查看更多>>摘要:目的 探究高压氧(HBO)处理对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑神经元的保护作用及其对胞外信号相关蛋白激酶1/2(ERK 1/2)信号通路的影响.方法 按随机数字表法将60只7 d龄健康SD大鼠分为假手术组、模型组、干预组、阻断剂组,每组15只.参考Rice-Vannucci法构建新生大鼠HIBD模型.假手术组大鼠暴露颈动脉后直接缝合;模型组大鼠造模后不给予任何治疗措施;干预组大鼠造模结束1 h后给予HBO干预;阻断剂组大鼠在每次HBO干预之前,尾静脉注射0.05 mg/kg ERK1/2阻断剂U0126.干预结束后每组随机处死10只大鼠取材,采用TTC染色测定脑组织梗死体积;HE染色观察脑组织病理形态改变;TUNEL染色观察并统计脑组织神经元细胞凋亡率;Western blotting实验测定脑组织ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax蛋白的表达;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定脑组织ERK1/2 mRNA、Bcl-2mRNA、BaxmRNA水平.4组剩余大鼠继续饲养14 d后,采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能.结果 与假手术组比较,其他3组大鼠脑组织梗死体积比及神经元细胞凋亡率明显增大(P<0.05);与模型组比较,干预组大鼠脑组织梗死体积比及神经元细胞凋亡率明显减小(P<0.05);与干预组比较,阻断剂组大鼠脑梗死体积比及神经元细胞凋亡率明显增大(P<0.05).假手术组大鼠脑神经元细胞形态正常,整齐密集,组织结构完整;模型组大鼠脑神经元细胞数量减少,排列紊乱,形成空洞,可见胞质空泡,细胞核固缩;干预组大鼠可见脑组织神经元局部损伤,但程度较模型组轻;阻断剂组大鼠脑组织神经元损伤较干预组严重,与模型组接近.与假手术组比较,干预组大鼠脑组织p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),其他3组大鼠脑组织Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,干预组大鼠脑组织p-ERK1/2和Bcl-2蛋白表达水平明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与干预组比较,阻断剂组大鼠脑组织p-ERK1/2和Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05).与假手术组比较,干预组大鼠脑组织ERK1/2mRNA水平明显升高,其他3组大鼠脑组织Bcl-2 mRNA水平明显降低,Bax mRNA水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,干预组大鼠脑组织ERK1/2 mRNA和Bcl-2 mRNA水平明显升高,Bax mRNA水平明显降低(P<0.05);与干预组比较,阻断剂组大鼠脑组织ERK1/2 mRNA和Bcl-2 mRNA水平明显降低,Bax mRNA水平明显升高(P<0.05).与假手术组比较,其他3组大鼠逃避潜伏期明显延长,平台穿越次数明显减少(P<0.05);与模型组比较,干预组大鼠逃避潜伏期明显缩短,平台穿越次数明显增加(P<0.05);与干预组比较,阻断剂组大鼠逃避潜伏期明显延长,平台穿越次数明显减少(P<0.05).结论 HBO处理可能通过激活ERK1/2信号通路上调下游凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值,抑制HIBD新生大鼠脑神经元凋亡,发挥脑组织保护作用.