首页期刊导航|中国生物工程杂志
期刊信息/Journal information
中国生物工程杂志
中国生物工程杂志

陈志南

月刊

1671-8135

biotech@mail.las.ac.cn

010-82624544；82626611-6511/6631

100190

北京中关村北四环西路33号

中国生物工程杂志/Journal China BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊由中科院文献情报中心和国家科技部中国生物工程开发中心共同主办，是我国生物工程领域全国性学术团体、国家一级学会——中国生物工程学会会刊。《中国生物工程杂志》(月刊)内容涉及医药生物技术、农业生物技术、轻化工生物技术、环境生物技术、海洋生物技术等专业领域。设有学术论文、研究进展、研究报告、专题论述、技术与方法、评论、新闻报道、生物工程领域知识产权研究、市场与商情、会议消息、动态等栏目，还以杂志专集、增刊等的形式出版生物工程专题著述。本刊创刊于1976年，是我国最早创刊的中央级综合性生物工程专业刊物，编辑委员会由国内知名生物工程专家、管理部门领导组成，发行面覆盖全国各省、自治区、直辖市、香港、台湾及海外有关大学、研究机构、图书馆也有相当的订户，和海外建立有广泛的刊物交换联系并被国内外著名检索系统收录。全年订阅价180元，邮发代号：82-673，各地邮局均可订阅。
正式出版
收录年代

    鼠李糖修饰增强曲妥珠单抗的Fc效应功能

    洪皓飞赵洁李艳春李丹...
    1-9页
    查看更多>>摘要：目的:探讨鼠李糖(rhamnose,Rha)修饰对曲妥珠单抗(trastuzumab,Tra)Fc效应功能的影响.方法:将二硫键还原的Tra分子与含交联剂的Rha衍生物分子偶联,构建Tra-Rha偶联物.使用聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹和高效液相分子排阻色谱对偶联物进行表征,并通过流式细胞术评估偶联物的HER2抗原亲和水平,免疫荧光和流式细胞术评估偶联物的抗Rha抗体募集能力.最后,通过在体外检测偶联物介导的补体依赖的细胞毒作用(complement-dependent cytotoxicity,CDC)和抗体依赖细胞介导的吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP),评估其Fc效应功能的增强水平.结果:成功构建了一款Tra-Rha偶联物.亲和实验和抗体募集实验表明Tra-Rha偶联物保留了良好的HER2抗原结合能力,并能将高水平抗Rha抗体选择性募集至靶细胞表面.CDC实验显示,Tra-Rha偶联物可介导显著的CDC效应对HER2阳性的SKBR3和SKOV3细胞进行杀伤,最高杀伤率分别为75％和70％,而相同条件下未修饰Rha的Tra则不能介导CDC.ADCP实验则显示,在SKBR3和SKOV3细胞中,Tra-Rha介导的ADCP水平较Tra分别提高了 2.3倍和1.2倍.结论:Rha修饰可作为一种经济高效的策略,用于同时增强Tra的多种Fc效应功能,进而改善Tra的治疗指数.

    曲妥珠单抗HER2鼠李糖Fc效应功能

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    激活鼠FcγRⅡb对天然免疫因子产生的影响

    赵睿杰孙杨杨李梦娟张晓晓...
    10-19页
    查看更多>>摘要：目的:了解FcγRⅡb对小鼠巨噬细胞天然免疫及抗病毒免疫作用的影响.方法:构建鼠源FcγRⅡb原核表达质粒pET28a-FcγRⅡb,将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,采用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化.以纯化后的重组蛋白作为抗原,免疫兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测血清效价,利用Western blotting技术鉴定抗体特异性,高免血清经饱和硫酸铵溶液粗纯和ProteinG Sapharose精纯获得兔抗鼠FcγRⅡb多克隆抗体.以该抗体激活小鼠腹腔巨噬细胞表面的FcγRⅡb,利用荧光定量PCR技术检测MHV感染上述细胞后相关细胞因子的mRNA转录水平.结果:单独激活FcγRⅡb 12～48 h时巨噬细胞中TLR3、IRF3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α和IL-1β的mRNA转录水平上调,免疫抑制因子TGF-β的mRNA转录水平下调.此外,在MHV感染小鼠腹腔巨噬细胞12～48 h时,与未激活组相比,FcγRⅡb激活后可上调细胞中 TLR3、IRF3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TNF-α 和 IL-1β 的 mRNA 转录水平,下调 TGF-β 的 mRNA 转录水平,且其病毒拷贝数及病毒滴度低于未激活组.结论:研究证明FcγRⅡb的活化能促进小鼠腹腔巨噬细胞天然免疫因子产生,同时具有一定抗病毒作用,为进一步探究FcγRⅡb在MHV感染过程中的作用奠定了基础.

    FcγRⅡb多克隆抗体小鼠肝炎病毒细胞因子天然免疫

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    在大肠杆菌体内外调控一致的5'-UTR序列挖掘

    李佩贤李娇娇刘倩张婕...
    20-31页
    查看更多>>摘要：基因元件的标准化和模块化为日益复杂的遗传系统改造设计提供了参考.目的:通过探究5'-非翻译区(5'-untranslated region,5'-UTR)在大肠杆菌体内外对翻译起始调控的一致性,挖掘通用型5'-UTR序列为模块化工程增添具有良好特征的遗传元件.方法:构建包含25 nt的5'-UTR随机文库化转至大肠杆菌中,通过测量样品荧光值(Flu)和OD600来量化其体内的相对活性值;利用大肠杆菌BL21 Star(DE3)细胞抽提物进行体外蛋白质表达,通过测定样品Flu来量化体外的相对活性值;依据5'-UTR的碱基分布、最小自由能等对文库序列特征进行分析;将得到的体内外真实活性值进行相关性分析并计算皮尔逊相关系数.结果:成功构建的554个5'-UTR变体文库在体内外蛋白质表达系统中表现出中等相关性(Pearson'r=0.64);其中,相对活性值高的5'-UTR序列富含AG,并且其在体内外均呈现自身最小自由能较大,而与16S rRNA杂交的自由能较小;文库数据量大小使体内外相关性分析产生一定的波动性但较为微弱;最后,发现高活性区间内的5'-UTR序列在体内外相关性较高,并从文库中优选出3条作为通用型5'-UTR应用于代谢工程与合成生物学领域.结论:体内外蛋白质表达的中等相关性推动了体外快速表征在研究体内生物合成中的拓展与应用,筛选出的通用型5'-UTR为基因线路的遗传设计提供了选择.

    5'-非翻译区大肠杆菌基因表达调控无细胞蛋白表达合成生物学

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    工艺参数对抗CD3 × Claudin 18.2双特异性抗体聚体形成的影响

    杨双惠李超影周永春谭文松...
    32-39页
    查看更多>>摘要：近年来,随着多种双特异性抗体药物的成功上市和基因工程技术的发展,双特异性抗体已成为抗体领域的研究热点.由于双特异性抗体结构复杂,其在生产过程中往往更容易产生聚体,不仅为下游纯化增加了难度,也提高了实验成本.为减少生产过程中聚体的产生,以表达抗CD3× Claudin 18.2双特异性抗体的CHO-K1细胞为研究对象,在2 L生物反应器上利用试验设计(Design of Experiment,DOE)法探究多种工艺参数对CHO-K1细胞合成抗CD3 × Claudin 18.2双特异性抗体过程中聚体形成的影响,建立了工艺参数与聚体含量间的模型,确定了优化的工艺参数控制范围,并在200 L生物反应器中对优化的工艺条件进行了验证.DOE结果显示:pH、补料浓度和碳源浓度对聚体形成影响显著且均呈负效应.当pH为7.0～7.2、补料浓度为5.5％和碳源浓度为8～10 g/L时,200 L生物反应器中的验证结果显示聚体的含量为(27.62±4.55)％,与模型预测的结果具有一致性.

    双特异性抗体CHO细胞聚体

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    POLQ基因敲除293T细胞系的构建及其在外源基因定点整合中的应用

    王瑶姜志洋蔡军雨樊榕榕...
    40-55页
    查看更多>>摘要：目的:利用CRISPR/Cas9技术构建POLQ基因敲除293T细胞系,并探讨该敲除细胞系在外源基因定点整合方面的应用.方法:构建靶向POLQ基因的pX330-sgRNA打靶载体,通过T7EI酶切验证,选取打靶效率最高的载体,转染293T细胞;利用流式细胞分选术、稳定单细胞克隆培养、TA克隆测序及蛋白质印迹等方法验证POLQ敲除情况;利用靶向AAVS1和FBL位点的含GFP/mCherry报告基因同源打靶载体,评估敲除的293T POLQ-/-细胞系在外源基因定点整合效率的变化,并通过测序方式验证供体报告载体是否定点整合到基因组中;最后分析POLQ敲除对293T细胞增殖和存活率的影响.结果:成功在293T细胞中稳定敲除POLQ基因;通过报告基因实验验证,敲除细胞系中外源基因定点整合效率平均提高2～7倍,且敲除POLQ基因对293T细胞系增殖和存活率没有明显影响.结论:成功利用CRISPR/Cas9技术构建具有高效定点整合能力的POLQ基因稳定敲除293T细胞系,为进一步利用该细胞系高效制备稳定整合外源基因(包括抗体基因)工程化细胞系奠定基础.

    CRISPR/Cas9POLQ293T细胞基因敲除定点整合

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    动物细胞培育肉及其种子细胞优选与永生化策略

    仝西魁付云辉郑文云王阳敏...
    56-65页
    查看更多>>摘要：鉴于传统养殖和屠宰获取肉类食品的方式,环境污染、资源浪费和多种有害成分残留等方面问题不断加剧,以及未来绿色低碳发展所面临的现实问题,随着"细胞农牧"科技的兴起,国内外研究者和企业家将目光转向了具有综合优势的细胞培育肉生产新模式.与以多种蛋白质资源为原料进行调制加工的"植物人造肉"不同,动物细胞培育所生产细胞培育肉,在营养品质和口感上更接近"真肉",有望成为细胞合成生物技术生产替代蛋白质的未来发展新热点,已成为新兴食品科技和产业与投资界的新宠.将细胞培育成具有一定规模和效率的"培育肉",将对生长效率与周期,以及规模化生产的成本控制具有基础性作用,其中最为关键的是种子细胞及其永生化扩增能力.主要就国内外有关动物细胞培育肉概况、种子细胞优选与实现其永生化策略,以及动物细胞培育肉方面科技伦理等进行较为系统的综述和分析,为我国开展相关研究和细胞培育肉产业提供重要参考.

    动物细胞培育肉种子细胞优选干细胞永生化人造肉科技伦理

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    哺乳动物细胞单抗生产的载体策略

    黄超宾申会涛杨立元孟思...
    66-77页
    查看更多>>摘要：抗体药物在生物医药行业所占比重持续增加,抗体高效表达需要在合适的系统中进行,载体在这一过程中尤其重要,可以参与一系列抗体生产步骤:搭配合适的元件来筛选阳性、高表达克隆,选择轻重链的最优表达比例,稳定基因转录,增强翻译效率,对抗体进行正确的翻译后修饰等.对哺乳动物细胞表达载体构建所涉及的启动子、增强子、绝缘子、支架/基质附着区、信号肽、多顺反子策略、筛选系统、加尾信号以及用于增强目的基因表达所涉及的遗传工具等研究进展进行讨论,以期全面了解哺乳动物细胞重组抗体表达所涉及关键点,克服与之相关的挑战,进而推动抗体疗法发展.

    单抗启动子增强子绝缘子支架/基质附着区信号肽内部核糖体进入位点2A肽筛选系统加尾信号遗传工具

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    新型动物纳米疫苗佐剂的作用机制与研发进展

    曲杨徐山根赵凯
    78-89页
    查看更多>>摘要：目前,动物疫苗佐剂主要以铝佐剂和油乳佐剂为主,存在免疫效果差、副作用明显等问题,亟须安全有效的新型佐剂替代.随着纳米颗粒在佐剂应用领域研究的深入,其良好的免疫增强作用、生物相容性、纳米尺寸效应、抗原负载能力、抗原缓释效应和组织靶向性等优势引起了研究人员的极大关注,有望作为新型动物疫苗佐剂用于动物疾病防治.迄今为止,针对如猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪流行性腹泻、非洲猪瘟、牛病毒性腹泻、口蹄疫、禽流感和新城疫等重要动物传染病纳米疫苗的研究取得了重大进展.综述总结了国内外动物疫苗纳米颗粒佐剂的应用及作用机制,分析了影响纳米颗粒佐剂免疫增强效果的理化因素,以期为新型动物疫苗佐剂研制及开发提供参考.

    动物疫苗纳米颗粒佐剂免疫效果作用机制影响因素

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    生物纳米孔在氨基酸检测及序列识别的研究进展

    郑玲王徐周硕陈萧寒...
    90-98页
    查看更多>>摘要：氨基酸是生物体的重要组成物质,为生命活动提供了物质基础.由于氨基酸种类多样,可以通过脱水缩合反应生成多肽,并通过数个多肽盘曲折叠产生蛋白质,对多肽和蛋白质的结构和功能造成影响.因此,识别不同氨基酸并对氨基酸序列进行读取具有重要意义.纳米孔检测技术是一种新型单分子传感技术,具有无须标记、灵敏度高、检测速度快等优点,广泛应用于核酸、蛋白质和多糖等待测物的检测.综述了近年来生物纳米孔在氨基酸检测及氨基酸序列识别中的应用,具体囊括了单个氨基酸的识别区分、不同多肽和蛋白质的检测以及潜在氨基酸序列技术的开发,并对相关发展前景提出展望.

    生物纳米孔单分子检测氨基酸多肽蛋白质测序

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据

    新型电化学传感器在生物分子检测中的研究进展

    郭红莲路小欢李琪琳张德太...
    99-107页
    查看更多>>摘要：随着"提高全民健康素养"的号召深入人心,自主健康监测的需求也逐渐扩大,代谢物分析在健康管理过程中占据不可替代的重要作用.与质谱法、色谱法和光谱法等传统分析技术相比,电化学传感器因其选择性强、灵敏度高和检测范围宽,在生物医学、环境科学、材料科学等领域均显示出巨大的应用潜力.目前,科研工作者已经开发出多种面向生物代谢物检测的电化学传感器,用于确定离体体液中疾病标志物的水平或进行在体实时动态监测.以生物分子检测为切入点,综述了便携式、植入式和可穿戴式新型电化学传感器在疾病相关代谢物分析中的应用进展,并对这些传感装置进行总结和比较,以期为生物传感器的创新及临床应用拓展提供参考.

    分子检测电化学传感器生物医学

      原文链接:
    • NETL
    • NSTL
    • 万方数据