查看更多>>摘要:目的:探讨通脉养心丸(TMYXP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响及可能的作用机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TMYXP低剂量组、TMYXP中剂量组、TMYXP高剂量组和抑制剂组,每组18只.假手术组和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠灌胃;TMYXP低、中、高剂量组分别给予1.0、2.0、4.0 g·kg-1·d-1 TMYXP灌胃;抑制剂组给予4.0 g·kg-1·d-1 TMYXP灌胃并腹腔注射EX-527(5 mg·kg-1·d-1).连续干预7d,末次给药后,利用结扎冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h,构建大鼠MIRI模型,假手术组操作同模型组,但前降支仅穿线不结扎.TTC染色法评价大鼠心肌梗死面积;TUNEL染色法观察心肌细胞的凋亡;试剂盒检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量;沉默信息调节因子1(SIRT1)去乙酰化酶荧光测定试剂盒检测SIRT1活性;Western Blot检测SIRT1/FOXO1信号通路中SIRT1、乙酰化叉头状转录因子1(FOXO1)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、B细胞淋巴瘤2(BCL-2)、BCL-2相关X(Bax)、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积,LDH、CK-MB和MDA水平,Acetyl-FOXO1、Bax、Cleaved-Caspase3蛋白表达均显著升高(P<0.05);心肌组织存在大量TUNEL阳性细胞;SOD和CAT水平,SIRT1活性,SIRT1、MnSOD、BCL-2蛋白表达均显著降低(P<0.05).与模型组比较,TMYXP低、中、高剂量组大鼠心肌梗死面积,LDH、CK-MB 和 MDA 水平,Acetyl-FOXO1、Bax、Cleaved-Caspase-3 蛋白表达均显著降低(P<0.05);TUNEL 阳性细胞数目均减少;SOD和CAT水平,SIRT1活性,SIRT1、MnSOD、BCL-2蛋白表达均显著升高(P<0.05).与TMYXP高剂量组比较,抑制剂组大鼠心肌梗死面积,LDH、CK-MB和MDA水平,Acetyl-FOXO1、Bax、Cleaved-Caspase3蛋白表达均显著升高(P<0.05);TUNEL阳性细胞数目有所增加;SOD和CAT水平,SIRT1活性,SIRT1、MnSOD、BCL-2蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论:TMYXP预处理可改善MIRI,其作用机制可能与其激活SIRT1/FOXO1信号通路进而发挥抗氧化应激和抗凋亡的效应有关.