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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年,由中华人民共和国教育部主管,中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办,是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士,著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果;刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    A型多杀性巴氏杆菌感染后小鼠肾脏组织转录组分析

    刘志勇程逸文黄惠娴蒋俊明...
    1559-1570页
    查看更多>>摘要:巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)引起的人畜共患病,对畜牧经济发展造成严重影响,然而目前Pm的具体感染致病机制尚不完全清楚.为了研究Pm感染宿主肾脏组织所引起的免疫变化,探究Pm对宿主的感染机制,本研究利用腹腔感染建立羊源A型多杀性巴氏杆菌(HN02菌株)感染小鼠(Mus musculus)的模型,收集其肾脏组织进行转录组测序.转录组分析结果显示,共有3836个基因差异表达,其中1741个差异表达基因显著上调,1426个差异表达基因显著下调;基因本体论(Gene Ontology,GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)注释发现,Pm感染肾脏组织过程中差异表达基因主要富集于跨膜转运蛋白活性、线粒体、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、人类乳突病毒(Human papillomavirus,HPV)感染和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路等信号传导、能量代谢和免疫应答过程;免疫相关信号通路关联分析后发现,其中部分基因同时参与不同的信号通路,选取v-rel网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物A(v-rel avian reticuloendotheliosis viral oncogene homolog A,ReLA)、B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子α(nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor alpha,NFKBIA)、肿瘤坏死因子受体超家族成员1A(tumor necrosis factor receptor superfamily,member 1A,TNFRSF1A)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和磷酸肌醇3激酶调节亚基3(phosphoinositide-3-kinase,regulatory subunit 3,PIK3R3)等基因进行qRT-PCR验证,结果表明,这些基因的表达趋势和测序结果一致.本研究初步证明了小鼠肾脏在抵抗Pm感染过程中有一系列免疫反应参与,其中先天性免疫在肾脏组织抗Pm感染过程中发挥着重要作用,该结果为进一步研究Pm与宿主互作机制提供了数据支持.

    A型多杀性巴氏杆菌转录组分析肾脏免疫应答

    精胺对雌鹅空肠、回肠多胺代谢关键基因的表达及多胺水平的影响

    易治鑫蒋易龙李林祥姜冬梅...
    1571-1579页
    查看更多>>摘要:精胺能促进肠道黏膜损伤修复,提高肠道消化酶活性,调节肠道多胺稳态和肠道功能.为研究精胺对鹅(Anser cygnoides)空肠和回肠多胺代谢关键基因表达及多胺水平的影响,用5和10 mg/kg精胺灌胃成年四川白鹅雌鹅,运用qPCR分析鹅空肠和回肠组织中多胺代谢关键基因表达量,高效液相色谱法检测空肠和回肠组织多胺含量.结果表明,5 mg/kg精胺处理组雌鹅空肠组织鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制剂2(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor 2,AZIN2)、鸟氨酸脱羧酶抗酶1(ornithine decarboxylase antizyme,OAZ1)和OAZ2基因表达量以及亚精胺和精胺含量显著高于对照组(P<0.05),而AZIN1和乙酰多胺氧化酶(acetylpolyamine oxidase,APAO)基因表达量显著低于对照组(P<0.05);5 mg/kg精胺处理组雌鹅回肠组织AZIN2和精胺合成酶(spermine synthase,SPMS)基因表达量显著高于对照组(P<0.05),而亚精胺/精胺N'-乙酰转移酶(spermidine/spermine-N'-acetyltransferase,SSAT)基因表达量显著降低(P<0.05);10 mg/kg精胺组雌鹅空肠组织AZIN2、OAZ2、鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)、APAO和精胺氧化酶(spermine oxidase,SMO)表达量以及精胺含量显著高于对照组(P<0.05),而亚精胺合成酶(spermidine synthase,SPDS)表达量和腐胺含量显著降低(P<0.05);10 mg/kg精胺能显著上调雌鹅回肠AZIN2、ODC、SPDS和APAO表达(P<0.05),并显著降低腐胺含量(P<0.05).本研究结果表明,外源性精胺可介导雌鹅小肠组织多胺代谢基因表达,参与调控小肠组织多胺稳态,且精胺对雌鹅空肠和回肠组织多胺稳态的影响程度存在一定差异,为研究鹅小肠多胺代谢功能提供了基础数据.

    精胺空肠回肠基因表达

    复方中草药对虹鳟脾脏非特异性免疫指标及免疫相关基因表达的影响

    潘玉财黄进强李永娟吴深基...
    1580-1593页
    查看更多>>摘要:中草药具有丰富的活性物质,具有提高机体免疫力、抗病及无残留等特性,已在水产养殖中被广泛应用.为探讨饲料中添加不同水平的复方中草药(黄芪(Astragalus radix),党参(Codonopsis pilosula),当归(Angelica sinensis),甘草(Glycyrrhiza uralensis),麦冬(Ophiopogon japonicus),茯苓(Poria cocos),山楂(Hawthorn),金银花(Lonicera japonica),板蓝根(Isatidis radix)和大青叶(Isatis indigotica Fortune))对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)脾脏非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响,本研究选取120尾虹鳟为实验对象,随机分为4组,分别在基础饲料中添加0(对照组)、10、20和30 g/kg复方中草药连续投喂35 d.在投喂第7、21和35 d时取脾脏组织用于非特异性免疫指标的测定,并利用qPCR分析虹鳟脾脏中15个免疫相关基因的表达差异.结果显示,与对照组相比,在投喂的3个时期复方中草药均能显著提高虹鳟脾脏中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、溶菌酶(lysozyme,LZM)及酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)的活性(P<0.05),其中以20 g/kg组效果最佳;与对照组相比,10、20和30 g/kg组丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量均在投喂的3个时期显著下降(P<0.05),且30 g/kg组效果最佳.基因表达结果显示,与对照组相比,投喂第35 d时,20 g/kg组能显著诱导脾脏中Toll样受体3(Toll-like receptor 3,tlr3)、Toll样受体7(tlr7)、髓样分化因子88(medullary differentiation factor 88,myd88)、白细胞介素1β(interleukin-1β,il-1β)和细胞核因子κB抑制剂α(nuclear factor kappa B inhibitor alpha,nfkbia)基因的表达(P<0.05);各处理组肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,tnf-α)基因表达差异不显著,Toll样受体8(tlr8)在30 g/kg组显著上调(P<0.05);同时,免疫相关基因干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,irf3)、干扰素调节因子7(irf7)、黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5,mda5)、RIG-I样受体2(RIG-I-like receptor 2,lgp2)、白细胞介素8(il-8)、干扰素β(interferon-β,ifn-β)、信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,stat1)和janus激酶1(janus kinase 1,jak1)表达量也在20 g/kg组中显著上调(P<0.05).本研究表明,该复方中草药可以增强虹鳟非特异性免疫能力和免疫相关基因的表达,且饲料中复方中草药建议添加量为20 g/kg.本研究为促进复方中草药作为免疫刺激剂在水产养殖中的合理应用及发展提供了科学依据.

    虹鳟复方中草药非特异性免疫免疫相关基因表达

    番茄灰霉病生防内生细菌BR-1的筛选鉴定及其生防性能分析

    李腊史洪丽余婷婷刘庆...
    1594-1605页
    查看更多>>摘要:筛选对番茄(Solanum lycopersicum)灰霉病具有优秀拮抗作用的内生细菌对防治灰霉病、提高番茄产量及降低采后番茄损失具有重要作用.本研究采用LB培养基培养结合梯度稀释法从百部(Stemona japonica)块根组织分离出内生细菌,通过平板对峙法筛选出对灰霉菌(即灰葡萄孢菌,Botrytis cinerea)具有良好拮抗作用的菌株;根据形态特征、生理生化和16S rDNA序列分析,对拮抗菌株进行鉴定;通过平板对扣法测定拮抗菌株挥发物的抑菌能力;采用果实刺伤接种法分析拮抗菌株对灰霉病的防治效果及其在番茄果实上的定殖能力;通过种子萌发实验测定种子萌发率、根长、芽长,评估拮抗菌株对番茄的促生效果.结果显示,成功筛选获得1株具有固氮、溶磷效果的菌株BR-1,鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli);平板对峙和刺伤接种实验结果一致表明,BR-1菌株能够通过抑制菌丝生长而显著抑制灰霉菌扩增,其平板抑菌率达到73.38%,进一步分析发现BR-1菌株挥发物呈现显著抑菌活性;广谱抑菌实验表明,BR-1菌株对串珠镰孢菌(Fusarium moniliforme)、花生尾孢菌(Cercospora arachidicola)、辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、瓜棒孢霉菌(Corynespora cassiicola)、芸薹链格孢菌(Alternaria brassicae)具有不同程度的抑制作用,特别是对串珠镰孢菌的抑菌率达到72.97%;种子萌发实验表明,BR-1菌株可以显著提高番茄种子萌发率、促进番茄幼苗生长,并且能成功定殖番茄果实.本研究分离、筛选获得具有显著抗病、促生效果的生防内生细菌BR-1,为番茄灰霉病的生物防治提供了重要的生物资源.

    番茄灰霉病生防效果内生细菌抗真菌作用

    水稻AGL17-like亚家族研究进展

    李鲁华王忠妮徐如宏
    1606-1613页
    查看更多>>摘要:AGL17-like亚家族属于MADS-box基因家族,是一类植物中高度保守的重要转录因子.研究发现水稻(Oryza sativa)AGL17-like亚家族成员(包括OsMADS23,OsMADS25,OsMADS27,OsMADS57和Os-MADS615个基因)主要在营养器官中表达,其广泛参与根的生长发育、响应营养元素的供应以及逆境胁迫的响应等生物学过程.本综述重点阐述水稻AGL17-like亚家族成员和特异靶向水稻AGL17-like亚家族成员的miR444的研究进展,将有助于进一步开展该亚家族蛋白在调控植物生长发育和逆境胁迫等方面的研究,为推进分子育种工作提供一定的参考.

    水稻AGL17-like亚家族miR444生长发育逆境胁迫

    香蕉枯萎病菌效应蛋白研究进展

    王田陈代朋高雅王渝华...
    1614-1621页
    查看更多>>摘要:香蕉(Musa spp.)作为全球重要的粮食作物和贸易农产品,对社会经济发展具有重要作用.香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的土传维管束真菌病害,该病害对香蕉产业可造成毁灭性危害,严重制约了香蕉产业的发展.种植抗病品种是预防枯萎病发生的最经济有效的方式,然而抗病育种目前尚未取得突破性进展.近年的研究表明,效应蛋白是一类重要的毒性因子,其在病原菌的侵染、定殖以及与寄主植物的互作过程中发挥重要作用.本综述总结了香蕉枯萎病菌效应蛋白的研究进展,并就近年来香蕉枯萎病菌效应蛋白的生物信息学预测和分析、转录组学分析等多方面研究进行了讨论,着重介绍了一类重要的SIX(secreted-in-xylem)效应蛋白,为研究病原尖孢镰刀菌与香蕉的互作机制、香蕉抗病品种的培育以及香蕉枯萎病的防控策略提供科学依据.

    香蕉枯萎病效应蛋白生物信息学转录组学致病机理

    苦荞薄壳性紧密连锁SSR标记的开发及验证

    陈峥峰薛贤滨黎瑞源贾琼...
    1622-1631页
    查看更多>>摘要:苦荞(Fagopyrum tataricum)是我国重要的杂粮作物之一,其果壳类型不同导致脱壳效率不同,对苦荞产业发展有很大的影响.目前关于苦荞果壳类型的分子标记研究较少.为给苦荞果壳特性的改良及苦荞种质果壳类型的早期判断提供参考和选择依据,本研究开发并验证了与苦荞薄壳特性紧密连锁的SSR分子标记.结果表明,在薄壳基因1.4 Mb的定位区间内共扫描到286个SSRs,其中单核苷酸和二核苷酸重复类型数目最多,分别为92个和103个,出现次数最多的基序分别是A/T和AT/AT;SSRs重复次数大多集中在4~10次.共成功设计、合成了186对SSR引物,其中5对具有多态性的SSR标记与RILs群体的果壳类型形态学标记(a7GK)的连锁分析表明,SSR标记FtgGKssr-149和FtgGKssr-175与果壳类型连锁最紧密.对32个苦荞品种(系)果壳率和多态性SSR标记的关联分析表明,标记FtgGKssr-147、FtgGKssr-149和FtgGKssr-175与果壳率显著或极显著关联.本研究得到了3个与果壳类型紧密连锁以及和果壳率显著关联的SSR标记,可用于薄壳苦荞种质的分子标记辅助选择,对加速薄壳苦荞品种的育种进程具有重要意义.

    苦荞薄壳基因SSR分子标记

    奶牛妊娠相关糖蛋白PAG6多克隆抗体的制备及鉴定

    李志明袁梦仪许海涛蔡德霖...
    1632-1639页
    查看更多>>摘要:基于抗原抗体反应检测奶牛(Bos taurus)血液中妊娠相关糖蛋白(pregnancy-associated glycoproteins,PAGs)是目前世界上应用最普遍的牛早孕检测技术,以boPAG6作为标志物应用于母牛早期妊娠诊断的准确性更高,因此制备高敏感性的boPAG6多克隆抗体,能为奶牛早期妊娠诊断试剂盒的研发提供支持.本研究利用PCR技术扩增荷斯坦奶牛boPAG6(GenBank No.NM_176617.2)基因,构建重组质粒pET30a-boPAG6;在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达His-boPAG6蛋白并优化,以重组蛋白His-boPAG6作为免疫原免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)制备多克隆抗体,用ELISA方法检测血清效价,Western blot方法检测纯化后的抗体分别与重组蛋白His-boPAG6和奶牛血清的特异性反应,利用免疫荧光技术定位boPAG6在原代滋养层细胞中的表达.结果显示,本研究成功构建出大小为6534 bp的重组质粒pET30a-boPAG6,并在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)终浓度为0.5 mmol/L、诱导时间为8 h的条件下表达的His-boPAG6量最高,其蛋白分子质量为50 kD.以纯化后浓度为0.412 mg/mL的His-boPAG6蛋白免疫,ELISA中抗血清的效价为1:102400,多克隆抗体能特异性识别His-boPAG6抗原并有效区分妊娠和未妊娠奶牛血清,还可检测到原代滋养层细胞中存在boPAG6蛋白.本研究成功制备了boPAG6多克隆抗体,为奶牛早期妊娠ELISA检测系统的开发提供了理论支持.

    奶牛妊娠相关糖蛋白6(PAG6)原核表达多克隆抗体

    黄瓜绿斑驳花叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR检测方法的建立

    田沂民吴建祥陈磊罗金燕...
    1640-1648页
    查看更多>>摘要:黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物种传病毒,在世界各地均有发生,造成西瓜(Citrullus lanatus)、黄瓜(Cucumis sativus)、甜瓜(Cucumis melo)等作物的严重经济损失.CGMMV可由种子直接传播至下一代秧苗,为保障种子贸易顺利进行,有必要建立快速而准确的病毒检测方法.本研究以截获的带毒种子为材料,针对CGMMV建立了SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测方法,其中设计筛选特异、灵敏的引物是关键.利用多次筛选得到的引物对建立了SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测方法,实验结果表明该方法能够特异地检测CGMMV,不与其他侵染葫芦科植物的病毒发生交叉反应;灵敏度是RT-PCR方法的1000倍,是TaqMan探针实时荧光RT-PCR方法的100倍;且整个检测过程可在2.5 h内完成,是一种快速、灵敏、可靠的检测方法;应用该方法及TaqMan实时荧光RT-PCR方法同时对国内外198份种苗样品进行检测,结果显示kappa值大于0.82,说明两种方法具有高度一致性,本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR方法有效、可靠,为种子快速通关提供新的技术手段.

    黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)SYBRGreenⅠ实时荧光RT-PCR种子灵敏度特异性