(Phosphorylation cJun nterminal kinase,pJNK)、裂解型 caspase 12 的表达.结果显示,与对照组比较,模型组培养基中LDH、CK、CKMB的含量、细胞凋亡率、细胞中GRP78、CHOP、pJNK、裂解型caspase12的表达水平增加,细胞活力A490降低;与模型组比较,不同浓度DG组培养基中LDH、CK、CKMB的含量、细胞凋亡率、细胞中GRP78、CHOP、pJNK、裂解型caspase12的表达水平降低,细胞活力A490增加且DG浓度越高,上述变化越显著;与溶剂+DG组比较,激动剂+DG组培养基中LDH、CK、CKMB的含量、细胞凋亡率、细胞中GRP78、CHOP、pJNK、裂解型caspase12的表达水平增加,细胞活力A490降低.以上结果表明,DG能够减轻CVB3诱导心肌细胞损伤及凋亡,抑制ERS是可能相关的分子机制.
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