查看更多>>摘要:目的:探究柚皮苷在卵巢癌中的抗肿瘤活性并评估其潜在信号传导机制.方法:⑴将雌性Balb/c裸鼠随机分为6组:阴性对照组(PBS溶液)、0.5 mg·kg-1柚皮苷组(柚皮苷0.5 mg·kg-1)、1.0 mg·kg-1柚皮苷组(柚皮苷1.0 mg·kg-1)、2.0 mg·kg-1 柚皮苷组(柚皮苷2.0 mg·kg-1)、阳性对照组(顺铂25.0 mg·kg-1)、联合用药组(顺铂25.0 mg·kg-1、柚皮苷2.0 mg·kg-1),取对数生长期的SKOV3细胞皮下注射Balb/c裸鼠,当肿瘤大小达到50 mm3时,按照分组情况在腹膜内注射相应试剂.给药10 d后处死并切除小鼠整个肿瘤,测量肿瘤大小及体积并通过RT-PCR检测各组肿瘤凋亡相关基因mRNA的表达.⑵将SKOV3细胞随机分为4组:阴性对照组(PBS溶液)、10 µmol·L-1柚皮苷组、20 µmol·L-1柚皮苷组、40 µmol·L-1柚皮苷组.ELISA检测各组相关蛋白表达.⑶取对数生长期SKOV3细胞,以每孔2×105个细胞接种于6孔板中.将SKOV3细胞随机分8组:空白对照组(不导入质粒及siRNA)、空质粒对照组、siRNA对照组、NF-κB过表达组、NF-κB siRNA组、P38MAPK过表达组、P38MAPK siRNA组、PKC抑制剂组.RT-PCR检测各组细胞P-gp和ERK mRNA表达.⑷对NF-κB过表达组和P38MAPK过表达组SKOV3细胞进行柚皮苷干预,测量各组细胞P-gp和ERK mRNA表达.结果:⑴给药10 d后,肿瘤体积及重量由大到小依次为阴性对照组、0.5 mg·kg-1柚皮苷组、1.0 mg·kg-1柚皮苷组、2.0 mg·kg-1柚皮苷组、阳性对照组、联合用药组,且与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).⑵与阴性对照组相比,2.0 mg·kg-1柚皮苷组、阳性对照组、联合用药组Caspase-3和Caspase-7 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组相比,0.5 mg·kg-1柚皮苷组、1.0 mg·kg-1柚皮苷组、2.0 mg·kg-1柚皮苷组、阳性对照组、联合用药组Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组相比,2.0 mg·kg-1柚皮苷组、阳性对照组、联合用药组Cyclin D1、C-Myc和Survivin mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).⑶与阴性对照组相比,40 µmol·L-1柚皮苷组PKC、P38MAPK、ERK、NF-κB、P-gp、COX-2蛋白表达降低,Caspase-3和Caspase-7蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).⑷与空白对照组相比,空质粒及siRNA对照组的ERK和P-gp mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),P38MAPK过表达组ERK mRNA表达增加,P38MAPK siRNA组及PKC抑制剂组ERK mRNA表达降低,NF-κB过表达组P-gp mRNA表达增加,NF-κB siRNA组及P-gp mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).⑸与空质粒组比较,柚皮苷+P38MAPK过表达组PKC、ERK、COX-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05),P38MAPK mRNA无明显差异;柚皮苷+NF-κB过表达组PKC、NF-κB、P-gp表达降低,Caspase-3、Caspase-7表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:柚皮苷能够通过抑制PKC所介导的不同信号路径调控卵巢癌细胞凋亡与生长,并具有剂量依赖性.