查看更多>>摘要:目的:探索透骨血竭散对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)小鼠Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号传导及转录激活蛋白 3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路及调节性 T 细胞(regulatory T cells,Treg)/辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)失衡的影响.方法:急性口服毒性实验:30只C57BL/6小鼠随机分为对照组和5个处理组,每组5只;对照组小鼠灌胃无菌过滤水,处理组小鼠以不同剂量透骨血竭散灌胃(55 mg·kg-1、175 mg·kg-1、550 mg·kg-1、1 750 mg·kg-1、5 000 mg·kg-1),每日1次,连续14 d.采用概率加权回归法(Bliss法)计算小鼠半数致死量(median lethal dose,LD50)和95%置信区间.亚急性毒性实验:20只C57BL/6小鼠随机分为空白组和3个处理组,每组5只;空白组小鼠灌胃无菌过滤水,处理组小鼠以不同剂量透骨血竭散灌胃(500 mg·kg-1、1 000 mg·kg-1、1 500 mg·kg-1),连续28 d,每天观察小鼠的中毒症状.从30只C57BL/6小鼠中随机选取10只作为正常组,其余小鼠注射鸡Ⅱ型胶原蛋白(弗氏完全佐剂乳化);第21天,继续注射鸡Ⅱ型胶原蛋白(弗氏不完全佐剂乳化)增强1次,从而建立关节炎模型.第27天,将造模成功的小鼠随机分为模型组、透骨血竭散组(1 500 mg·kg-1),每组10只,连续灌胃5周,每日1次.采用流式细胞术检测脾脏Treg、Th17细胞数量,Western blot检测滑膜组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达水平,ELISA检测滑膜组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-1 β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量,并进行关节炎评分(arthritis score,AS).结果:透骨血竭散的LD50为3 878 mg·kg-1,95%置信区间为1 470~5 498 mg·kg-1.空白组和透骨血竭散各剂量组小鼠均未见死亡或明显的中毒症状.与正常组比较,模型组小鼠脾脏Treg百分比减少、Th17百分比增加(P<0.01);与模型组比较,透骨血竭散组小鼠脾脏Treg百分比增加、Th17百分比下降(P<0.01).与正常组比较,模型组小鼠滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-17含量升高且IL-10含量降低(P<0.01);与模型组比较,透骨血竭散组小鼠滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-17含量降低且IL-10含量升高(P<0.01).与正常组比较,模型组小鼠滑膜组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,透骨血竭散组小鼠滑膜组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达水平降低(P<0.05).结论:透骨血竭散可改善RA小鼠症状,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活,调节Th17/Treg平衡,抑制炎症反应有关.