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期刊信息/Journal information
中国动物传染病学报
中国农业科学院上海兽医研究所
中国动物传染病学报

中国农业科学院上海兽医研究所

黄光志

双月刊

1674-6422

bianjibu@shvri.ac.cn

021-34293142

200241

上海市闵行区紫月路518号

中国动物传染病学报/Journal Chinese Journal of Veterinary Parasitology北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由农业部中国农科院上海家畜寄生虫病研究所主办，农业部农业预防办公室协办的全国唯一的兽医寄生虫学专业杂志。
正式出版
收录年代

    一株麻鸡传染性法氏囊病毒新型变异株的分离鉴定

    王艳孙文渊朱维王峰升...
    83-88页
    查看更多>>摘要：近几年，鸡传染性法氏囊病毒新型变异株在我国广泛流行，主要发生于肉鸡，其致病力弱、隐蔽性强但能造成法氏囊严重萎缩。本研究从山东济宁地区临床出现法氏囊萎缩的发病麻鸡中采集法氏囊病料，接种SPF鸡胚进行病毒分离，通过RT-PCR方法进行病毒鉴定，将分离毒株回归SPF鸡进行致病性试验，同时对其主要抗原基因VP2进行进化分析。结果发现，该毒株能致死鸡胚;对其VP2基因进行测序比对和进化树分析发现，其与近几年的新型变异株基因序列的进化关系较近，同源性为96。1％～99。2％;人工感染SPF鸡第7 d法氏囊即出现较为明显的萎缩，第14 d萎缩更为明显，囊体比显著小于对照组(P＜0。01)。本研究分离到的麻鸡源传染性法氏囊病毒JN22株属于新型变异株，能导致SPF鸡法氏囊显著萎缩。

    鸡传染性法氏囊病毒新型变异株麻鸡法氏囊萎缩

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    CSBV的分离鉴定及其感染幼虫后的应答反应

    费世港刘合永王叶元冯敏...
    89-96页
    查看更多>>摘要：本研究旨在为了解江西某蜂场蜜蜂是否感染中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)并探究CSBV感染中蜂幼虫后的应答反应。采集该蜂场疑似感染CSBV的蜜蜂，采用RT-PCR的方法检测CSBV核酸，取阳性的蜜蜂样品进行病毒分离纯化、电镜观察及测序。将纯化鉴定后的CSBV对3日龄的中蜂幼虫进行人工感染，进行转录组测序，分析中蜂幼虫感染CSBV的应答反应。通过RT-PCR验证和电镜观察成功鉴定CSBV，并命名为CSBV-JX。CSBV-JX电镜观察直径为25～30 nm。对其进行分段扩增测序，发现基因组序列为8781 bp，对其进行系统发育分析，表明东方蜜蜂的SBV(AcSBV)与西方蜜蜂的SBV(AmSBV)明显分为两个分支，具有较强的地域分化性。转录组测序分析发现，中蜂幼虫在感染CSBV-JX后2 h有59个基因上调表达，83个基因下调表达;感染后12 h有68个基因上调表达，86个基因下调表达。本研究成功分离鉴定一株中蜂囊状幼虫病毒并命名为CSBV-JX。同时对CSBV-JX感染中蜂幼虫的转录组学分析发现，CSBV-JX感染2 h和12 h引起宿主的响应较小，这可能是CSBV-JX感染的2 h和12 h为病毒增殖的早期阶段病毒载量低，引起的宿主免疫响应小所导致。在CSBV-JX感染中蜂幼虫的2 h和12 h期间引起的差异基因与代谢通路关联较大，研究结果为阐明解析CSBV感染中蜂的分子机制提供了基础。

    中蜂囊状幼虫病毒分离鉴定系统发育分析转录组学

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    牛病毒性腹泻病毒1型KE-9基因缺失弱毒疫苗和牛病毒性腹泻病毒2型NY-93基因缺失弱毒疫苗对4～6月龄犊牛的安全性研究

    孙艳永杨德洪徐瑞陈宁...
    97-105页
    查看更多>>摘要：本试验旨在评估牛病毒性腹泻病毒1型KE-9基因缺失弱毒疫苗和牛病毒性腹泻病毒2型NY-93基因缺失弱毒疫苗对4～6月龄犊牛的安全性。12头4～6月龄犊牛随机分成3组，每组4头，各组分别肌肉注射牛病毒性腹泻病毒1型KE-9基因缺失弱毒疫苗、牛病毒性腹泻病毒2型NY-93基因缺失弱毒疫苗或疫苗稀释液，2 mL/头。试验结果表明，免疫后所有试验用牛无牛病毒性腹泻病毒引起的发热和临床症状，也不引起白细胞水平的下降;仅1头牛在免疫牛病毒性腹泻病毒2型NY-93基因缺失疫苗后第7 d检测到病毒血症和鼻腔排毒，在其他时间点均为阴性。所有犊牛均无大体病理学和组织病理学变化。综上所述，牛病毒性腹泻病毒1型KE-9基因缺失弱毒疫苗和牛病毒性腹泻病毒2型NY-93基因弱毒疫苗对4～6月龄的犊牛安全性良好。

    牛病毒性腹泻病毒基因缺失弱毒疫苗安全性

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    表达猪源GM-CSF重组PRRSV疫苗对同源高致病性毒株的免疫保护效力评价

    虞凌雪姜一峰杨莘于海...
    106-112页
    查看更多>>摘要：为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价，本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组，空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗组(rPRRSV-GM-CSF株)3头和攻毒对照组(DMEM+HuN4株)4头。疫苗对照组肌注免疫HuN4-F112株105 TCID50/头、疫苗组肌注免疫rPRRSV-GM-CSF株105 TCID50/头，实验空白组和攻毒对照组肌注DMEM 2 mL/头，免疫后28 d，疫苗组、疫苗对照组和攻毒对照组肌注HuN4株(105TCID50/头)。攻毒后的试验结果表明，免疫rPRRSV-GM-CSF重组病毒组和疫苗株HuN4-F112组获得完全保护，阴性对照组全部死亡;通过IDEXX试剂盒检测仔猪血清中PRRSV抗体水平可知，在免疫14 d后，疫苗组抗体水平显著高于疫苗对照组(P＜0。05);由流式细胞术分析体内免疫细胞亚群比例可知，疫苗组同疫苗对照组相比，疫苗组的重组疫苗株能够引起免疫记忆细胞亚群CD4+CD8+T在免疫后28 d显著升高，以及引发攻毒后其抗原递呈细胞显著增多，进而促进CD4-CD8+T的增殖以发挥抗病毒免疫应答。本研究筛选出了一株具有改善HuN4-F112弱毒疫苗株免疫效果的重组病毒rPRRSV-GM-CSF，为进一步研发广谱通用的新型疫苗奠定基础。

    rPRRSV-GM-CSF免疫记忆细胞T淋巴细胞杀伤性T淋巴细胞

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    三种复方植物精油驱蚊效果实验室观察研究

    李昱昊刘昱男张妍管志欣...
    113-117页
    查看更多>>摘要：养殖场中滋生的大量蚊蝇可以在畜禽之间和人畜之间传播蚊媒病毒，不仅会对养殖场造成经济损失，而且还会严重威胁人类健康。本试验为了观察三种复方植物精油在实验室驱蚊的效果。我们根据国标GB/T 13917。9-2009规定的攻击力试验方法，通过使用小鼠模型来测定三种复方植物精油对白纹伊蚊的驱避时效。本试验结果显示在该试验中，以白纹伊蚊作为本次试验蚊虫，两种驱蚊花露水在2 h以内对昆明小鼠有效保护率在70％以上;复方植物精油(APEX)在2 h内对昆明小鼠的有效保护率达到40％;通过调整植物精油成分，复方植物精油(APEX-1)对昆明小鼠有效保护时间为2 h，而且在4 h内有效保护率均可达到80％以上;复方植物精油(APEX-2)型对昆明小鼠有效保护时间为2 h，而且在4 h内有效保护率均可达到90％以上。结果表明，复方植物精油(APEX)是一种有效的蚊蝇驱避剂，通过调整植物精油成分后，有效保护率达到80％以上，其高效绿色环保的优势在养殖场蚊蝇驱避方面有较大应用前景。

    植物精油驱避剂白纹伊蚊有效保护时间

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    非洲猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

    刘影闫若潜王东方杨海波...
    118-130页
    查看更多>>摘要：建立一种特异、敏感、快速的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法，用于非洲猪瘟病毒(ASFV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的鉴别诊断。针对ASFV的B646L基因和HP-PRRSV的NVSP2基因分别设计特异性引物/探针对，经优化反应体系、反应程序等反应条件，建立一种基于探针技术的FQ-PCR方法，验证方法的敏感性、特异性和重复性，对130份临床样品进行检测，并与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)进行比较分析。本研究成功建立的ASFV和HP-PRRSV二重FQ-PCR检测方法在10-1～105 copies/μL模板范围内有良好的线性关系;对ASFV和HP-PRRSV基因出现阳性扩增，但对猪日本乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典株(VR2332株)、健康猪脾脏等7种病原核酸样品对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在0。53％～3。14％，重复性良好;对ASFV和HP-PRRSV的最低检测模板浓度均为10 copies/μL;利用建立的二重FQ-PCR方法对130份临床样品进行检测，检测结果与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)完全一致。本研究成功建立了鉴别ASFV和HP-PRRSV二重FQ-PCR检测方法，为ASFV和HP-PRRSV的鉴别诊断提供了快速、敏感、特异且能满足临床检测需求的检测方法。

    非洲猪瘟病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重FQ-PCR

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    水貂圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

    盛陈艳麻宝艺李健明宫庆龙...
    131-138页
    查看更多>>摘要：为快速检测水貂圆环病毒(MiCV)，本试验根据MiCV Cap基因序列设计合成特异性引物，建立了水貂圆环病毒SYBR Green Ⅱ实时荧光定量PCR检测方法。结果显示，该方法在模板浓度为1。0 × 106～1。0× 101 copies/μL范围内呈良好线性关系，相关系数为0。9983。本试验建立的检测方法对水貂阿留申病毒、猪圆环病毒2型、水貂肠炎病毒、犬瘟热病毒和猪伪狂犬病毒进行检测均无特异性扩增，批内和批间CV均小于2％，对重组阳性质粒的检测下限为1。0 × 101 copies/μL，比普通PCR的敏感度高100倍，对阳性样品DNA的检测下限为2。38 × 10-2 pg/μL，比普通PCR的敏感度高1000倍。应用该方法对吉林省部分毛皮动物养殖场的水貂、狐狸、貉和环境样品进行检测，结果其阳性率分别为57。23％、48。42％、39。71％和68。48％。上述结果表明，本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性，为MiCV的诊断及流行病学调查提供技术支持。

    水貂圆环病毒Cap基因SYBRGreenⅡ实时荧光定量PCR方法

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    牛病毒性腹泻病毒TaqMan探针荧光RT-PCR方法的建立和临床应用

    袁野董雅琴张慧刘爽...
    139-145页
    查看更多>>摘要：为建立一种牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的快速检测方法，本研究根据国内BVDV流行毒株5'-UTR序列保守区域设计1对特异性引物和TaqMan探针，并优化了反应条件，最终建立了一种检测BVDV基因1型(BVDV-1)的TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法，并开展7省份BVDV-1型检测和流行情况分析。结果显示:所建立方法能够特异性检测出BVDV-1，与基因2型BVDV、猪瘟病毒、边界病毒、牛冠状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒等病原无交叉反应;灵敏度高，最低检测下限为4。3 copies/μL;批内和批间变异系数均小于2％，重复性良好。 7省份规模化牛养殖场BVDV-1型平均阳性率为17。40％(161/925)，序列分析表明我国主要流行的为BVDV-1a，BVDV-1c亚型。本研究成功建立了一种良好的诊断BVDV的方法，监测地区优势流行毒株为BVDV-1a与1c亚型，为临床中BVDV早期诊断和流行病学调查监测提供了技术和数据支持。

    牛病毒性腹泻病毒荧光RT-PCR诊断流行病学调查

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    牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

    刘存刘孟超张月王晓玲...
    146-150页
    查看更多>>摘要：为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法，本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针，并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明，建立的LSDV荧光定量PCR方法在3。67 × 101～3。67 × 107 copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系，线性相关系数达0。9905;该方法具有良好的敏感性，其检测病毒系列含量下限为3。67 × 10 copies/μL;该方法特异性良好，与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应;该方法重复性较好，批内和批间的变异系数均介于0。133％～1。81％。该方法，临床样品的检测符合率达90％。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法，为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。

    牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCRGPCR基因诊断

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    猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用

    李桐赵润泽李博天李春琪...
    151-159页
    查看更多>>摘要：为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物，成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好，可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1。00 × 101 copies/μL，PCV3最低检测下限为1。00 × 100 copies/μL;重复性高，批内、批间的变异系数分别为0。01％～0。02％和0。02％～0。05％;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份，PCV2样品符合率为97。47％，PCV3样品符合率为96。85％;测序结果显示，PCV2均为2d亚型，PCV3均为3c亚型。结果表明，建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确，节约成本，可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。

    PCV2PCV3双重TaqManqPCR方法建立混合感染

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