查看更多>>摘要:通过体外细胞试验,探讨蔓菁粗多糖对RAW264.7 巨噬细胞的免疫活性影响.取对数生长期的巨噬细胞,调整细胞含量至1.2 × 105个/mL,接种于96孔板培养24 h,分别设置阴性对照(只加完全培养基),阳性对照组(LPS,1μg/mL),蔓菁粗多糖组(50,100,200,400 μg/mL),培养24 h后MTT法检测细胞增殖活力、吞噬能力、分泌NO能力;小鼠颈椎脱臼处死,无菌环境下取脾脏,调整细胞含量为1.0 ×106个/mL,接种于96孔板,设对照组、蔓菁粗多糖组(50,100,200,400 μg/mL)以及Con A(10 μg/mL)阳性对照组或LPS(5 μg/mL)阳性对照组,培养24,48,72 h.培养结束前4h,每孔加入MTT(5 mg/mL)10 μL,离心弃上清液,加入100 μL DMSO充分振荡后,用酶标仪测定波长570 nm处的吸光度,计算增殖指数.与阴性对照组相比,蔓菁粗多糖组(50 μg/mL)巨噬细胞存活率显著升高(p=0.001<0.01),LPS组、蔓菁粗多糖组(200,400 μg/mL)巨噬细胞存活率升高(p=0.011,0.021,0.027<0.05);与阴性对照组相比,LPS组与蔓菁粗多糖各剂量组巨噬细胞吞噬指数显著升高(p<0.01),与LPS组相比,蔓菁粗多糖组(50,100,200 μg/mL)巨噬细胞吞噬指数显著升高(p<0.01),蔓菁粗多糖组(400 μg/mL)巨噬细胞吞噬指数升高(p<0.05);与阴性对照组相比,LPS组及蔓菁粗多糖组(50 μg/mL)NO表达量显著升高(p<0.01),与LPS组相比,蔓菁粗多糖组(200 μg/mL)NO表达量显著降低(p<0.01),蔓菁粗多糖组(100,400 μg/mL)NO表达量降低(p<0.05);与阴性对照组相比,蔓菁粗多糖组(50,100,200 μg/mL)脾细胞(T细胞)增殖指数显著升高(p<0.01),conA组脾细胞(T细胞)增殖指数升高(p<0.05),与conA组相比,蔓菁粗多糖组(200 μg/mL)脾细胞(T细胞)增殖指数显著升高(p<0.01),蔓菁粗多糖组(50 μg/mL)脾细胞(T细胞)增殖指数升高(p<0.05);与阴性对照组相比,蔓菁粗多糖组(100,200,400 μg/mL)脾细胞(B细胞)增殖指数显著升高(p<0.01),LPS组及蔓菁粗多糖组(50 μg/mL)脾细胞(B细胞)增殖指数升高(p<0.05),与LPS组相比蔓菁粗多糖组(200,400 μg/mLl)脾细胞(B细胞)增殖指数升高(p<0.05).蔓菁粗多糖对RAW264.7细胞具有很好的免疫调节活性,蔓菁粗多糖对小鼠细胞免疫及体液免疫均有较强的促进作用.