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期刊信息/Journal information
中国动物传染病学报
中国农业科学院上海兽医研究所
中国动物传染病学报

中国农业科学院上海兽医研究所

黄光志

双月刊

1674-6422

bianjibu@shvri.ac.cn

021-34293142

200241

上海市闵行区紫月路518号

中国动物传染病学报/Journal Chinese Journal of Veterinary Parasitology北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由农业部中国农科院上海家畜寄生虫病研究所主办，农业部农业预防办公室协办的全国唯一的兽医寄生虫学专业杂志。
正式出版
收录年代

    弓形虫肌动蛋白抗原表位抗体的制备及应用

    庄宝灿朱进进余莉
    73-78页
    查看更多>>摘要：制备弓形虫肌动蛋白(TgActin)多肽表位抗体并探讨其应用价值。BepiPred 1。0 Server在线分析设计TgActin抗原表位，并与多种属Actin进行同源比对，选取并合成高特异性多肽片段序列免疫新西兰兔。末次免疫后收集兔血清并使用Protein G纯化抗体，SDS-PAGE检测抗体纯度，ELISA测定抗体效价，Western blot分析抗体的特异性及TgActin表位抗体作为内参抗体的可能性，免疫荧光观察胞内速殖子形态。结果显示，ELISA测定抗体效价为1∶128 000，Western blot结果显示抗体特异性识别弓形虫Actin，免疫荧光染色显示TgActin表位抗体可以标记纳虫泡内速殖子。结果表明，成功制备了TgActin多肽表位抗体，可用做弓形虫蛋白检测的内参抗体及其在细胞内的免疫荧光检测，为后续弓形虫研究提供了便利条件。

    弓形虫肌动蛋白表位抗体内参抗体免疫荧光

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    猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的初步建立

    严杰聪王帅勇王曼茱王娟...
    79-84页
    查看更多>>摘要：Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(PCV2)的主要结构蛋白，构成病毒的核衣壳，是PCV2的主要免疫保护性抗原，在PCV2血清学诊断中具有重要意义。本研究根据PCV2的ORF2基因序列设计特异性引物，通过PCR方法扩增得到去核定位信号肽的ORF2基因，并通过同源重组将其克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中，经测序鉴定成功获得重组质粒 pCold-Ⅰ-Cap。将重组质粒转化至感受态细胞BL21中进行表达，通过考马斯亮蓝染色以及免疫印迹试验检测Cap蛋白的表达，同时将纯化后的重组蛋白通过优化反应条件建立检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。结果表明:重组去核定位信号肽Cap蛋白可溶性表达且可以与PCV2阳性血清特异性结合，通过探索不同蛋白包被浓度以及不同一抗孵育浓度初步建立了间接ELISA检测方法，进而为PCV2抗体的有效监测奠定基础。

    猪圆环病毒2型Cap蛋白同源重组表达纯化ELISA

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    鸡毒支原体P31蛋白原核表达及膜定位鉴定

    李梅杨美岳筠王柏林...
    85-90页
    查看更多>>摘要：为筛选鸡毒支原体(MG)膜蛋白，利用生物信息学软件对其进行序列分析后，选择不含跨膜区的714 bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达(因其分子量约31 kDa，故而命名为P31蛋白)，表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体，运用ELISA方法检测抗体效价，提取MG液体培养物总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白，利用Western blot进行亚细胞定位。结果显示，P31蛋白具有跨膜结构和良好的B细胞抗原表位，原核表达后获取融合蛋白rP31，大小约为31 kDa，ELISA检测兔血清效价为1∶25 600，Western blot分析显示，rP31蛋白分布在MG膜表面。本研究证实了P31蛋白确为MG膜蛋白且抗原性良好，可做为研发MG新型诊断方法、基因工程疫苗及治疗药物的候选蛋白。

    鸡毒支原体P31蛋白原核表达膜定位

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    铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测

    宋若楠刘春草李航王真真...
    91-96页
    查看更多>>摘要：为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定，获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后，使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性，效价确定为8×104 IU/mg，显示出良好的应用前景。

    铁蛋白犬α干扰素融合表达抗病毒活性

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    猪流行性腹泻病毒CH/HB/CZ01的分离鉴定及致病性研究

    翟刚刘莹赵云环刘濮毓...
    97-103页
    查看更多>>摘要：为了获得猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)的地方分离株，并对其生物学特性和致病性进行初步了解。本研究在河北省开展PEDV的收集与分离鉴定，并进行遗传进化分析，同时评价分离毒株在仔猪上的致病性。将在该地区收集到的PEDV样品接种Vero细胞连续盲传，经RT-PCR检测以及基因测序鉴定，成功分离了CH/HB/CZ01毒株。利用GenBank中公布的PEDV毒株序列对该毒株进行S基因的遗传进化分析，结果显示，该毒株与我国近年来流行毒株序列的同源性为97。1%～98。3%，明显高于CV777、LZC和DR13等传统毒株的同源性，属于GⅡb亚群。将分离的PEDV病毒液按照2。0 mL/头接种健康仔猪，均出现腹泻等症状且接种2 d后直肠拭子经RT-PCR鉴定均为PEDV阳性。结果表明，分离株为变异毒株具有较强的致病性，为掌握河北省PEDV最新流行毒株的基因组特性以及生物学特性研究奠定了初步基础。

    猪流行性腹泻病毒遗传进化S基因致病性

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    犬冠状病毒Ⅱ毒株的分离鉴定及其基因的遗传进化分析

    刘可欣谭斌张傲王倩颖...
    104-110页
    查看更多>>摘要：自长春市某宠物医院临床症状为肠胃炎的幼犬腹泻粪便中分离到1株病毒，该分离毒株在CRFK细胞上出现明显的细胞病变，经RT-PCR、序列测定和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬冠状病毒株(Canine coronavirus，CCV)，命名为CCV-CC01。利用PCR技术扩增CCV-CC01 S基因序列全长4273 bp，ORF-3序列1071 bp，N基因序列全长1202 bp。对分离毒株与其他冠状病毒毒株进行同源性比对并绘制系统进化树，结果显示该毒株与美国分离的CCV S378株亲缘关系最近，处于同一分支，与SARS-CoV-2亲缘关系较远，该毒株的出现可能与国际贸易相关。该毒株的分离鉴定为犬冠状病毒病的诊断、防治及后续疫苗研发奠定了基础。

    CCV分离鉴定直接免疫荧光法遗传进化分析

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    银狐源沙门菌的分离鉴定、致病性及耐药性检测

    张召兴韩平李涵张艳英...
    111-117页
    查看更多>>摘要：为了解秦皇岛地区不同养殖场中银狐源沙门菌致病性、耐药情况及耐药基因的携带情况，本研究2019-2021年采集秦皇岛地区不同养殖场中患腹泻病银狐的肛拭子、粪便等病料组织194份，采用RT-PCR、PCR方法对采集的样品检测其犬瘟热病毒、轮状病毒及犬细小病毒;采用细菌常规分离鉴定、PCR方法进行沙门菌鉴定，采用人工感染小白鼠试验、K-B药敏纸片法和PCR法分别检测沙门菌的致病性、耐药性及耐药基因型。结果显示，犬瘟热病毒、冠状病毒及犬细小病毒检测为阴性;从194份病料组织中分离得到101株沙门菌，其中78株沙门菌分离菌株对小白鼠具有致病，死亡率为40%～100%;78株致病性沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、土霉素等9种药物耐药率在50%以上，对其他药物耐药率为5。1%～32。1%，以耐12、11、10种药物为主;耐药基因Sul1、Sul2、Sul3、aac(3)-Ⅰv、aac(6')-Ⅰb、TetA、TetM、TetR检出率在48。7%以上，其他耐药基因检出率为7。7%～21。8%，除了多粘菌素类药物，耐药表型与耐药基因之间存在相关性。本研究对该地区银狐源沙门菌病防控提供参考依据。

    银狐腹泻沙门菌致病性耐药性耐药基因

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    犬实验性感染乙脑病毒的研究

    林泠刘巧玲禹光美郑如雯...
    118-124页
    查看更多>>摘要：为探讨犬感染乙型脑炎病毒(JEV)的免疫应答及临床症状。用乙型脑炎病毒强毒株贵州分离株(JEV GZ株)和乙型脑炎病毒弱毒株(SA14-14-2株)感染3月龄比格犬，感染一定时间后检测血液中免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)水平和T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+T淋巴细胞变化;RT-PCR检测血液中的乙脑病毒;制作组织切片观察组织病变情况。乙型脑炎病毒强、弱毒株感染犬后，犬血清中IgM、IgG、TNF-α、IFN-γ水平升高，CD4+/CD8+比值升高;RT-PCR未检出病毒;组织切片无明显病变。犬感染乙型脑炎病毒强、弱毒株后，可产生免疫应答，无临床症状，且在组织中未检出病毒。因此，犬作为与人紧密接触的伴侣动物，非常适合作为评估人类JEV感染风险的哨兵动物。

    乙脑病毒免疫应答哨兵动物犬

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    戊型肝炎病毒感染状态下兔粪便菌群的变化探究

    李曼郁蓝海云李克坚周诚...
    125-131页
    查看更多>>摘要：本研究旨在探究HEV感染状态下兔粪便菌群的变化差异。本研究收集粪便HEV RNA阳性与阴性兔粪便各4份，分为P组(n=4，P1～P4)和N组(n=4，N1～N4)，对粪便16S rDNA基因序列中的V3V4区域进行高通量测序，并对所得数据进行了生物信息学分析。α多样性及PCoA分析结果显示2组间的粪便菌群组成存在明显差异;与阴性对照组相比，HEV感染组的拟杆菌门、酸杆菌门、绿弯菌门等显著增多(P<0。05)，瘤胃球菌属、拟杆菌属等丰度显著减少(P<0。05)。HEV感染后兔粪便菌群的构成、丰度等均存在一定差异，粪便菌群有可能成为HEV感染的潜在生物标志物。

    戊型肝炎病毒粪便菌群高通量测序

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    贵州地方品种鸡ALV流行病学调查

    张小波陈广温贵兰张喜懿...
    132-138页
    查看更多>>摘要：为了解2019-2021年贵州地方品种鸡AL病毒(Avian leukosis virus，ALV)流行情况。采用DF-1细胞对贵州9个地方品种鸡331份血浆进行ALV的分离;利用ALV p27抗原ELISA检测法对贵州地方品种鸡708份血样、180份蛋清、61份泄殖腔棉拭子进行检测。结果表明:贵州地方品种鸡331份血浆样品分离出6株ALV，总阳性率1。81%(6/331);2019-2021年采集贵州省不同品种鸡血样708份进行ALV p27抗原ELISA检测，共检测出289份阳性，总阳性率40。81%(289/708);180份蛋清中检测出39份阳性，总阳性率21。7%(39/180)。61份泄殖腔棉拭子中检测出16份阳性，总阳性率26。20%(16/61);说明贵州地方不同品种鸡存在不同程度的ALV感染，本研究为丰富贵州地区品种鸡感染ALV情况资料和贵州地方品种鸡AL的防控奠定基础。

    贵州地方品种鸡禽白血病病毒流行病学调查

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