查看更多>>摘要:目的 观察不同浓度补肾安胎冲剂含药血清对大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)增殖及迁移能力的影响.方法 选取SPF级3~4周龄雌性SD大鼠,采用密度梯度离心法分离单个骨髓核细胞,收集培养7 d的细胞,分别通过双荧光染色法、免疫荧光法及流式细胞仪动态检测EPCs表面标志物等方法,鉴定分离培养的细胞为大鼠骨髓来源EPCs.制备补肾安胎冲剂含药血清,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(5%,10%,15%,20%)补肾安胎冲剂含药血清作用不同时间(24,48,72 h)的大鼠骨髓来源EPCs的增殖率;通过Transwell法检测大鼠骨髓来源EPCs的迁移能力.结果 经双荧光染色法鉴定,所培养细胞乙酰化低密度脂蛋白(Dil-AC-LDL)和异硫氰酸荧光素荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双荧光染色呈双阳性;免疫荧光染色后,EPCs特异性表面抗原人白细胞分化抗原CD34、CD133及血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)染色均呈阳性,其阳性细胞率分别为94.7%,93.8%,98.8%,提示培养的细胞为EPCs.MTT比色法检测结果显示,经不同浓度的补肾安胎冲剂含药血清干预培养后,5%,10%,15%浓度含药血清可促进大鼠骨髓源性EPCs增殖,其中10%浓度含药血清作用48 h的细胞增殖率最高(50.34%);Transwell法检测结果显示,每高倍镜视野下对照组及含药血清组(10%)EPCs平均迁移细胞数分别为(51.0±7.94),(105.5±15.22)个,与对照组比较,含药血清组(10%)EPCs的迁移能力明显增强(P<0.01).结论 补肾安胎冲剂含药血清可增强大鼠骨髓源性EPCs的增殖及迁移能力,且10%浓度作用48 h EPCs的增殖率最高.