查看更多>>摘要:目的 基于环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/水通路蛋白(AQPs)通路以及胃肠紧密功能,观察江西龙虎山铁皮石斛不同提取工艺(水提、醇提、多糖)对胃阴虚小鼠模型干预作用机制.方法 将雄性ICR小鼠120只随机分为正常组、模型组、益胃汤组(15 g/kg)、奥美拉唑组(1.7 mg/kg)、不同提取工艺铁皮石斛高剂量组(4.2 g/kg)、不同提取工艺铁皮石斛低剂量组(2.1 g/kg),每组12只.采用白酒和辣椒液的混合液灌胃建立胃阴虚小鼠模型,造模至第30天开始给药,持续至第70天,实验过程中小鼠每3天测定体重、饮水量、饮食量.实验结束后计算颌下腺指数、测定粪便含水量与唾液分泌量;HE染色观察胃组织变化;ELISA测定血清中血管活性肠多肽(VIP)、cAMP的含量;Western Blot检测cAMP/PKA/AQPs通路中PKA以及磷酸化PKA蛋白(p-PKA)、AQP3、AQP4、AQP5蛋白表达及紧密连接蛋白(ZO-1)、E-钙粘素(E-cadherin)表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠饮水量、体重、唾液分泌量、粪便含水率均下降(P<0.05),HE染色显示胃黏膜组织变薄、缺损,肌层丢失、腺体排列紊乱、炎性细胞浸润;血清中VIP、cAMP含量降低(P<0.05),蛋白p-PKA/PKA及AQP3、AQP4、ZO-1 表达下调(P<0.05,P<0.01),AQP5、E-cadherin 表达上调(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,给予不同铁皮石斛提取物后,水提高剂量、多糖高剂量组小鼠唾液分泌量升高(P<0.05),奥美拉唑及醇提、多糖组粪便含水率升高(P<0.05,P<0.01),3种提取物(除醇提低剂量组外)VIP、cAMP含量均升高(P<0.05),益胃汤组cAMP含量升高(P<0.05);3种提取物(除醇提高剂量组外)p-PKA/PKA比值上调(P<0.05,P<0.01),除益胃汤组外各组ZO-1表达均上调(P<0.05),3种提取物E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01);奥美拉唑组及水提物、多糖高剂量组AQP3蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01),3种提取物的高剂量AQP4蛋白表达均上调(P<0.01),多糖组AQP5蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05).结论 江西龙虎山铁皮石斛能够改善胃阴虚小鼠模型的症状,其作用机制与cAMP/PKA/AQPs通路以及紧密连接有关,其中水提及多糖的高剂量在促进唾液分泌量以及促进AQP3、AQP4表达上有优势,多糖在下调AQP5表达上有优势.