查看更多>>摘要:目的 探索小檗碱(Ber)对多囊卵巢综合征小鼠卵丘扩展的作用及机制.方法 选取育龄21~25 d的SPF级雌性C57BU6小鼠28只,按照随机数字表法将其分为对照组、PCOS组、Ber低剂量组、Ber高剂量组,各7只.对照组皮下注射等体积玉米油溶剂,PCOS组、Ber低剂量组、Ber高剂量组均皮下注射脱氢表雄酮(6mg/100g,溶于玉米油溶剂),连续21 d.以小鼠出现动情周期紊乱为PCOS模型构建成功标准.随后连续28 d,Ber低剂量组灌胃200mg/kgBer,Ber高剂量组灌胃400 mg/kg Ber,PCOS组灌胃等剂量的生理盐水.向各组小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素及人绒毛膜促性腺激素,于输卵管壶腹部获取卵丘卵母细胞复合物(COC),体外培养0、6 h观察小鼠卵丘扩展情况.免疫组织化学检测各组小鼠卵丘颗粒细胞中FTO蛋白表达水平.向人颗粒细胞瘤样细胞系(KGN细胞)中转染PC3.1质粒(PC3.1组)及PC3.1-FTO质粒(PC3.1-FTO组),免疫荧光检测两组细胞中透明质酸合成酶2(HAS2)表达水平.向KGN细胞中转染NC siRNA(NC组)及FTO siRNA(siFTO组),免疫荧光检测两组细胞中HAS2表达水平.结果 与对照组比较,PCOS组小鼠动情周期失去周期性变化.提示PCOS小鼠模型构建成功.与PCOS组比较,Ber低剂量组小鼠动情周期逐渐恢复,Ber高剂量组小鼠动情周期仍失去周期性变化.与对照组比较,PCOS组小鼠COC卵丘细胞分布更致密,卵丘扩展受阻.与PCOS组比较,Ber低、高剂量组小鼠COC卵丘细胞分布更松散,卵丘扩展受阻明显改善.与对照组比较,PCOS组卵丘颗粒细胞中FTO表达水平升高(P<0.05).与PCOS组比较,Ber低、高剂量组卵丘颗粒细胞中FTO表达水平均降低(P<0.05).与PC3.1组比较,PC3.1-FTO组KGN细胞中HAS2表达水平降低(P<0.05).与NC组比较,siFTO组KGN细胞中HAS2表达水平升高(P<0.05).结论 Ber可能通过降低卵丘颗粒细胞中FTO表达水平,诱发HAS2表达水平升高,从而改善PCOS卵丘扩展状态.