查看更多>>摘要:目的 探讨黄芪-莪术配伍抑制NF-κB通路及诱导Lewis肺癌小鼠肿瘤自噬的作用机制.方法 采用腋窝皮下接种肺癌Lewis细胞悬液法建立Lewis肺癌小鼠模型,建模成功后将40只小鼠按随机数字表法分为模型组、中药组、顺铂组和中药+顺铂组,每组各10只.在建模后第3天开始给药,顺铂组给予腹腔注射顺铂(2 mg/kg),1次/3 d,共6次,并每天予灭菌双蒸水灌胃(8.2 g/kg);中药组每日予黄芪-莪术浓煎液灌胃(8.2 g/kg),1次/d,连续18 d,并腹腔注射稀释液[2 mg/(kg·3 d)];中药+顺铂组按照以上给药方法予中药和顺铂;模型组每日予等体积灭菌双蒸水灌胃并腹腔注射稀释液剂量同上.期间观察小鼠毛发、动态及进食、饮水情况,每2 d测量小鼠体质量、每4 d测算小鼠肿瘤体积.在造模20 d后,Western Blot法检测肿瘤组织NF-KBp65、p-NF-κB p65、IκB-α、p-IκB-α、LC3和Beclin-1的蛋白表达水平,ELISA法测定肿瘤组织中TNF-α和IL-1β的含量,并采用透射电镜观察肿瘤细胞超微形态的变化.结果 与模型组比较,中药组体质量无明显差异(P>0.05),顺铂组、中药+顺铂组体质量明显较轻,差异有统计学意义(P<0.01),各用药组小鼠肿瘤体积明显减小,差异有统计学意义(P<0.01)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及Beclin-1/β-actin值均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)、p-NF-κB p65/NF-κB p65及pIκBα/IκBα值、TNF-α和IL-1β均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与顺铂组比较,中药+顺铂组肿瘤体积值无明显差异(P>0.05)、Beclin-1/β-actin值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)、p-NF-κB p65/NF-KB p65及pIκBα/IκBα值及TNF-α和IL-1β均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值无明显差异(P>0.05);与中药组比较,中药+顺铂组体质量较轻(P<0.01),肿瘤体积较小,差异有统计学意义(P<0.01),Beclin-1/β-actin值升高,差异有统计学意义(P<0.01),p-NF-κB p65/NF-κB p65、pIκBα/IκBα、TNF-α 和 IL-1 β 值均降低,差异有统计学意义(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ 值差异无显著性意义(P>0.05).结论 黄芪-莪术配伍可以通过抑制IκB-α的磷酸化减少其降解,达到抑制NF-κB活化,并改善肿瘤炎性微环境,同时上调自噬相关蛋白的表达水平,诱导细胞自噬,进而抑制肿瘤生长.