查看更多>>摘要:目的 探究CLEC14A在阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠模型中对足细胞损伤的保护作用,并通过半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞癌-2相关蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)信号通路探讨其机制.方法 将30只C57BL/6小鼠随机分成Sham 组(n=10)、Model 组(n=10)和 CLEC14A siRNA 组(siRNA 组,n=10).将小鼠足细胞MPC5分为对照组、FSGS组、FSGS-siCLEC14A组.采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测小鼠肾脏中CLEC14A mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的水平.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肾脏组织中Caspase-3、Bax和Bcl-1水平.结果 FSGS组及FSGS-siCLEC14A组各时间点的细胞增殖能力低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).FSGS-siCLEC14A组的48 h及72 h细胞增殖能力均低于FSGS组,差异均有统计学意义(均P<0.05).与对照组比较,FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的细胞凋亡率、Caspase-3、Bax水平上升,而Bcl-2水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与FSGS组比较,FSGS-siCLEC14A组的Caspase-3、Bax水平增加,而Bcl-2水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05).与对照组比较,FSGS组和FSGS-siCLEC14A组的24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血肌酐(Scr)及血尿素氮(BUN)水平增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);与FSGS组比较,FSGS-siCLEC14A组的24 h UTP、Scr及BUN水平增加,差异均有统计学意义(均P<0.05).与Sham组比较,Model组和siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降,VEGF mRNA上升,差异均有统计学意义(均P<0.05);与Model组比较,siRNA组小鼠的CLEC14A mRNA水平下降,VEGF mRNA上升,差异均有统计学意义(均P<0.05).与Sham组比较,Model组和siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平上升,而Bcl-2水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与Model组比较,siRNA组小鼠肾脏中的Caspase-3、Bax水平升高,而Bcl-2水平下降,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 CLEC14A可通过抑制Caspase-3、Bax、Bcl-2信号通路起到保护FSGS小鼠足细胞的作用.