查看更多>>摘要：目的 观察采用液氮保存GGTA1/β4GalNT2 双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮异种移植的效果.方法 采用冻存双基因敲除猪断层皮片及市售基因转染猪皮进行异种移植.切取双基因敲除猪皮后采用玻璃化方法储皮,使用时复温.受体为恒河猴,分为实验组和对照组,每组4 只.于每只猴背部切除4 块4cm×4cm的皮肤,形成全层皮肤切除模型,分别移植冻存双基因敲除猪皮和基因转染猪皮.术后不同时间点观察皮片成活情况,通过颜色、质地等评估皮片活力,留取标本进行病理检查;于术前及术后4、7、10、14、21 d取血清,检测IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-12 含量.结果 实验组猪皮存留于创面时间[10～21(14.5±3.4)d]长于对照组[7～14(10.6±2.7)d],差异有统计学意义(t =3.272,P =0.004).术后第4 天两组皮片均活力良好;术后第7 天,实验组2 个皮片局部有小水疱,对照组6 个皮片皮下有大水疱;术后第10 天,实验组5 个皮片被完全撕脱,6 个皮片整体仍温暖、柔软,对照组4 个皮片整体仍温暖、柔软;术后第12 天,实验组和对照组分别有3 个、1 个皮片整体仍温暖、柔软;术后第14 天,实验组1 个皮片仍保持温暖、柔软,对照组皮片则全部失活.病理观察显示,两组术后第4 天皮片组织形态均完整;术后第7 天,实验组皮片表皮细胞结构完整,对照组皮片表皮层细胞数量减少,两组均可见部分皮片与基底床形成嫁接;术后第10 天,实验组表皮层细胞数量减少,表皮与真皮交界面局部分离,对照组表皮层细胞数量较前进一步减少,仍可见部分皮片与基底床嫁接现象;术后第14 天,实验组表皮层细胞数量明显减少,仍可见嫁接现象,对照组可见基底床炎细胞浸润.实验组术后第10 天血清IL-2 和IL-4 水平、术前与术后第4 天血清IFN-γ水平、术后第14 天血清IFN-γ/IL-4 高于对照组.结论 采用冻存GGTA1/β4GalNT2 双基因敲除近交系五指山小型猪猪皮移植后皮片存留于创面情况良好,可获得较长的创面存留时间.
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