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生物技术通讯
生物技术通讯

黄培堂

双月刊

1009-0002

swtx@263.net

010-66948856

100071

北京丰台东大街20号

生物技术通讯/Journal Letters in BiotechnologyCSTPCD
查看更多>>本刊主要报道生物技术（生物工程）及相关学科如分子生物学，分子遗传学等领域的最新科研成果与进展。设有研究报告、技术方法、综述、经验交流、专论研究快报、生物药园及知识介绍等栏目。
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    基于辐射防护基因集预测的辐射损伤防护化合物活性评价

    贾广彦刘祯钱坤周喆...
    693-697页
    查看更多>>摘要：目的:利用辐射损伤动物模型,评价基于辐射防护基因集预测化合物的防护作用.方法:C57BL/6J小鼠随机分为辐射对照组、氨磷汀(150 mg/kg)组、预测结构组[包括来那度胺(200 mg/kg)组和醛脱氢酶-2激动剂(5 mg/kg)组],各组给药后接受致死剂量8 Gy 60COγ射线一次性全身照射,观察30 d存活率,挑选辐射损伤防护效果较好的结构.小鼠注射生理盐水、氨磷汀、辐射损伤防护效果较好的药物来那度胺后给予6.5 Gy 60COγ射线一次性全身照射,另设正常组作为完全对照,各组于照射后第4、7、11、18、21 d尾静脉取血,检测外周血相关指标,第14 d取股骨,HE染色观察骨髓病理学变化.结果:与辐射对照相比,来那度胺可显著提高辐射小鼠生存率;来那度胺组小鼠外周血中淋巴细胞、白细胞、血小板含量均明显提高(P<0.05);来那度胺可增强小鼠的骨髓造血功能,减轻脂肪化.结论:来那度胺具有辐射损伤防护作用,机制涉及促进造血功能恢复等.

    药物重定位抗辐射药物来那度胺

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    小鼠视神经损伤模型建立及重组人神经生长因子疗效评价

    朱丹妮杨佳蕾吴诗坡李瑶...
    698-703页
    查看更多>>摘要：目的:建立并评价小鼠视神经损伤(ONC)模型,在此基础上初步探讨重组人神经生长因子(rhNGF)的疗效.方法:采用夹伤法建立ONC模型,比较不同夹伤时间条件下建立小鼠ONC模型的差异.采用免疫荧光染色,观察ONC后不同时间点视网膜神经节细胞(RGCs)存活率,评价ONC模型建立.在此基础上,以rhNGF滴眼液为治疗组、生理盐水滴眼液为对照组,初步评价rhNGF治疗ONC模型的疗效.结果:采用夹伤5 s与夹伤10 s建立ONC模型,术后7 d视网膜免疫荧光染色RBPMS结果提示,夹伤5 s组RGCs存活率低于假手术组(P<0.01),夹伤10 s组RGCs存活率低于夹伤5 s组及假手术组(P<0.05),并且出现玻璃体浑浊.采用夹伤5 s为后续评价ONC模型,在ONC后第7、14、21、28 d,RGCs数量随时间延长而不断减少,且其密度均显著低于正常对照组(P<0.01).在建立ONC模型基础上,治疗组和对照组分别连续13 d给予rhNGF滴眼液和生理盐水滴眼液,结果显示ONC后第14 d,治疗组RGCs存活率显著高于对照组(P<0.01).结论:采用挤压法建立了一种稳定的小鼠ONC模型,并基于此初步评价了rhNGF治疗ONC的保护作用,为进一步探讨rhNGF治疗机制及药效评价奠定了基础.

    视神经损伤视网膜神经节细胞重组人神经生长因子

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    小鼠原代肝细胞糖异生研究模型的建立

    李辉龙万禄明杨欢彭雨蒙...
    704-709,719页
    查看更多>>摘要：目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型.方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞的葡萄糖产出水平、糖代谢关键酶基因表达水平,以及cAMP-PKA信号通路的激活情况,建立小鼠原代肝细胞糖异生研究模型.结果:分离的小鼠原代肝细胞具有典型的肝细胞形态,可见双核,细胞相互接触,排列成肝索样结构.在胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞糖异生葡萄糖产出量显著增加,小鼠原代肝细胞糖异生关键酶基因表达明显上调,且胰高血糖素能够促进细胞cAMP积累进而诱导PKA激活.结论:小鼠原代肝细胞分离后状态良好,能够在葡萄糖产出水平及细胞内信号通路激活上高效模拟哺乳动物机体糖异生代谢,是一项体外研究糖异生代谢的有效模型.

    小鼠原代肝细胞分离糖异生细胞模型胰高血糖素

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    利用丙氨酸扫描突变探究crotalphine结构与镇痛活性的关系

    李梦刘艳丽王真宋云扬...
    710-713页
    查看更多>>摘要：目的:研究南美洲响尾蛇蛇毒中镇痛多肽crotalphine(CRP)的一级结构与其镇痛活性之间的关系,为进一步开展其机制研究和药物研发奠定基础.方法:采用丙氨酸扫描策略将CRP中所有非丙氨酸残基位点进行突变并化学合成突变体;构建小鼠醋酸扭体模型对CRP及其突变体的镇痛活性进行评价.结果:在小鼠醋酸扭体模型上,与CRP相比,突变体CRP-E5A的镇痛活性增强约20％(P<0.05),突变体CRP-Q8A和CRP-C14A的镇痛活性分别下降17％和30％(P<0.05).结论:CRP的第5位谷氨酸、第8位谷氨酰胺和第14位半胱氨酸是其重要的氨基酸位点,突变体CRP-E5A镇痛活性增强,而突变体CRP-Q8A和CRP-C14A镇痛活性下降.

    crotalphine突变醋酸扭体模型镇痛结构-活性关系

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    MIR6766的抗百草枯功能及其分子机制初探

    李娜陈晨董研博王健...
    714-719页
    查看更多>>摘要：目的:利用人肺癌细胞系A549研究对百草枯的潜在耐药基因及可能的分子机制.方法:使用CRISPR/Cas9全基因组敲除文库,在人肺癌细胞系A549中筛选出抗百草枯基因MIR6766和POR,将它们的sgRNA序列与CRISPR-LentiV2载体连接,分别构建敲除MIR6766、POR的A549细胞系.Q-PCR验证MIR6766敲除情况,CCK8法验证百草枯耐药性,Western印迹验证MIR6766与POR的关系.结果:筛选出抗百草枯基因MIR6766,构建了MIR6766敲除细胞系.与对照细胞相比,MIR6766敲除细胞和POR敲除细胞均表现出明显的抗百草枯作用.MIR6766敲除的细胞系中POR基因的mRNA与蛋白表达水平降低.结论:MIR6766表达水平下降可能诱导肺癌细胞的抗百草枯表型,其可能机制为间接降低了POR的表达水平,进而减弱百草枯对细胞的毒性作用.这些工作为进一步研究MIR6766对百草枯抗性作用的分子机制奠定了基础.

    百草枯CRISPR/Cas9MIR6766细胞色素P450氧化还原酶

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    利用特异性抗体建立金黄色葡萄球菌肠毒素B快速检测方法

    周刘忠胡乃静张丁木王志宏...
    720-726页
    查看更多>>摘要：目的:利用特异性靶向金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的抗体建立2种体外快速检测SEB的方法.方法:通过间接ELISA法及生物膜干涉技术测定3株抗体(LXY8、LXY9和LXY10)与SEB的结合活性;通过竞争ELISA法鉴定3株抗体的表位交叉情况;利用配对抗体建立双夹心ELISA检测法和胶体金试纸条层析技术检测SEB.结果:3株抗体与SEB均具有较高的亲和力(LXY8:KD=5.25×10-10 mol/L;LXY9:KD=5.18×10-9 mol/L;LXY10:KD=8.93×10-10 mol/L);经间接ELISA法获得生物素标记的抗体与SEB结合的最低饱和浓度为0.25μg/mL,以该浓度作为抗原表位竞争的浓度,竞争ELISA结果表明3株抗体与SEB结合的表位不交叉;根据双夹心配伍实验的结果,获得LXY8与LXY10的最佳配对,SEB的最低检测限为240 pg/mL,而基于LXY8与LXY10配对的胶体金检测试纸条能够在5～10 min内完成样品的检测,且检测灵敏度约为2 ng/mL.结论:基于双夹心酶联免疫吸附技术建立了一种特异、灵敏的体外检测SEB的方法,利用胶体金层析技术开发了SEB快速检测的胶体金检测试纸条,能够实现SEB现场快速高效检测.

    金黄色葡萄球菌肠毒素B检测抗体双夹心酶联免疫吸附检测法胶体金层析检测法

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    细胞短期冻存液的优化研究

    王雨琪郑幽蒋晓祎孙强...
    727-732页
    查看更多>>摘要：目的:探索不同配方的冻存液对细胞短期冻存复苏后存活率及增殖活性的影响,进而对细胞短期冻存液配比进行优化.方法:将多种贴壁细胞及悬浮细胞分别用4种不同配比冻存液冻存[(A)10％二甲基亚砜(DMSO)+10％胎牛血清(FBS)+80％DMEM/1640培养基;(B)10％DMSO+20％FBS+70％DMEM/1640培养基;(C)10％DMSO+50％FBS+40％DMEM/1640培养基;(D)10％DMSO+90％FBS],程序性降温(平均降温速率-1℃/min)至-80℃,冻存4 d后以相同方法复苏细胞并观察细胞生长形态学变化,分别拍摄细胞在复苏后24、30、48、72、96 h时的生长状态,并根据台盼蓝染色进行细胞计数,绘制细胞生长曲线.结果:冻存液中的不同血清浓度配比对贴壁细胞短期冻存复苏后的生长形态及增殖无明显影响;而对于悬浮细胞,高血清配比的冻存液(C、D组)短暂冻存后复苏细胞的存活率明显高于低血清配比组(A、B组),并且其生长增殖能力也明显减弱.结论:对于贴壁细胞的短期冻存与复苏,冻存液中DMEM:FBS:DMSO比例为8:1:1;而对于悬浮细胞的短期冻存与培养,FBS:DMSO为9:1的冻存效果最好.

    冻存液细胞冻存贴壁细胞悬浮细胞

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    血清脂联素与血糖血脂水平分析

    王萍梁乐傅茜欧晓灿...
    733-735,748页
    查看更多>>摘要：目的:比较某部队师级干部生化指标与脂联素(ADPN)水平以期找到其相关性,为官兵健康管理提供询证依据和正确指导.方法:288例体检师级干部分为高血压组和正常血压组、脂肪肝组和非脂肪肝组、高血糖组和正常血糖组,组内比较血糖(BS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ADPN、糖化血红蛋白(HbA1c)水平.结果:高血压组和正常血压组的各项生化指标差异无统计学意义(P>0.05);脂肪肝组和非脂肪肝组内比较,脂肪肝组的BS、TG、TC、LDL、HbA1c比非脂肪肝组高,脂肪肝组的ADPN、HDL比非脂肪肝组低,差异有统计学意义(P<0.05);高血糖组和正常血糖组内比较,高血糖组的BS、HbA1c比正常血糖组高,高血糖组的ADPN比正常血糖组低,差异有统计学意义(P<0.05),ADPN与TG呈负相关,与HDL呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论:脂联素水平与脂类、糖代谢密切相关,增加脂联素在体检中的检测,有助于早期发现代谢综合征.

    脂联素血糖血脂体检

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    后抗生素时代的辅助抗菌策略研究进展

    刘畅沈瀚
    736-742页
    查看更多>>摘要：随着细菌耐药问题的逐年加剧,新型抗生素的研发进度已经不能满足日益紧迫的临床用药需求.因此,能够与传统抗生素配合使用,有效提高其治疗效率的新型辅助抗菌策略正逐渐成为最近几年的研究热点.简要介绍了几种较为经典的辅助抗菌策略,并对其作用机制和发展现状进行总结.

    辅助抗菌策略细菌耐药抗生素

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    miR-21与胃癌的关系

    苏利佳苏华华王艳华赵金映...
    743-748页
    查看更多>>摘要：microRNA是近年发现的一类小分子RNA,在肿瘤增殖、侵袭和转移中发挥重要作用.它们在体液中较为稳定,常被视作评估疾病进展的生物标志物.临床上早期胃癌确诊较为困难,患者来诊时多为晚期,肿瘤进展较快,预后较差.因此,寻找新的早期检测和治疗胃癌的手段,提高患者的生存可能性是必要的.新近研究发现miR-21参与调控胃癌的增殖和迁移,在胃癌的病理进程中起关键作用.本文简要总结了miR-21与胃癌关系的研究进展,以期为胃癌的早期诊断和治疗提供新思路和新途径.

    胃癌miR-21生物标志物转移

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