查看更多>>摘要：目的:观察燧心汤对活性氧(ROS)介导的NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的影响,从而阐明燧心汤改善心力衰竭心室重构的分子机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组,模型组,燧心汤低、中、高剂量组和西药组,除假手术组外,采用左前降支结扎法构建心力衰竭大鼠模型,并分别给予对应药物处理.采用超声心动图测定心功能和心室重构的指标,采用ELISA法检测各组血清肌酸激酶(CK)、CK同功酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷光甘肽过氧化酶(GSH-Px)的含量与活性,使用HE和Masson染色评估心肌病理形态和胶原沉积,采用Tunel染色法检测心肌细胞凋亡水平.另取H9c2心肌细胞,分为空白组,模型组,燧心汤低、中、高剂量组和西药组.除空白组外,采用缺氧/再氧化法构建细胞模型并给予相应的血清进行干预.分别采用光镜下观察心肌细胞形态,采用Tunel染色法检测心肌细胞凋亡水平,流式细胞术检测心肌细胞的ROS水平,Western Blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白的表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠LVEDd、LVESd、CK、CK-MB、LDH、GSH-Px的水平和SOD的活力显著升高,心肌病理评分、胶原染色面积和Tunel阳性染色细胞数显著增加,LVEF、LVFS和MDA的水平显著降低(P＜0.01).与模型组比较,燧心汤组大鼠LVEDd、LVESd、CK、CK-MB、LDH、GSH-Px的水平和SOD的活力显著降低,心肌病理评分、胶原染色面积和Tunel阳性染色细胞数显著减少,LVEF、LVFS和MDA的水平显著增加(P＜0.05,P＜0.01).此外,与空白组细胞比较,模型组Tunel阳性染色细胞数和ROS水平显著增加,NLRP3、Caspase-1 p20、Mature IL-1 β、Pro IL-1 β、Mature IL-18、ProIL-18、GSDMD-NT蛋白的表达显著上调,GSDMD-FL蛋白的表达显著下调(P＜0.01);与模型组比较,燧心汤组Tunel阳性染色细胞数和ROS水平显著降低,NLRP3、Caspase-1 p20、Mature IL-1 β、Pro IL-1 β、Mature IL-18、ProIL-18、GSDMD-NT蛋白的表达显著下调,GSDMD-FL蛋白的表达显著上调(P＜0.01).结论:燧心汤能够通过ROS抑制NLRP3炎症小体活化,改善心室重塑,从而发挥治疗心力衰竭的作用.
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